^(188)Re直接法标记抗人结肠癌单克隆抗体CL-3的研究

本工作对 188Re直接标记抗人结肠癌单克隆抗体 CL- 3的方法进行了详细的研究。以抗坏血酸作为抗体的还原剂 ,以 Sn Cl2 -柠檬酸还原 188Re O4 -溶液 ,进行抗体的直接标记。本方法操作简单、方便 ;标记率高 ( >95% )胶体含量小 ( <5% ) ;标记完后不需纯化分离 ;标记物有良好的体外稳定性和较高的免疫活性 。

^(131)Ⅰ标记抗人结肠癌单克隆抗体MC_3在荷瘤裸鼠体内分布及肿瘤放射免疫显像

本文报告用131I标记抗结肠癌的McAbMC3在移植人肠癌裸鼠体内的分布及放射免疫显像,以期为抗结肠癌McAb MC3用于人肠癌的临床导向诊断和治疗奠定实验基础。材料和方法一、抗结肠癌McAb:鼠抗人结肠癌McAbMC3系第四军医大学西京医院消化病研究所研制提供。

DCLK1单克隆抗体在结直肠癌中的表达以及影响因素分析

目的研究和分析Doublecortin样激酶-1(Doublecortin Like Disease 1,DCLK1)单克隆抗体在结肠癌中的表达情况与相关影响因素。方法选取2018年7月—2022年6月哈尔滨工业大学附属黑龙江省医院收治的73例结直肠癌患者作为研究对象,根据患者肿瘤组织中DCLK1表达水平,将其分为DCLK1低表达组(n=31)与DCLK1高表达组(n=42),分析DCLK1单克隆抗体在结直肠癌中表达的影响因素。结果DCLK1高表达组与DCLK1低表达组肿瘤直径、肿瘤分期(Tumor Node Metastasis,TNM)、浸润深度、淋巴结是否转移、有无脉管、肿瘤病灶是否远处转移及肿瘤分化程度对比,差异有统计学意义(P均<0.05)。多因素Logistic回归分析研究结果表明,肿瘤组织中DCLK1高表达水平影响因素包括淋巴结转移、浸润深度、TNM分期、肿瘤直径、肿瘤病灶远处转移、肿瘤分化程度(OR=1.079、1.235、1.548、1.784、1.745、2.026,P均<0.05)。结论肿瘤组织中DCLK1高表达水平影响因素包括淋巴结转移、浸润深度、TNM分期、肿瘤直径、肿瘤病灶远处转移、肿瘤分化程度,临床可通过检测上述指标的方式判断肿瘤组织中DCLK1表达水平。

抗人平足蛋白单克隆抗体在结直肠癌中的临床应用研究

目的 应用单克隆抗体SZ168探讨平足蛋白(PDPN)在结直肠癌组织中的表达及与临床病理参数和预后的关系。方法 通过免疫组化(单克隆抗体SZ168作为一抗)检测结直肠癌及癌旁组织中PDPN的表达水平差异,利用TCGA数据库对结直肠癌中PDPN表达及预后进行分析。结果 免疫组化检测显示PDPN在结直肠癌组织中高表达,在癌旁组织中低表达,且结直肠癌患者PDPN高表达和低表达组淋巴转移和肿瘤远处转移的差异有统计学意义(P<0.05),年龄、性别、T分期的差异无统计学意义(P>0.05);生存分析显示PDPN高表达与低表达的结肠癌患者预后差异无统计学意义(P>0.05)。结论 单克隆抗体SZ168可应用于结直肠癌免疫组化中PDPN的检测,检测阳性率较高,PDPN检测在结直肠癌的临床诊断中具有一定的价值。

抗结肠癌单克隆抗体ND-1在结肠癌组织的标记

应用抗结肠癌单克隆抗体(ND-1)对60例结肠癌,43例癌旁粘膜,20例结肠正常粘膜,85例非结肠来源的肿瘤组织.以免疫组织化学ABC方法进行了LEA抗原的定位、分布观察。结果表明,LEA在高分化癌组织中表达阳性率为100%,中分化癌为79.3%,低分化癌的阳性率最低。在癌旁组织及正常肠粘膜上皮表达的阳性率是58.1%和20%。在非结肠来源的某些肿瘤组织也存在阳性反应,但强度、范围均不及结肠癌组织。不典型增生与早期癌变之间的关联,本组资料未得到证实。结果提示,LEA在高分化癌组织中占优势,ND-1是一个有较强选择性的确定在高分化结肠癌的单克隆抗体。

抗人结肠癌相关抗原单克隆抗体的制备及初步研究

目的:制备抗人结肠癌相关抗原的单克隆抗体4D10,运用组织芯片技术研究其与人结肠癌组织反应的情况。方法:用人结肠癌细胞株LOVO免疫小鼠,用间接细胞ELISA和免疫组化的方法筛选抗结肠癌相关抗原的单抗。结果:获得一株能够稳定分泌抗人结肠癌相关抗原的杂交瘤细胞株。4D10能够与不同分期的结肠癌组织切片反应,且与正常组织和其他癌组织几乎不反应。结论:4D10对结肠癌的病理分期及预后结果都具有一定的临床参考价值。

EGFR单克隆抗体抗结肠癌作用的实验研究

目的 :观察表皮生长因子受体单克隆抗体 (EGFRMcAb)对结肠癌的作用。方法 :用不同剂量的EGFRMcAb处理LST174结肠癌细胞系 ,采用细胞计数、生长曲线测定及MTT法测定体外培养细胞的生长和增殖抑制率。结果 :可见一定程度的增殖抑制并呈剂量依赖性。抗 -EGFR抗体组细胞数明显低于对照组 (P <0 0 1)。不同浓度之间比较 :当EGFRMcAb为 0 6 2 5mL/L时细胞计数相对高 ,是对照组的 6 1 3% ;当EGFRMcAb为 2 5mL/L时细胞计数最低 ,是对照组的 33 8%。EGFRMcAb组细胞生长受到抑制 ,细胞生长曲线较对照组速度减慢。MTT值显示实验组细胞增殖能力低于对照组 ,抑制率为 4 2 3% (P <0 0 1)。结论 :EGFRMcAb可抑制人结肠癌LST174细胞生长 ,具有一定的抗结肠癌作用。

用单克隆抗体检测结直肠癌病人血清中肿瘤相关抗原的研究

自1975年kolher等发明杂交瘤—单克隆抗体（单抗）技术以来,国内外已生产了几种抗肠癌的单克隆抗体,并应用于癌症病人的血清学检测,其中单抗NS19—9,C50识别的CA19—9和CA50可作为胃肠道血清学检测的肿瘤标志物。孙去病等制备的单抗Hb3对结直肠癌有较好的特异性。

靶向抗肿瘤单克隆抗体类药物联合常规化疗方案治疗转移性结直肠癌的临床进展

目的:为靶向单克隆抗体(简称"单抗")类药物用于转移性结直肠癌的临床治疗提供参考。方法:以"转移性结直肠癌""单克隆抗体""贝伐珠单抗""雷莫芦单抗""西妥昔单抗""帕尼单抗"等的中英文关键词组合检索Pub Med、CNKI数据库和万方数据库,检索时限设为2013-2018年。获得有效文献42篇,基于此对临床常用靶向单抗类药物联合常规方案化疗治疗转移性结直肠癌的临床进展进行综述。结果与结论:目前临床上常用的治疗转移性结直肠癌的靶向单抗类药物主要分为抗血管内皮生长因子受体类单抗(代表药物包括贝伐珠单抗、雷莫芦单抗等)、抗表皮生长因子受体类单抗(代表药物包括西妥昔单抗、帕尼单抗等)以及其他类单抗(包括派姆单抗、纳武单抗等)。与单纯化疗方案比较,靶向单抗类药物与常规化疗方案联合治疗转移性结直肠癌能明显提高临床疗效,改善患者远期生存指标,且联用后毒副作用多数可控、可耐受,从而为结直肠癌患者的临床治疗提供了新的选择。今后需更多关注靶向单抗类药物安全性的提高及个体化治疗方案的合理制订。

EGFR单克隆抗体影响结肠癌细胞生物学行为的实验研究

背景与目的:表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)在多种实体肿瘤中存在过表达。本研究旨在探讨EGFR单克隆抗体西妥昔单抗(cetuximab)对体外培养的人结肠癌细胞株HT29增殖和凋亡的影响,并初步探讨其作用机制。方法:不同浓度EGFR单克隆抗体(12.5、25、50、100μg/mL)作用于对数生长期的HT29细胞,倒置显微镜下观察细胞生长情况,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法观察EGFR单克隆抗体对HT29细胞生长的抑制作用;流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测对细胞周期和细胞凋亡的影响;免疫细胞化学(SP)法测定细胞内Bcl-2、Caspase-3蛋白表达变化。结果:MTT比色法显示不同浓度的EGFR单克隆抗体可抑制HT29细胞增殖,抑制作用呈时间和剂量依赖性,试验组与对照组及各试验组之间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。FCM检测显示,HT29经EGFR单克隆抗体作用48 h后细胞周期有明显变化,G0/G1期细胞比例上升,S期细胞比例下降,呈浓度依赖性(P<0.05),细胞凋亡率与EGFR单克隆抗体浓度呈正相关。SP法显示,HT29细胞Caspase-3蛋白随EGFR单克隆抗体浓度增加而表达增加,Bcl-2蛋白随药物浓度增加表达下降(P<0.05)。结论:EGFR单克隆抗体可抑制人结肠癌细胞HT29增殖,诱导细胞凋亡,其作用可能与上调Caspase-3蛋白表达、下调Bcl-2蛋白表达有关。

单克隆抗体靶向药物联合化疗对结直肠癌患者免疫功能的影响

目的观察单克隆抗体靶向药物联合化疗对结直肠癌患者免疫功能的影响。方法 65例结直肠癌患者分成两组化疗组(35例)和单克隆抗体靶向药物联合化疗组(30例),健康体检者(30例)为对照组,流式细胞术检测2组患者和对照组外周血淋巴细胞亚群的表达。结果化疗组和靶向药物联合化疗组患者的CD3、CD4值,化疗组CD4/8的比值均低于对照组(P<0.05);两组的CD8、NK细胞、CD19值与对照组比较无统计学意义(P>0.05);2组的淋巴细胞亚群值比较均无统计学意义(P>0.05)。靶向药物联合化疗组患者治疗有效率63%,化疗组患者治疗有效率23%。结论单克隆抗体靶向药物联合化疗在增加疗效的同时并未加重抑制结直肠癌患者的细胞免疫功能。

^(99m)Tc标记单克隆抗体及片段对荷人结肠癌裸鼠的放射免疫显像研究

目的 探讨单克隆抗体ND1对大肠癌的诊断价值。方法 利用放射免疫法对荷人结肠癌裸鼠模型进行显像研究。结果 99mTc直接标记抗人结肠癌单克隆抗体ND1及F(ab’) 2 片段 ,标记率为 94 %和 87%。标记后抗体的免疫活性良好。注入荷人结肠癌裸鼠体内 16小时后 ,肿瘤组织中出现较高的特异性浓聚 ,肿瘤轮廓显示清晰 ,F(ab’) 2 片段的放射本底消除快 ,图像质量优于ND1。体内分布显示 :ND1及F(ab’) 2 片段可与移植瘤特异性结合 ,肿瘤与正常器官组织的放射比值 (T/NT)、F(ab’) 2 片段显著高于ND1,ND1在肿瘤、血液及器官组织均有较高的放射性摄取 ,不利于放射性本底的消除。结论 99mTc F(ab’) 2 对大肠癌的放射免疫显像图像清晰 ,优于99mTc ND1。

结肠癌单克隆抗体SC13A在鉴别卵巢癌系原发抑继发的作用

作者以可识别人结肠癌相关抗原的单克隆抗体SC13A为探针，对卵巢原发肿瘤和继发肿瘤进行免疫组化研究（SP法）。试图区别卵巢原发、继发肿瘤间是否存在不相同的抗原决定簇，探讨其在鉴别卵巢原发与继发肿瘤中的诊断价值。结呆是原发恶性卵巢肿瘤的抗原表达率为6％（3／52），与继发性卵巢肿瘤的抗原表达率88％（23／26）相比较，存在明显差异，有极显著性意义（P＜0．001）。在继发性卵巢肿瘤中，胃肠道源的转移癌其抗原表达率100％（n＝23），而来源于生殖道的子宫体转移癌无抗原表达（n＝3）。提示卵巢原发肿瘤与胃肠道转移肿瘤间具有不相同的抗原决定簇，并可对鉴别原发与继发性卵巢癌的诊断有较重要的临床意义。

结直肠癌单克隆抗体靶向治疗探讨

近年来,靶向药物的出现改善了结直肠癌患者的治疗预期,其与化疗药物的联合应用提高了化疗的疗效,进一步延长了患者的生存期。随着分子靶向药物治疗相关研究的深入,靶向药物已成为结直肠癌个体化治疗和综合治疗的新选择。

^(153)Sm标记抗CEA单克隆抗体在荷人结肠癌裸鼠体内的放射性分布

目的以153Sm标记的抗CEA单克隆抗体对荷人结肠癌移植瘤裸鼠进行肿瘤定位显像的研究。为结肠癌早期诊断提供一种新方法,并为其临床应用提供实验依据。方法每只荷瘤裸鼠从尾静脉注射7.4 MBq/0.1 ml于注射后2、4、82、4 h行全身SPECT显像。于4、82、4 h分批处死裸鼠并测定分别在肿瘤、血液、心脏、肺等重要脏器单位重量的放射性比值(%ID/g).结果153Sm-CEA能够选择性地积聚于肿瘤组织,其摄取率高于153Sm-IgG,(P<0.05)。结论153Sm-AFP在荷人结肠癌裸鼠体内,对过度表达CEA的结肠癌具有集合力。为临床上结肠癌的诊断提供实验依据。

^(186)铼与抗结肠癌单克隆抗体的直接标记法及在荷瘤裸鼠体内的放射免疫显像

为探讨^(186)铼(^(186)Re)用于放射免疫显像的价值,用抗人结肠癌单克隆抗体(MAb)SC3A和以抗坏血酸为还原剂的直接标记法,对SnCl_2还原的^(186)Re标记物在荷结肠癌裸鼠体内的生物学分布及放射免疫显像进行研究。结果显示,本法的标记率均达96%～99%,标记物较稳定。在体与250倍以上的二乙烯三胺五乙酸(DTPA)和人血清白蛋白在37℃共育24h。未见标记物^(186)Re-SC3A解离。用过量肿瘤细胞抗原结合法测定。标记物抗体活性达90%～96%。48h活性下降〈10%。在注射^(186)Re-SC3A后24～48h肿瘤显像清晰,尤以48h为佳。这为^(186)Re用于临床放射免疫诊断提供了有关数据,并为其用于放射免疫治疗奠定了基础。

结直肠癌单克隆抗体的制备及生物学特性鉴定

目的制备结直肠癌特异性单克隆抗体,为深入研究相关肿瘤的发病机制提供新的实验工具。方法用人结直肠癌患者的手术标本制备细胞悬液免疫小鼠,按常规方法行细胞融合,经免疫组织化学染色筛选阳性克隆,并对其抗体的特性和生物学性状等进行分析。结果共获得32个阳性克隆,其中针对结直肠癌较特异性的阳性克隆有2个(克隆株2-3,15-8)。免疫组化染色显示,克隆株2-3培养上清和腹水与结直肠癌组织的冰冻切片反应的阳性率可达100%。癌旁正常组织的阳性率较低,且染色强度远弱于癌组织,当抗体稀释度超过1∶6000时反应阴性,而肿瘤组织仍呈强阳性。从结肠癌的分化程度来看,分化较差的肿瘤组织,包括中、低分化的癌组织染色较强。另外,免疫染色阳性产物主要位于肿瘤的腺腔和正常黏膜表面,提示该抗体所识别的抗原可能为结直肠癌细胞和黏膜上皮分泌的黏蛋白等抗原。结论本研究成功地制备了两株针对结直肠癌的较特异的单克隆抗体,可作为实验研究相关蛋白在结直肠癌及其他肿瘤发病中的作用机制的方法。