抗人活化血小板单克隆抗体SZ-51的研制及其在血栓研究中的作用

血小板的活化是血栓形成过程中一个重要的病理过程.本研究室利用杂交瘤技术制备了国内第一株抗人活化血小板单克隆抗体SZ-51,并利用这株单抗对血小板的活化及其在血栓形成和血栓性疾病的发病机理、诊断和治疗中的应用价值等方面进行了研究.现将我室七年来在SZ-51方面研究的科研成果归纳如下:

抗人活化血小板单克隆抗体SZ－51嵌合Fab片段在大肠杆菌中的表达

单克隆抗体介导的导向显像与导向溶栓是对血栓栓塞性疾病诊断与治疗的有效手段之一。为了降低鼠源性单抗对人体的免疫原性，我们应用基因重组技术将抗人活化血小板α颗粒膜蛋白ＧＭＰ－１４０单克隆抗体ＳＺ－５１可变区基因片段与人免疫球蛋白γ１重链ＣＨ１和轻链恒区基因进行拼接，构建噬菌体质粒（ｐＨＥＮ１－５１Ｆａｂ／Ｈｕ），并导入大肠杆菌ＨＢ２１５１中进行表达。表达的嵌合抗体Ｆａｂ片段为可溶性，经Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ证实能特异地与ＧＭＰ－１４０呈结合反应。经ＥＬＩＳＡ定量测定，表达上清液中的抗体含量为２００μｇ／Ｌ。