乙肝病毒核心抗原单链抗体细胞内免疫抗乙肝病毒基因治疗研究

目的:研究乙型肝炎病毒核心抗原(HBcAg)人源单链抗体(ScFv)细胞内免疫抗乙型肝炎病毒(HBV)基因治疗的作用。方法:用噬菌体表面展示技术筛选特异性的HBcAg人源可变区单链抗体,聚合酶链反应(PCR)法和基因重组技术体外扩增HBcAg单链抗体基因,并构建表达HBcAgScFv基因的重组逆转录病毒载体pLXSN-HBcAg,转染PA317细胞,逆转录PCR(RT-PCR)方法验证细胞培养液上清分泌的假病毒颗粒中HBcAg ScFv的表达;将假病毒颗粒感染2.2.15细胞,酶联免疫吸附法(ELISA)检测其上清HBsAg和HBeAg,定量检测HBV DNA。结果:成功筛选出HBcAg ScFv,PCR扩增出750bp的全基因,构建HBcAg ScFv基因的逆转录病毒载体,转染PA317细胞,在上清中检测出含HBcAg ScFv假病毒颗粒的存在,上清感染2.2.15细胞后第3、5、7、14天,HBsAg、HBeAg逐渐下降,到14d时HBsAg已变为阴性,DNA定量检测无明显变化。结论:HBcAg ScFV能成功地在逆转录病毒载体中表达,并有抑制HBsAg、HBeAg表达的作用。

乙肝病毒前S/S抗原的重组表达质粒对HBV转基因小鼠的免疫治疗效应

目的:观察重组表达质粒pcDNA3.1-S2S和pcDNA3.1-S1S2S对HBVDNA复制和抗原表达的抑制效果.方法:以能表达乙肝表面抗原主蛋白S(HBsAg)的重组真核表达质粒为骨架,构建了分别含有HBV前S1抗原和/或前S2抗原编码基因的pcDNA3.1-S1S2S,pcDNA3.1-S2S,并各以100μg肌肉接种C57BL/6HBVDNA转基因小鼠,2,4wk后各加强免疫1次.然后动态检测小鼠血清HBVDNA水平的变化、抗-HBs和前S2抗体的诱生,以及肝组织内HBsAg、前S2抗原的消长情况.结果:小鼠肝组织内HBsAg,前S2抗原呈逐渐减弱的趋势,8wk后各有1/3的小鼠已不能检出.pcDNA3.1-S1S2S组接种后4,8,12wk抗-HBs阳转率分别为50%、67%、100%,明显高于pcDNA3.1-S2S组(17%、33%、50%)(P<0.05);而前S2抗体阳转率均低于17%.接种后8wk,12wk,pcDNA3.1-S1S2S组和pcDNA3.1-S2S组小鼠血清HBVDNA水平明显下降,均低于自身接种前、接种后4wk以及同期对照组(P<0.05).结论:重组表达质粒pcDNA3.1-S2S和pcDNA3.1-S1S2S接种,能够抑制转基因小鼠体内的HBV复制,而重组质粒中S1基因的共表达使抑制作用得到增强.

乙肝病毒前S1抗原检测及临床意义

标本来源：660份HBsAg阳性标本。试剂：乙肝病毒血清标志物检测试剂来自科华生物技术有限公司，前S1试剂来自新新医学生物工程公司。方法：按说明书操作。

抗乙肝病毒核心抗体抗独特型抗体的研究——Ⅱ.制备抗人HBcAb的抗独特型抗体的探讨

为了研究抗独特型抗体对乙型肝炎免疫反应的调节作用,我们用人的多克隆抗HBc作为免疫原,制备单克隆抗独特型抗体(抗-Id)。将人HBcAb用亲和层析纯化,并经SPA-Sepharose4B柱提取Fab片段。用4株抗正常人IgG的单克隆抗体与人HBcAb复合,制成免疫复合物,再用作免疫原,采用3种不同的免疫方案,除了采用国内外公认的抗原-抗体结合抑制试验检测外,还做了中和试验。在“独特型结合试验”中,在用人HBcAb包放的同时,还用正常人IgG作对照,以排除其抗异种免疫球蛋白的干扰。同时,还进行了交叉反应独特型的筛选工作。我们共对6300个克隆进行了检测,没有检出特异性的抗独特型抗体,却有1450个抗正常人IgG的阳性克隆。对出现上述结果的可能原因进行了探讨。

乙肝两对半探秘(二) 乙型肝炎病毒核心抗原及核心抗体

现已明了乙型肝炎(下称乙肝)病毒的核心抗原是乙肝病毒复制的重要标记物。完整的乙肝病毒包括包膜与核心两部分。核心部分含有环状双股DNA、DNA聚合酶(DNAP)、e抗原(HBeAg)和核心抗原(HBcAg),这些都属于乙肝病毒复制的主体,其中任何一种检测阳性,均表明病毒在人体内复制。

慢性乙型肝炎患者前S1抗原、抗核心抗体-IgM与病毒载量关系

目的:探讨慢性乙型肝炎患者乙肝病毒前S1抗原(Pre S1-Ag)、抗核心抗体-Ig M(anti-HBc Ig M)与病毒载量关系。方法:采用ELISA双抗体夹心法检测Pre S1-Ag,ELISA捕获法检测anti-HBc Ig M,荧光定量PCR法检测HBV DNA,分析Pre S1-Ag及anti-HBc Ig M与HBV DNA载量关系。结果:在234例患者中,Pre S1-Ag阳性率为60.3%,anti-HBc Ig M阳性率为53.4%。HBe Ag阳性、HBe Ag阴性的慢性乙型肝炎Pre S1-Ag阳性率存在显著差异,而两组之间anti-HBc Ig M阳性率无显著差异。Pre S1-Ag阳性患者HBV DNA载量明显高于Pre S1阴性患者。anti-HBc Ig M阳性患者与anti-HBc Ig M阴性患者HBV DNA载量差异不显著。结论:在慢性乙型肝炎患者中,无论Hbe Ag状态如何,Pre S1与乙肝病毒载量呈正相关。而anti-HBc Ig M则不能准确反映机体乙肝病毒载量情况。现报告如下。

鸭乙型肝炎病毒核心抗原特性及血清抗体的检测

自我国自然感染鸭乙型肝炎病毒(DHBV)的麻鸭肝脏,用蔗糖及氯化銫密度梯度离心纯化病毒核心颗粒(DHBcAg),其浮力密度范围为1.24～1.36g/ml,主要肽的分子量分别为32kD和18kD。用已知DHBV C基因编码的羧基端13个氨基酸合成肽制各能特异地与DHEcAg反应的抗体,并建立了检测DHBcAg的斑点酶免疫试验及ELISA法。初步用合成肽检测了感染鸭的抗-DHBc,发现在有DHEV复制的鸭血清中很少有抗-DHBc。

分析乙肝病毒DNA病毒载量与各型乙型肝炎血清标志物之间的关系

目的探讨乙肝病毒DNA病毒载量与各型乙型肝炎血清标志物之间的关系。方法选取2017年2月—2018年2月该院收治的82例乙肝患者。利用化学发光法测定82例患者HBV血清标志物乙肝表面抗原(Hepatitis B surface antigen;HBsAg)、乙肝表面抗体(Hepatitis B surface Antibody;HBsAb)、乙肝e抗原(Hepatitis Be antigen;HbeAg)、乙肝e抗体(Hepatitis Be antibody;HBeAb)以及乙肝核心抗体(Hepatitis B core antibody;HBcAb)等。利用化学发光法与荧光定量PCR方法分析不同免疫模式与乙肝病毒DNA病毒载量之间的关系。结果 1(HBsAg)、3(HBeAg)、5(HBcAb)与1、3阳性组HBV载量较高。大多10~5 U/mL以上。1、4(HBeAb)、5阳性与1、5组HBV载量相对较低。大部分患者在10~5 U/mL以下。结论 HBsAg、HBeAg、HBcAb与乙肝病毒DNA呈高度相关,作为乙型肝炎病毒感染复制的指标对乙肝患者进行分组有利于临床治疗。值的临床借鉴。

乙肝病毒转阴可以停止治疗吗

乙肝患者在血液中检测出表面抗原（HBsAg）、核心抗体（抗HBc）、e抗原（HBeAg）同时阳性，俗称“大三阳”；检测出表面抗原、核心抗体、e抗体（抗HBe）同时阳性，称“小三阳”；检测出表面抗原和核心抗体阳性，称为“小二阳”。这些情况都属于乙肝病毒现症感染者，如果同时化验乙肝病毒DNA阳性，肝功异常，就应该积极抗病毒治疗。

利用基因工程表达核心抗原转化的E抗原制备抗HBeAg单克隆抗体

采用两种变性剂将大肠杆菌基因工程高效表达的乙型肝炎病毒核心抗原(HBcAg)转化成为E抗原(HBeAg),其ELISA滴度达1:1000以上,而核心抗原滴度为零。用此抗原免疫小鼠,一次融合即获十四株抗乙型肝炎病毒E抗原的单克隆抗体。细胞培养上清抗体滴度为1:10—1:1000以上,腹水滴度为1:1000—1:100,000以上。十三株IgG、一株IgM。其中十株为抗HBeAg(b)决定簇,四株抗(a)决定簇。它们的敏感性及特异性与日本用血清E抗原制备的单克隆抗体效果完全一致。这是国内外首次应用基因工程表达核心抗原转化E抗原成功 地建立分泌抗HBeAg单克隆抗体杂交瘤细胞株。

唾液内乙型肝炎病毒抗原抗体状态的研究

为了解唾液内乙型肝炎病毒抗原抗体状况,本人用ELISA法检测了98例乙型肝炎病人和80例正常人的唾液和血清中乙肝病毒抗原抗体的5项指标:HBsAg,抗-HBs,抗-HBc,抗-HBe,HBeAg.现将结果报告如下.

乙肝病毒知多少

检查身体是否携带乙肝病毒时,常常会检查＂乙肝两对半＂。那什么是＂乙肝两对半＂呢？＂乙肝两对半＂是在检查是否感染乙型病毒性肝炎（俗称乙肝）时最基本的检查,包括表面抗原（HBsAg）,表面抗体（HBsAb）,e抗原（HBeAg）,e抗体（HBeAb）,核心抗体（HBcAb）五项,故又称＂乙肝5项＂。其中,表面抗原和表面抗体是一对;e抗原和e抗体是一对;常规检测只有核心抗体,而核心抗原很难在血液中检测到,故称＂乙肝两对半＂。下面我们就先认识一下这5个指标。

不同方法检测乙肝表面抗原的结果分析

目的分析酶联免疫吸附法(ELISA)和电化学发光免疫法((ECLIA)检测乙肝表面抗原(HBsAg)的结果及临床应用价值。方法收集经ELISA法检测过的120份临床患者的血清,其中包括:30份HBsAg阳性;30份HBsAg阴性但乙肝e抗体(eAb)和乙肝核心抗体(cAb)阳性;30份HBsAg阴性但cAb阳性;30份乙肝5项均阴性。对上述血清采用ECLIA进行HBsAg检测,并对检测结果进行比较分析。结果 30份经ELISA检测HBsAg阳性者经ECLIA检测均为阳性,其灵敏度达100.0%;30份经ELISA检测HBsAg阴性而eAb、cAb阳性者中,有4份血清经ECLIA检测HBsAg呈阳性,其阳性率达13.3%;30份经ELISA检测HBsAg阴性而cAb阳性者中,有2份血清经ECLIA检测HBsAg呈阳性,其阳性率达6.7%;30份血清经ELISA检测乙肝5项均阴性者中,有2份血清经ECLIA检测HBsAg呈阳性,其阳性率达6.7%。结论 ECLIA法较ELISA法敏感性更高;对临床避免医院内有创检查、手术、输血等情况下的乙肝感染和传播等具有重要应用价值。

抗HBcAg人源性单链抗体细胞内表达及其抗病毒复制的实验研究

应用人源性抗HBcAg单链抗体细胞内表达技术 ,探讨抗HBV复制基因治疗的应用价值。应用噬菌体展示和基因重组技术 ,从HBV感染的外周血淋巴细胞克隆了人源性抗HBcAg单链抗体 ,并重组至逆转录病毒载体。以人肝癌细胞smmc - 772 1和PLC/PRF/5为靶细胞进行基因共转染 ,分别测定实验组细胞上清中的HBsAg和HBeAg ,与对照组做比较 ,观察抗HBcAg单链抗体细胞内表达的抗病毒治疗作用。结果显示 ,在急性HBV感染的细胞株中 ,抑制病毒复制效率为 4 9%～ 6 1% ,在慢性病毒感染细胞 ,抑制率为 4 1%～ 5 4 %。实验结果表明 ,应用单链抗体细胞内表达技术 ,在抗病毒治疗研究中具有潜在的应用价值。应对HBV的 4个开放阅读框架编码产物进行全面的对比研究 ,以发现抑制效率高。

乙肝抗病毒治疗1年半,可以停药吗

我今年58岁，女性。多年前检查出乙肝表面抗原（HBsAg）、乙肝e抗原（HBeAg）和乙肝核心抗体（HBcAb）为阳性，是乙肝大三阳患者，2010年5月，我开始遵医嘱采用拉米夫定和阿德福韦联合用药进行治疗，期间去医院复查两次，化验结果均显示：谷丙转氨酶由152降至26．乙肝DNA滴度由原来的2．29×10＾7降至＜10＾3，AFP检查结果始终为阴性；但乙肝病毒表面抗原（HBsAg）、

乙肝抗病毒治疗一直不能转“小三阳”,怎么办

男性患者,28岁。16岁时发现有乙肝,当时家庭条件不好,没有治疗。一直到2007年7月才到医院检查治疗,当时的情况是:“大三阳”【即乙肝表面抗原(HBsAg)、乙肝e抗原(HBeAg)、乙肝核心抗体(抗-HBC)三项阳性】,DNA滴度非常高,肝功能异常。肝胆脾胰肾B超没有异常,轻度脂肪肝。当年8月开始至今,服用恩替卡韦抗病毒,基本上3~4个月复查1次,肝肾功能都挺好的,偶因喝酒或者睡眠不足致转氨酶升高。患者乙肝DNA已转阴性,但始终都没有转为“小三阳”【即乙肝表面抗原(HBsAg)、乙肝e抗体(HBeAb)、乙肝核心抗体(抗-HBC)三项阳性】,怎么办?

假如体检乙肝表面抗原阳性……

一位女青年体检查出HBsAg阳性,作为医师如何向其解释呢? 查查是否“大三阳”首先要嘱咐她全面检查乙肝病毒(HBV)指标,如果查出的是HB-sAg(表面抗原)、HBeAg(e抗原)和HBcAb(核心抗体)三项阳性,即所谓“大三阳”,应告知其体内有完整的HBV(乙肝病毒)存在,而且是在大量繁殖(复制),传染性非常强;

乙肝表面抗原携带者须知

在我国,有这样一个庞大的群体,据推算,目前其人数达9300万人之多。群体中的人员在网络中自称或互称"乙人"和"战友",他们之中,一直就不乏勇敢的斗士,斗争的目的,就是为了维护自己的合法权益,就是为了挪开深深灼痛每一位"战友"神经的两个字——歧视。

乙肝＂小三阳＂患者怎样进行抗病毒治疗

乙肝＂小三阳＂就是医学上所说的＂乙肝病毒e抗原呈阴性的慢性乙型肝炎＂.此类乙肝患者的乙肝表面抗原、乙肝病毒e抗体（而不是e抗原）和乙肝病毒核心抗体均呈阳性,其乙肝病毒DNA也可呈阳性.其血清谷丙转氨酶的水平可持续或反复地发生异常,经作肝组织学检查可发现其肝脏内有炎症病变.

低丙种球蛋白血症感染慢性乙型病毒性肝炎的HBsAg单克隆抗体

低丙种球蛋白血症病人细胞介导的免疫力正常。由于这些病人的细胞免疫系统迅速破坏受病毒感染的细胞,所以他们的乙肝病毒感染可能较严重。这类病人对异种蛋白并不产生抗体,因此,他们可用来自动物体内的单克隆抗体或多克隆抗血清治疗。研究人员已经治疗了两名原发性低丙种球蛋白血症患者。他们是慢性乙型肝炎表面抗原(HBsAg)及乙型肝炎e抗原(HBeAg)