中药金叶败毒制剂抗人巨细胞病毒感染作用机理的实验研究

目的探讨中药金叶败毒制剂拮抗HCMV感染的机理。方法采用体外实验的方法建立HCMV感染细胞膜型,给予金叶败毒制剂干预后,FQ-PCR法检测细胞内、维持液HCMV DNA拷贝数,放射免疫法测定TNF-α、IL-6蛋白含量,同时观察致细胞病变作用(CPE)的产生及传播,设立病毒对照组和更昔洛韦(GCV)药物对照组。结果分别于感染后24h、48h,实验组细胞内及维持液HCMV DNA拷贝数(5.35±0.581gGE/106HEL,2.78±0.32lgGE/106HEL)明显低于病毒组(6.12±0.65lgGE/106HEL,3.31±0.381gGE/106 HEL,P<0.05),持续至感染晚期,与药物对照组比较,感染晚期实验组细胞内病毒负荷量(7.97±0.81lgGE/106HEL)高于药物对照组(7.05±0.71lgGE/106HEL,P<0.05),但两者维持液内病毒量无明显差异(P>0.05)。分别于感染后12h、24h,实验组维持液TNF-α、IL-6蛋白含量(0.63±0.06pg/ml,38.26±4.19pg/ml)明显高于病毒组(0.55±0.04pg/ml,31.12±4.53pg/ml,P<0.05)和药物对照组(0.56±0.05pg/ml,32.40±4.97pg/ml,P<0.05),在感染后24～36h达高峰(P<0.01)。实验组和药物对照组CPE出现(感染后96h)均晚于病毒组(感染后48h),且发展缓慢,感染后168h仅为++,而病毒组则达到++++。结论金叶败毒制剂可有效抑制感染细胞内HCMV DNA复制及病毒自受染细胞内释放。

银杏黄酮甙对人巨细胞病毒感染促进动脉粥样硬化发生和发展的保护作用

目的:探讨银杏黄酮甙对人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)感染在促进动脉粥样硬化发生和发展中的保护作用。 方法:本实验分为4组,分别为正常对照组,银杏黄酮甙组,HCMV感染组,HCMV感染+银杏黄酮甙组。用MTT比色法观察细胞增殖情况,采用硝酸还原酶法检测银杏黄酮甙对一氧化氮含量的影响。观察银杏黄酮甙对HCMV引起的离体培养的人脐静脉内皮细胞(hunlan umbilical vein endothelial cell,HUVEC304)增殖和分泌一氧化氮的影响。 结果:银杏黄酮甙促进HUVEC304增殖较正常对照组升高,银杏黄酮甙可以剂量依赖性地增强HUVEC304 MTT光吸收值,当加入1×10^(-5)～1×10^(-2)mol/L银杏黄酮甙时MTT光吸收值较对照组分别增加14％,16％,19％和51％(t=9.67～18.72,P<0.01),一氧化氮分泌量明显增加;HCMV感染的细胞增殖显著升高,MTT光吸收值较对照组增加91％(t=7.96,P<0.05),而一氧化氮分泌量显著降低44％(t=19.46,P<0.01);银杏黄酮甙可以剂量依赖性地抑制HCMV促进的HUVEC304增殖,当加入1×10^(-5)～1×10^(-2)mol/L银杏黄酮甙时MTT光吸收值较HCMV组分别降低5％(t=0.14,P>0.05),19％(t=26.75,P<0.05),29％(t=9.68,P<0.01)和33％(t=9.30,P<0.01),促进一氧化氮的分泌量升高57％(t=6.84,P<0.01)。 结论:银杏黄酮甙可抑?

人巨细胞病毒感染对单核细胞和内皮细胞株ECV-304间趋化和黏附的增强作用

目的 研究人巨细胞病毒(HCMV)感染对单核细胞及内皮细胞株表达趋化因子的影响,以及对两者之间趋化和黏附的影响。方法 通过ELISA法和半定量RT-PCR的方法,检测CMV感染对单核细胞株(THP-1)及内皮细胞株(ECV-304)几种趋化因子及其受体表达的改变,同时通过趋化实验和黏附实验研究内皮细胞对单核细胞的趋化和黏附的改变。结果 HCMV感染可刺激ECV-304分泌MCP-1、GROα,在mRNA水平可改变内皮细胞MCP-1、CRO-α和IL-8表达,先下调后上调(IL-8除外);而对单核细胞趋化因子受体CCR2、CXCR2的表达在mRNA水平却有明显的下调作用(P<0.05)。HCMV感染可显著增强内皮细胞对单核细胞的趋化和黏附。结论 HCMV感染可增强内皮细胞对单核细胞的趋化和黏附,参与炎症反应,这可能与CMV上调内皮细胞趋化因子表达有关。

冠心病患者抗磷脂抗体与人巨细胞病毒感染关系的初步研究

目的 :研究抗磷脂抗体与冠心病的相关性 ,探讨人巨细胞病毒 (HCMV)感染与冠心病患者抗心磷脂抗体 (ACA)产生的关系。 方法 :76例冠心病患者分为急性心肌梗塞组 (n=2 3) ,陈旧性心肌梗塞组 (n=2 7) ,不稳定性心绞痛组 (n=2 6 ) ;采用酶联免疫吸附试验法检测血清抗心磷脂抗体—免疫球蛋白 G(ACA- Ig G)、人巨细胞病毒—免疫球蛋白 G(HCMV- Ig G)、人巨细胞病毒—免疫球蛋白 M(HCMV- Ig M) ,并与正常对照组 (n=30 )进行比较。 结果 :76例冠心病患者 ACA的阳性率为 35 .5 3% ,显著高于正常对照组的 6 .6 7% (P<0 .0 5 ) ,而急性心肌梗塞组、陈旧性心肌梗塞组、不稳定性心绞痛组 3组间 ACA的阳性率无差异。全部患者 HCMV的感染情况高于正常对照组 ,HCMV感染的冠心病患者 ACA的阳性率显著高于 HCMV未感染的冠心病患者 (P<0 .0 5 )。 结论 :抗磷脂抗体可能是促使冠心病发生的免疫因素之一 ;HCMV不仅与冠心病的发生有关 ,而且与冠心病患者ACA的产生有密切关系。

热毒清抗人巨细胞病毒作用的临床及实验研究

探讨中药热毒清抗人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）的临床疗效及体外抗病毒作用。方法：临床检测ＨＣＭＶ抗体，对其中诊断为ＨＣＭＶ活动性感染者１４例采用热毒清口服治疗，疗程１８～３０天；同时应用ＥＬＩＳＡ、ＰＣＲ和贝利婴幼儿发育量表等方法评价其临床疗效。体外实验研究采用病变抑制法在人胚肺（ＨＥＬ）细胞培养上测定热毒清对ＨＣＭＶ ＡＤ１６９毒株的抑制作用。结果：１４例孕前或孕期活动性感染者，服药１８～３０天后，ＨＣＭＶ－ＩｇＭ全部转阴（１４／１４），血ＨＣＭＶ ＤＮＡ大部分转阴（７／１０），尿和宫颈分泌物排毒被抑制（４／４，１／１）。其中５例孕前或孕期治疗后分娩足月正常新生儿，２例为无症状排毒新生儿，３例未感染。体外实验研究结果：热毒清的最大无毒浓度（ＴＤ０）为２０μｇ／Ｌ，最小有效浓度（ＭＴＣ）为 ５μｇ／Ｌ，治疗指数（ＴＩ）为４。表明热毒清具有抗ＨＣＭＶ作用，随药物浓度增高作用增强。结论：中药热毒清是抗ＨＣＭＶ安全、有效的药物，为临床治疗ＨＣＭＶ活动性感染尤其是孕期感染提供了有效的参考。

黄芪注射液对人巨细胞病毒感染的粒-单系祖细胞体外增殖的影响

目的 探讨黄芪注射液对人巨细胞病毒 (HCMV)感染的粒—单系祖细胞 (CFU GM )体外增殖的影响。方法 采用造血祖细胞体外培养技术 ,用黄芪干预HCMV感染的CFU GM ,观察计数CFU GM的产率 ,大小 ,峰期及维持时间。结果 ①黄芪组每 2× 10 5个细胞中CFU GM簇和集落的产率分别为 333.33± 12 .6 9和81.2 3± 4 .93,病毒组每 2× 10 5个细胞中簇和集落的产率分别为 16 7.80± 16 .6 3,5 3.70± 1.6 7,两者相比差异有显著性 (P <0 .0 1)。②黄芪组大集落的比例占 (9.5± 0 .8) % ,明显高于病毒组 (2 .7± 1.0 ) % ,P <0 .0 1。③黄芪组大集落峰期出现早 ,集落和大集落维持时间长。结论 在体外黄芪注射液可以促进HCMV感染的CFU GM增殖。

异基因造血干细胞移植后发生巨细胞病毒感染的临床分析

本研究总结巨细胞病毒(CMV)感染的发生及治疗。对北京军区总医院血液科2010年1月至2012年1月140例异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)患者的临床资料进行了回顾性分析。结果表明,140例allo-HSCT中48例患者发生移植后CMV感染,发生率为34.3%,首次检出CMV-DNA阳性中位时间为移植后45(33-68)d,CMV定量范围为1.25×103-5.5×106,其中2例为CMV相关性间质性肺炎,5例为CMV相关性出血性膀胱炎。发生移植物抗宿主病(GVHD)患者共65例,其中合并CMV感染32例,占49.2%。应用更昔洛韦、膦甲酸钠抗CMV治疗45(33-68)d后CMV-DNA转阴,有效率为100%。共有12例患者治疗过程中出现一过性的白细胞和血小板减少。结论:allo-HSCT后较易发生CMV感染,发生GVHD的患者CMV感染发生率也较高,更昔洛韦、膦甲酸钠对allo-HSCT后CMV感染的治疗效果可靠,且不良反应少。

造血干细胞移植术后患者巨细胞病毒感染发生率及临床转归

采用免疫组化法对 10 0例异体造血干细胞移植 (Allo HSCT)和 14例自体造血干细胞移植 (Auto HSCT)术后患者、17例非移植患者以及 2 7例正常供者CMVpp6 5抗原血症检出率进行分析。 10 0例Allo HSCT术后患者随访观察 18(4～36 )个月。结果 :Allo HSCT者 91%在不同病期出现CMVpp6 5阳性 (CMV I) ,其中 5 6 %出现CMV疾病 ;急性移植物抗宿主病 (GVHD)发生率为 5 4 % ,时间为 2 5 (11～72 )天 ;慢性GVHD 5 2 9% ;CMV相关性死亡率为 2 1% ,在各种死因中占主要地位。CMV I在异体移植后好发 ,而在Auto HSCT术后患者、非移植患者以及正常人群极为少见。提示 ,CMV感染与急慢性GVHD呈显著相关性 ,是影响预后的主要因素。

异基因造血干细胞移植后巨细胞病毒感染和抢先治疗临床研究

目的:探讨异基因造血干细胞移植(allogenic hematopoietic stem cell transplantation,allo-HSCT)后巨细胞病毒(CMV)感染的临床特点和抢先治疗的临床意义。方法:对本院血液科2010年3月至2015年3月134例alloHSCT患者巨细胞病毒感染情况进行了回顾性分析,对移植后CMV感染的累积发生率、发生中位时间、相关危险因素,抢先治疗有效率、转阴中位时间以及移植患者长期生存率进行了统计分析。结果:Allo-HSCT后74/134例发生CMV血症(55.2%),发生的中位时间为移植后34(14-283)d。单因素分析和多因素分析均显示,预处理方案中应用ATG和合并Ⅱ-Ⅳ度a GVHD为CMV血症的危险因素;85.1%(63/74)的患者经抗病毒抢先治疗后转为阴性,转阴中位时间为15(5-82)d,其中2例患者发生巨细胞病毒肺炎。未发生CMV血症组移植患者5年生存率为66.3%,CMV血症组移植患者5年生存率为49%,两组间差异有统计学意义(P=0.041)。结论:预处理过程中使用ATG及合并Ⅱ-Ⅳ度a GVHD有可能增加allo-HSCT后CMV感染的发生率,抢先治疗能有效阻止CMV血症患者发病。

外周血单倍体造血干细胞移植后巨细胞病毒感染临床研究

目的探讨外周血单倍体造血干细胞移植（haploidentical peripheral blood hematopoietic stem cell transplantation,HID-PBSCT）后巨细胞病毒（CMV）感染的临床特点及抢先治疗的临床意义。方法对本院血液科2010年3月至2015年3月69例外周血单倍体造血干细胞移植患者巨细胞病毒感染情况进行回顾性分析,统计移植后CMV感染的累积发生率、发生中位时间、抢先治疗有效率、转阴中位时间以及对移植患者长期生存（5年）的影响。结果移植后51例（73.9%）发生CMV血症,发生中位时间为移植后36天（14-120天）;80.4%（41/51）的患者经抗病毒抢先治疗后转为阴性,转阴中位时间为21天（7-82天）,其中2例患者发生巨细胞病毒肺炎,未发生CMV血症组5年生存率为50%,CMV血症组5年生存率为52.9%,两组差异无统计学意义（P=0.829）。结论 HID-PBSCT有较高的CMV血症发生率,抢先治疗能有效阻止CMV血症患者发病。

抗病毒合剂治疗巨细胞病毒感染41例

目的:观察抗病毒合剂治疗巨细胞病毒感染的疗效。方法:将41例巨细胞病毒IgG阳性、分泌物和(或)尿液每毫升HCMV-DNA>1.0×103拷贝的患者采用抗病毒合剂治疗4周,观察并分析结果。结果:41例患者治疗1疗程,治愈23例,显效12例,有效5例,无效1例,总有效率97.56%。结论:清热解毒、利湿益肾的抗病毒合剂治疗巨细胞病毒感染疗效显著。

黄蓝颗粒体外的抗巨细胞病毒、风疹病毒作用

目的:探讨黄蓝颗粒体外抗巨细胞病毒(HCMV)、风疹病毒(RuV)活性及其作用机制。方法:根据病毒复制周期,设计3种药物抗病毒作用方式来观察黄蓝颗粒对HCMV、RuV的作用。通过观察细胞病变效应(CPE)、噻唑蓝比色法(MTT)检测细胞存活率,以确定该药物体外抗HCMV、RuV的活性。结果:黄蓝颗粒既不能阻断病毒吸附,亦不能直接杀灭病毒,而是通过抑制病毒生物合成发挥抗病毒活性。黄蓝颗粒对HEL细胞的半数毒性浓度(TC50)为1.71g·L-1,对HCMV半数抑制质量浓度(IC50)为0.09g·L-1,治疗指数(TI)为19.0;黄蓝颗粒对Vero细胞的TC50为1.96g·L-1,对RuV的IC50为0.10g·L-1,TI为19.6。结论:黄蓝颗粒通过抑制病毒生物合成机制发挥抗HCMV、RuV的作用。

巨细胞病毒感染对甲型肝炎患儿血清及唾液中抗HAV-IgM检出率的影响及意义

目的 :研究巨细胞病毒感染对甲型肝炎患儿血清及唾液中抗HAV -IgM的影响。 方法 :在 5 1例急性黄疸型肝炎 (急黄甲肝 )合并巨细胞病毒 (CMV)感染的患儿中 ,于病程 10d内、1～ 3月、3～ 6月同时检测血清和唾液中抗HAV -IgM。 结果 :原发性CMV感染者 1～ 3月的唾液抗HAV -IgM检出率明显高于血清检出率 (10 0 % ,37.5 % ,P =0 .0 11) ,活动性CMV感染者唾液中抗CMV -IgM检出率显著高于非活动组及 4例单纯急黄甲肝者。结论 :唾液中抗HAV -IgM可能不直接来自血浆 ,更具临床检测价值 ,活动性CMV感染可延缓唾液中抗HAV

探究异基因造血干细胞移植术后巨细胞病毒感染及慢性移植物抗宿主病的关系

目的分析白血病患者行异基因造血干细胞移植术后出现巨细胞病毒感染和慢性移植物抗宿主病间的临床关系。方法 92例行异基因造血干细胞移植的患者作为研究对象,于术后的100 d^1年通过微粒子酶免分析法、巨细胞病毒pp65抗原检测依次对巨细胞病毒感染情况进行1次/月的检测。对于慢性移植物抗宿主病患者同时予以酶联免疫吸附法(ELISA)对白细胞介素-2(IL-2)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平进行检测。比较术前与术后100 d^1年巨细胞病毒活动性感染率的差异;对巨细胞病毒感染静止期与活动期的局限性与广泛性慢性移植物抗宿主病患者IL-2、TNF-α水平加以观察比较。结果依据巨细胞病毒阳性细胞等检测结果知晓,术后100 d^1年,异基因造血干细胞移植的巨细胞病毒活动性感染率为32.61%(30/92),明显高于术前的16.30%(15/92),差异具有统计学意义(χ~2=6.6187,P=0.0101<0.05)。30例慢性移植物抗宿主病患者巨细胞病毒感染活动期,局限性与广泛性慢性移植物抗宿主病患者分别为10、20例;巨细胞病毒感染静止期,局限性与广泛性慢性移植物抗宿主病患者分别为22、8例。巨细胞病毒感染活动期,广泛性慢性移植物抗宿主病患者外周血IL-2、TNF-α水平明显高于局限性慢性移植物抗宿主病患者,差异具有统计学意义(P<0.05);广泛性慢性移植物抗宿主病患者,巨细胞病毒感染活动期外周血IL-2、TNF-α水平明显高于巨细胞病毒感染静止期,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论行异基因造血干细胞移植术后,巨细胞病毒活动性感染能够经提高外周血之中的IL-2、TNF-α水平进而将慢性移植物抗宿主病产生及严重程度增加。

复方黄芪颗粒抗人巨细胞病毒作用的临床及实验研究

目的:探讨复方黄芪颗粒抗人巨细胞病毒(HCMV)的临床疗效及体外抗病毒作用.方法:临床检测HCMV抗原,对其中诊断为HCMV阳性感染13例孕期患者采用复方黄芪颗粒口服治疗,疗程120～180 d;同时应用免疫酶组化染色法(EIA)和贝利婴幼儿发育量表等方法评价其临床疗效.体外实验研究采用MTT法在人胚肺(HEL)细胞培养中测定复方黄芪颗粒对HCMVAD169毒株的抑制作用.结果:13例孕期阳性感染者,服药120～180 d后,8例有效,有效率62%(8/13),其中4例完全转阴,转阴率为31%(4/13);7例孕妇治疗后分娩足月正常新生儿.体外实验研究结果表明复方黄芪颗粒半数有效浓度(IC50)为1.58μg/ml,半数中毒浓度(TD50)为13μg/ml,治疗指数(TI)为8,复方黄芪颗粒抗HCMV作用随药物浓度增高而增强.结论:中药复方黄芪颗粒是抗HCMV安全、有效的药物,此结果可为临床治疗HCMV活动性感染、尤其是孕期感染提供参考.

补锌联合中药治疗育龄妇女巨细胞病毒感染的机理研究

目的 采用补锌联合中药金叶败毒颗粒治疗巨细胞病毒(HCMV)感染,探讨补锌治疗对患者机体过氧化物的调控机理。方法 火焰原子吸收光谱法对185 0例育龄期妇女血清中的锌进行测定及用ELISA法筛查出HCMV -IgM阳性患者14 0例,随机分为不同剂量治疗组3组及对照组,用紫外分光光度计检测治疗前后的SOD、MDA值,SPSS11.5软件进行相应的统计分析。结果 治疗后对照组与治疗组①组间比较,无显著差异,HCMV -IgM转阴率χ2 =0 .0 6 5P =0 .799,tSOD =0 .2 5P =0 .80 4 ,tMDA =0 .396P =0 .6 94 ;治疗组②③组间比较,无显著差异,HCMV -IgM转阴率χ2 =0 .15 9P =0 .6 90 ,tSOD =- 0 .35 9P =0 .72 2 ,tMDA =0 .2 6 3P =0 .794 ;对照组与治疗组②③组间比较,有极显著差异,HCMV -IgM转阴率χ2 =9.2 85P =0 .0 0 2 ,tSOD =- 7.6 0 4P =0 .0 0 0 ,tMDA =12 .94P =0 .0 0 0。结论 补锌联合中药金叶败毒颗粒治疗可明显提高HCMV感染的转阴率,其机制与治疗后机体抗氧化作用增强有关,给予2 0mg/d葡萄糖酸锌片联合中药治疗是最佳剂量选择。

应用FQ-PCR及ELISA技术诊断孕妇巨细胞病毒感染的研究

目的 探讨荧光定量聚合酶链反应 ( FQ- PCR)及 ELISA检测孕妇血清的 CMV- DNA、抗CMV- Ig M、抗 CMV- Ig G在诊断 CMV感染中的意义。方法 用 FQ- PCR和 ELISA同时检测 1 68例孕妇血清标本的 CMV- DNA、抗 CMV- Ig M、抗 CMV- Ig G。结果 CMV- DNA阳性 5 7例 ( 33.9% ) ,CMV- Ig M阳性1 1例 ( 6.6% ) ,CMV- Ig G阳性 1 5 2例 ( 90 .5 % ) ,三种检测结果间比较有显著性差异 ( P <0 .0 1 )。结论 FQ-PCR检测 CMV- DNA灵敏度高 ,可作为 CMV感染的筛选指标。ELISA检测抗 CMV- Ig M的灵敏度低 ,仍是CMV现症感染的指标。因此 ,联合 FQ- PCR、ELISA测 CMV- DNA、抗 CMV- Ig M及抗 CMV- Ig G对筛选CMV感染及判断是否现症感染意义较大。

208例不良孕育的孕妇与巨细胞病毒感染关系探讨及中药治疗

目的探讨孕妇感染巨细胞病毒与流产、死胎、畸胎等的关系。方法应用酶联吸附试验(ELISA),检测208例有流产、死胎、畸胎的孕妇(试验组),及208例健康孕妇(对照组)的巨细胞病毒感染情况。结果试验组CMV-IgM感染率为25%,对照组CMV-IgM的感染率为1.5%,两组阳性率比较差异显著(P<0.01)。结论孕妇感染巨细胞病毒与流产、死胎、畸胎关系密切,"抗病毒合剂"治疗CMV-IgM疗效显著。

老年人新型冠状病毒感染小分子抗病毒药物治疗建议

新型冠状病毒感染已流行三年之久,虽然病毒的不断变异使得其致病力减弱,但伴有基础病的老年患者仍是新冠病毒重症感染的高危人群。随着对新冠病毒分子结构和致病机制的不断认识,抗新冠病毒药物相继上市,这些药物可以有效降低老年患者的重症率及死亡率。该文就目前我国附条件批准上市的5种小分子抗病毒药物的作用机制、临床用药、药物相互作用、不良反应等多方面进行阐述,为老年人抗新冠病毒治疗的临床合理用药提供参考建议。