量子点与抗乙肝表面抗原(HBsAg)抗体的偶联研究

表面带羧基的量子点(QD)在活化剂作用下与羊抗HBsAg共价偶联。本研究考察了4种不同封闭剂[乙醇胺(EA)、三羟甲基氨基甲烷(Tris)、氨基聚乙二醇单甲醚(PEG2000-NH2)和牛血清蛋白(BSA)]对制备得到的量子点-抗体复合物(QD-Ab)的影响。使用琼脂糖凝胶电泳和SDS-PAGE分析复合物的电泳和粒径特征,斑点免疫杂交反应比较不同封闭剂制备的复合物的免疫特性。结果表明:量子点可以与HBsAg抗体共价偶联形成QD-Ab复合物,斑点免疫反应表明其中PEG2000-NH2封闭的复合物免疫特性较优,可以检测到1.57 ng的HBsAg斑点。

一种乙肝病毒表面抗原和其单克隆抗体相互作用的SERS研究

利用银纳米粒子的表面增强拉曼散射(SERS)效应,研究了乙肝病毒表面抗原(HBsAg)和其鼠源单克隆抗体(单抗,Ab HBsAg)的相互作用.SERS光谱结果表明,Ab HBsAg分子主要通过位于非抗原结合部位的去质子化羧基(COO-)实现与银纳米粒子的结合.HBsAg与Ab HBsAg相互作用形成免疫复合物后,HBsAg分子上的色氨酸(Trp)残基特征振动完全消失,表明Trp残基位于HBsAg抗原分子的活性区,是HBsAg与Ab

乙肝表面抗原专一的单链嵌合抗体在大肠杆菌中的表达

利用重组ＰＣＲ技术将乙肝表面抗原专一单抗的Ｖｋ与人源的Ｃ基因拼接成轻链嵌合抗体Ｖ－Ｃ，再通过编码柔性肽段（Ｇｌｙ４Ｓｅｒ）的Ｌｉｎｋｅｒ与Ｖ连接成单链嵌合抗体ＳｃＦＶ－Ｃ，并分别在大肠杆菌的热敏与分泌型表达系统中进行表达。表达产物的Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ与间接ＥＬＩＳＡ检测结果表明，ＳＣＦｖ－Ｃ产两种系统中的表达产物均具有抗原结合活性，并已在分泌肽的指导下ＳｃＦｖ－Ｃｋ能被Ｅ．ｃｏｌｉ分泌出胞外。

用于乙肝表面抗原及其抗体同步检测压电免疫传感器阵列的研制

目的：研制同步检测HBsAg和anti—HBs的压电免疫传感器阵列。方法：采用戊二醛交联法，将乙肝表面抗体及其抗原固定于石英晶体表面，同步检测HBsAg和anti—HBs。结果：该阵列对HBsAg和anti—HBs能进行定性定量分析，可以明显区分阴阳性对照血清，以阳性频移值为信号，阴性频移值为噪声，其信噪比均大于2；其线性范围分别为1～25μg／ml和0．032～1．6mg／ml。结论：该阵列具有临床推广应用价值。

对氟苯酚-H_2O_2-HRP体系酶联荧光免疫分析研究ⅣF^--Zr-8-羟基喹啉-5-磺酸荧光法测定人血清中乙肝表面抗原和E抗体

将Ｚｒ－８－羟基喹啉－５－磺酸荧光体系与对氟苯酚为底物的酶促反应相偶合，建立了一种测定辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）及其标记物的新方法．测定ＨＲＰ的线性范围为０．０３１～３１ｍＵ／ｍＬ，检出限（３σ）为０．００７ｍＵ／ｍＬ．用于测定人血清中乙肝表面抗原和Ｅ抗体，结果令人满意．

医院工作人员乙肝表面抗原及抗体的检测分析

为了解医院内工作人员乙型肝炎表面抗原(HBsAg)与抗-HBs的情况,保护医务人员的健康,增强医院内医务人员的自身防护意识,减少医院内感染,我们对某医院196名工作人员进行了 HBsAg与抗-HBs的情况调查,结果分析如下。1 材料与方法1.1 对象:某院工作人员196人。其中男性93人,女性103人。内科系统包括消化呼吸内科、心肾内科、中医科、小儿科、老年病科、传染科共78人。外科系统包括普外肝胆科、泌尿烧伤颅脑外科、骨创伤显微外科、妇产科、麻醉手术科、五官科共72人。非临床科室包括特诊理疗科、药械科、检验科、病理科、放射科及机关共46人。所有受试人员均无乙肝疫苗接种史。统计学方法采用X^2检验。

单克隆抗体亲合层析法快速提纯乙肝表面抗原

用乙型肝炎病毒单克隆抗体(抗-HBsMcAb)与活化琼脂糖(MinileakLow)结合制备亲合层析柱,用于提纯乙型肝炎病毒的表面抗原(HBsAg)。对纯化前后的表面抗原活性用RPHA法进行了检测,提纯后的效价比提纯前提高了20多倍。用免疫电镜(IEM)对提纯物观察可见满视野22mm的小园颗粒。经SDS-PAGE电泳得出一条较清楚的带。

聚吡咯/乙肝表面抗体/多壁碳纳米管电极免疫伏安法测定乙肝表面抗原

将溶解在含0.05 mol·L^(-1)聚吡咯的pH 7.2磷酸盐缓冲溶液中乙肝表面抗体固定在多壁碳纳米管碳糊电极上,然后浸入牛血清白蛋白(1+99)溶液中制备聚吡咯/乙肝表面抗体/多壁碳纳米管修饰电极。利用免疫夹心反应原理,将溶液中的乙肝表面抗原和标记有辣根过氧化酶的乙肝第二抗体结合在此电极上。在含有邻氨基酚和过氧化氢的底液中,通过电化学反应生成电活性化合物3-氨基吩呃嗪。此化合物在-0.270及-0.320 V(vs. Ag/AgCl)处出现一对明显的氧化还原峰,其峰电流值与乙肝表面抗体质量浓度在0.2～200μg·L^(-1)范围内呈线性关系。方法的检出限(3S/N)为0.06μg·L^(-1)。

成人门诊查体者乙肝表面抗原和抗体检测结果分析

实践证明,乙肝表面抗体对乙肝病毒有杀伤作用,对人体产生保护.乙肝表面抗原在人群中的分布报道不一.调查人群中乙肝表面抗原和抗体情况对防治乙型肝炎具有重要意义,特别是血型与乙肝病毒感染率是否存在内在关系,即是否与遗传有关,但国外曾有血型与乙肝病毒感染存在相关性的报道,国内尚未见相关报道.为此,本文通过调查536例汉族成人乙肝表面抗原和抗体情况,并结合血型分布进行相关性分析,旨在探讨乙型肝炎患病率和防治对策.

2006年广州市荔湾区部分儿童乙肝表面抗原抗体调查

[目的]了解荔湾区10岁以下儿童乙型肝炎抗原携带情况,为今后制定科学的免疫规划提供依据。[方法]对10岁以下(包括10岁)本市户籍儿童进行随机抽查,检测乙肝表面抗原携带情况,并对其进行分析。[结果]检测了942名10岁以下儿童,乙肝表面抗原平均携带率0.74%,乙肝表面抗体平均阳性率72.40%。接种3针以上(含3针)与接种3针以下儿童的HBsAb(+)之间差异有统计学意义(P<0.05);不同年龄及性别儿童的HBsAg(+)之间差异无统计学意义(P>0.05)。[结论]"十五"规划新生儿乙肝免疫预防策略有效地降低了10岁以下儿童乙肝表面抗原的携带率。

西湖区8—15岁学生乙肝表面抗原、表面抗体检测结果分析

目的了解南昌市西湖区8～15岁学生中乙型肝炎表面抗原（HBsAg）携带及保护性抗体HBsAb（抗-HBs）产生情况。探讨预防乙肝的对策与措施。方法通过门诊采样，检测我区城乡8-15岁学生中乙肝血清标志物HBsAg、抗-HBs。结果HBsAg阳性率1．55％，性别、城乡不存在差异（P〉0．05）；抗-HBs阳性率21．5％，性别与城乡均不存在差异（P〉0．05）；于计划免疫程序外补种过至少一次乙肝疫苗与从未补种的抗-HBs阳性率存在显著差异（P〈0．01）。结论乙肝疫苗接种率的提高使乙型肝炎表面抗原携带率HBV明显减少，有必要对适龄对象进行补种。

条纹斑竹鲨的抗乙肝表面抗原的单域抗体筛选与重组抗体活性探究

对免疫HBsAg-ad亚型抗原的条纹斑竹鲨中血清、脾脏和淋巴细胞进行多组学测序结果综合分析筛选出特异性序列,构建重组表达质粒pET-Duet-his-sumo-Anti-HBsAg-S1、pET-Duet-his-sumo-Anti-HBsAg-S2,分别转化大肠杆菌BL21(DE3),并诱导表达以及纯化重组单域抗体,通过ELISA和细胞水平检测重组单域抗体的活性。结果表明:通过生物信息学分析筛选出2条特异性序列,在16℃、0.5 mmol/L诱导剂条件下可获得2 mg/mL以上的重组蛋白;ELISA检测显示均与HBsAg具有较好的结合力,细胞水平活性分析得到Anti-HBsAg-S1具有较好的病毒抑制效果和生物学活性。该研究结果为其他抗原的特异性抗体筛选提供理论参考。

通过乙肝病毒表面抗原及抗体流行病学分析探讨成人的免疫防护

目的通过对乙型病毒性肝炎表面抗原(HBs Ag)及表面抗体(HBs Ab)数据分析,研究其在人群中的分布及发展趋势,为其后续治疗及预防提供参考。方法收集2013年至2016年来院就诊患者和体检者的乙型肝炎表面抗原及表面抗体数据,按性别及年龄为参数对数据进行整理分析,以阳性率或阴性率为指标,分析其之间的变化规律,进行χ2检验以确定其在统计学上是否存在差异。结果 HBs Ag在男女总体感染率上存在显著性差异,P=0.00<0.01,其总体阳性率在经波动后呈下降趋势。分析中发现,31~50岁人群是乙型肝炎病毒(HBV)感染的高发时段。乙型肝炎表面抗体(HBs Ab)阴性者在男女之间差异无统计学意义P=0.989>0.05。HBs Ab阴性率高达51.5%。结论经过国家对乙型病毒性肝炎预防宣传力度的加大及个人预防意识的提高,其总体感染率显著下降。但HBs Ab阴性率仍很高,为加强HBs Ab阴性者的免疫防护。对HBs Ag及HBs Ab双阴性的成年人群,特别是31~50岁年龄段人群应加强乙肝疫苗的接种。

抗乙肝病毒表面抗原PreS1(20-47)的单链抗体在转基因烟草根分泌物中的初步表达

为探索利用植物根分泌表达重组蛋白的可行性,构建了含有抗乙肝病毒表面抗原PreS1(20—47)单链抗体(ScFv)基因的表达载体。该ScFv基因转化烟草后在烟草根部细胞的细胞质和内质网中获得表达。实验结果表明,5’端融合ER导向信号肽的重组ScFv可通过根分泌表达。

雅培Alinity i全自动化学发光免疫分析仪检测乙肝表面抗原及乙肝表面抗体的性能评价

目的:评价雅培Alinity i全自动化学发光免疫分析仪检测乙肝表面抗原(HBsAg)及乙肝表面抗体(HBsAb)的性能。方法:采用Alinity i全自动化学发光免疫分析仪分别检测HBsAg及HBsAb,验证其精密度、线性范围、检出限、功能灵敏度、携带污染率及正常生物参考区间;以雅培Architect i2000全自动化学发光分析仪的检测结果为对照,评价Alinity i全自动化学发光免疫分析仪检测结果与雅培Architect i2000全自动化学发光分析仪检测结果的相关性;采用Alinity i全自动化学发光免疫分析仪检测2021年度卫生部临床检验中心的室间质评样本来判定Alinity i全自动化学发光免疫分析仪与其他实验室检测结果的一致性。结果:Alinity i全自动化学发光免疫分析仪检测HBsAg低、高浓度质控品的批内精密度为3.76%和1.16%,批间精密度为6.72%和3.89%;检测HBsAb低、高浓度质控品的批内精密度为3.81%和3.28%,批间精密度为6.42%和3.78%。在HBsAg及HBsAb的线性回归方程中,相关系数r2分别为0.9958和0.9950,回归方程斜率a分别为0.9881及1.0244。HBsAg及HBsAb的定值质控品稀释到检出限浓度后检测的均值分别为0.0530 IU/mL及2.0755 mIU/mL,CV分别为8.87%和7.89%。HBsAg及HBsAb的功能灵敏度验证浓度分别为0.025 IU/mL以及0.625 mIU/mL。HBsAg与HBsAb的携带污染率皆为0。体检健康者HBsAg及HBsAb的检测结果均落在正常参考范围内。Alinity i全自动化学发光免疫分析仪与Architect i2000全自动化学发光分析仪比对检测HBsAg及HBsAb的线性相关方程相关系数r2分别为0.9982及0.9939,回归方程斜率a分别为0.9568及1.0355。Alinity i全自动化学发光免疫分析仪检测卫生部室间质评样本的结果与预期结果一致。结论:雅培Alinity i全自动化学发光免疫分析仪检测HBsAg及HBsAb的稳定性、重复性和精确性完全符合临床应用要求。