^(188)Re直接法标记抗人结肠癌单克隆抗体CL-3的研究

本工作对 188Re直接标记抗人结肠癌单克隆抗体 CL- 3的方法进行了详细的研究。以抗坏血酸作为抗体的还原剂 ,以 Sn Cl2 -柠檬酸还原 188Re O4 -溶液 ,进行抗体的直接标记。本方法操作简单、方便 ;标记率高 ( >95% )胶体含量小 ( <5% ) ;标记完后不需纯化分离 ;标记物有良好的体外稳定性和较高的免疫活性 。

^(131)Ⅰ标记抗人结肠癌单克隆抗体MC_3在荷瘤裸鼠体内分布及肿瘤放射免疫显像

本文报告用131I标记抗结肠癌的McAbMC3在移植人肠癌裸鼠体内的分布及放射免疫显像,以期为抗结肠癌McAb MC3用于人肠癌的临床导向诊断和治疗奠定实验基础。材料和方法一、抗结肠癌McAb:鼠抗人结肠癌McAbMC3系第四军医大学西京医院消化病研究所研制提供。

^(153)Sm标记抗CEA单克隆抗体在荷人结肠癌裸鼠体内的放射性分布

目的以153Sm标记的抗CEA单克隆抗体对荷人结肠癌移植瘤裸鼠进行肿瘤定位显像的研究。为结肠癌早期诊断提供一种新方法,并为其临床应用提供实验依据。方法每只荷瘤裸鼠从尾静脉注射7.4 MBq/0.1 ml于注射后2、4、82、4 h行全身SPECT显像。于4、82、4 h分批处死裸鼠并测定分别在肿瘤、血液、心脏、肺等重要脏器单位重量的放射性比值(%ID/g).结果153Sm-CEA能够选择性地积聚于肿瘤组织,其摄取率高于153Sm-IgG,(P<0.05)。结论153Sm-AFP在荷人结肠癌裸鼠体内,对过度表达CEA的结肠癌具有集合力。为临床上结肠癌的诊断提供实验依据。

EGFR单克隆抗体抗结肠癌作用的实验研究

目的 :观察表皮生长因子受体单克隆抗体 (EGFRMcAb)对结肠癌的作用。方法 :用不同剂量的EGFRMcAb处理LST174结肠癌细胞系 ,采用细胞计数、生长曲线测定及MTT法测定体外培养细胞的生长和增殖抑制率。结果 :可见一定程度的增殖抑制并呈剂量依赖性。抗 -EGFR抗体组细胞数明显低于对照组 (P <0 0 1)。不同浓度之间比较 :当EGFRMcAb为 0 6 2 5mL/L时细胞计数相对高 ,是对照组的 6 1 3% ;当EGFRMcAb为 2 5mL/L时细胞计数最低 ,是对照组的 33 8%。EGFRMcAb组细胞生长受到抑制 ,细胞生长曲线较对照组速度减慢。MTT值显示实验组细胞增殖能力低于对照组 ,抑制率为 4 2 3% (P <0 0 1)。结论 :EGFRMcAb可抑制人结肠癌LST174细胞生长 ,具有一定的抗结肠癌作用。

EGFR单克隆抗体影响结肠癌细胞生物学行为的实验研究

背景与目的:表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)在多种实体肿瘤中存在过表达。本研究旨在探讨EGFR单克隆抗体西妥昔单抗(cetuximab)对体外培养的人结肠癌细胞株HT29增殖和凋亡的影响,并初步探讨其作用机制。方法:不同浓度EGFR单克隆抗体(12.5、25、50、100μg/mL)作用于对数生长期的HT29细胞,倒置显微镜下观察细胞生长情况,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法观察EGFR单克隆抗体对HT29细胞生长的抑制作用;流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测对细胞周期和细胞凋亡的影响;免疫细胞化学(SP)法测定细胞内Bcl-2、Caspase-3蛋白表达变化。结果:MTT比色法显示不同浓度的EGFR单克隆抗体可抑制HT29细胞增殖,抑制作用呈时间和剂量依赖性,试验组与对照组及各试验组之间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。FCM检测显示,HT29经EGFR单克隆抗体作用48 h后细胞周期有明显变化,G0/G1期细胞比例上升,S期细胞比例下降,呈浓度依赖性(P<0.05),细胞凋亡率与EGFR单克隆抗体浓度呈正相关。SP法显示,HT29细胞Caspase-3蛋白随EGFR单克隆抗体浓度增加而表达增加,Bcl-2蛋白随药物浓度增加表达下降(P<0.05)。结论:EGFR单克隆抗体可抑制人结肠癌细胞HT29增殖,诱导细胞凋亡,其作用可能与上调Caspase-3蛋白表达、下调Bcl-2蛋白表达有关。

单克隆抗体靶向治疗晚期或转移性结直肠癌研究进展

单克隆抗体可以有效治疗晚期或转移性结直肠癌,能够安全、有效地抑制肿瘤组织的生长与增殖,防止病情的持续恶化和进展。本研究探讨了单克隆抗体在晚期或转移性结直肠癌治疗中的优势,结合相关研究和文献资料,分析抗血管内皮细胞生长因子(VEGF)单克隆抗体、抗表皮生长因子受体(EGFR)单克隆抗体的实际应用效果。

噬菌体呈现技术制备结肠癌抗独特型抗体

以纯化的鼠抗人结肠癌细胞单克隆抗体 (简称单抗 )MC5与钥孔血蓝素 (KLH)的交联物经腹腔免疫Balb c小鼠 ,取脾分离mRNA .RT PCR分别扩增抗体重、轻链可变区基因片段 (VH 和VLcD NA ,大小分别约为 340bp和 32 0bp) ,二者经linkerDNA连接形成ScFv(singlechainvariablefragment)DNA(约 75 0bp) .将ScFvDNA与噬菌粒载体pCANTAB5E的连接产物转化于大肠杆菌TG1,经辅助噬菌体M13KO7感染后 ,获得重组噬菌体抗体ScFv文库 .以单抗MC5对ScFv文库进行 4轮亲和筛选后 ,随机挑取 80个克隆经酶联免疫吸附实验 (ELISA)筛选出 2 2个呈现ScFv形式抗独特型抗体(抗 IdScFv)的噬菌体单克隆 .竞争抑制实验表明 ,在 2 2个阳性克隆中有 4个克隆所呈现的抗 IdScFv属β或γ型 .针对单抗MC5的噬菌体呈现型抗 IdScFv的制备 ,为筛选新的结肠癌重组抗

抗表皮生长因子受体治疗在晚期结直肠癌维持治疗中的研究进展

在中国,结直肠癌是临床常见的恶性肿瘤之一,其发病率占男性恶性肿瘤中第5位,女性第4位,每年因结直肠癌死亡的患者约19.10万人[1]。目前,氟尿嘧啶/亚叶酸钙与奥沙利铂(FOLFOX)或伊立替康(FOLFIRI)或上述3种药物(FOLFOXIRI)为基础的化疗方案联合抗血管内皮生长因子抗体(贝伐珠单抗)或抗表皮生长因子受体(EGFR)抗体(西妥昔单抗或帕尼单抗)用于不可切除、晚期或复发转移性结直肠癌的一线治疗取得了较好疗效[2]。大多数转移性结直肠癌(mCRC)无法治愈,其治疗目标是延长患者生存期并改善其生活质量。临床数据[3]显示,晚期结直肠癌(ACRC)中仅有少部分患者能够持续应用一线化疗方案直至疾病进展,绝大多数患者在治疗过程中化疗强度有减弱甚至化疗中断。基于奥沙利铂或伊立替康为基础的化疗方案累积的神经毒性(奥沙利铂)或慢性腹泻(伊立替康)可导致患者的治疗中断,并对其生活质量产生负面影响,故采用维持治疗的策略便显得尤为重要[4]。针对这些问题,一些研究[5-6]提出了间断治疗和/或维持治疗的策略,其可以降低治疗强度或缩短治疗持续时间,同时并不明显降低临床疗效。关于生物制剂靶向治疗方面,Ⅲ期临床试验[7-8]已经证实基于贝伐珠单抗的维持治疗可用于疾病的长期控制,且毒副作用可以耐受。

结直肠癌一线治疗方案中添加西妥昔单抗安全有效

卡培他滨和伊立替康（CAPIRI方案）,以及卡培他滨和奥沙利铂（CAPOX方案）的联合使用提高了结直肠癌患者的生存率,是2种较先进的治疗方案。近日,德国慕尼黑市慕尼黑格罗斯哈德恩大学医院的研究人员在目前的Ⅱ期研究中探讨了CAPIRI或CAPOX联合抗表皮生长因子受体（人/鼠嵌合单克隆抗体）西妥昔单抗一线治疗转移性结直肠癌方案的疗效和安全性,认为将西妥昔单抗添加到CAPIRI、CAPOX这2种方案中,均可得到较好的反应率,安全有效。研究人员将185患者随机分配为2组,一组采取西妥昔单抗与CAPIRI方案联用的治疗方案,另一组采取西妥昔单抗与CAPOX方案联用的治疗方案。

Erbitux能否成为转移性结直肠癌的一线药

Imclone Systems／Bristol—Myers Squibb／Merck KGaA的抗EGFR单克隆抗体Erbitux(cetuximab)(Ⅰ)，如果在最近维也纳ESMO会议上提出的有希望的结果能在今后的试验得到支持，则有可能成为转移性结直肠癌的一线药。

抑瘤肠菌联合抗程序性细胞死亡蛋白1单抗治疗微卫星稳定型结直肠癌的实验研究

目的 探讨抑瘤肠菌(TSE)与抗程序性细胞死亡蛋白1(PD-1)单抗联合治疗对微卫星稳定(MSS)型结直肠癌(CRC)疗效的影响。方法 选取BALB/c小鼠构建CT26荷瘤小鼠模型后,随机分为对照组、TSE单药组(TSE组)、αPD-1单药组(αPD-1组)、TSE联合αPD-1组(联合组),每组10只。定期测量小鼠皮下移植瘤体积并监测体重,给药14天后处死获取皮下移植瘤,比较各组肿瘤体积大小;采用苏木精-伊红(HE)染色观察肿瘤细胞的形态结构;采用免疫组化法检测肿瘤组织CD8^(+)T细胞数量;采用流式细胞术检测皮下移植瘤组织和脾脏组织中CD4^(+)T细胞和CD8^(+)T细胞占CD45^(+)细胞的比例。结果 对照组、TSE组、αPD-1组及联合组小鼠肿瘤平均体积依次减小(P<0.05)。免疫组化结果显示,对照组、TSE组、αPD-1组及联合组小鼠肿瘤组织中CD8^(+)T细胞数量依次升高(P<0.001)。肿瘤组织流式细胞术结果显示,αPD-1组小鼠CD3^(+)CD8^(+)T细胞占CD45^(+)细胞的比例高于对照组,联合组小鼠CD3^(+)CD8^(+)T细胞占CD45^(+)细胞的比例高于对照组、TSE组及αPD-1组(P<0.05)。结论 TSE联合抗PD-1单抗可明显提高免疫单药治疗的抑瘤作用,可能通过增加肿瘤组织中浸润CD8^(+)T细胞而促进抗PD-1单抗治疗CRC的疗效。

人结直肠癌粘膜下注射^(125)I标记抗CEA单抗CL58放射免疫导向手术的研究

目的 探讨12 5I标记的抗CEA单抗 (monoclonalantibody ,McAb)CL5 8在结直肠癌放射免疫导向手术 (radioimmunoguidedsurgery,RIGS)中的应用价值。方法 将12 5I标记单抗CL5 8在纤维结肠镜直视下注射于 2 9例结直肠癌患者癌周粘膜下 ;给药后 3～ 14d行根治手术 ,术中使用手持式γ探测仪 (gamma detectingprobe ,GDP)对肿瘤、区域淋巴结、手术切缘等靶部位 (target,T)进行放射性检测 ,以正常肠壁为对照本底 (normaltissue,NT) ,以T/NT≥ 3为判别大肠癌、肠壁浸润及淋巴结转移的标准 ;全部标本行病理学检验 ;病理学阴性的淋巴结标本进行免疫组化染色寻找微转移灶。结果GDP探测判别肿瘤的灵敏度为 93 1% ,判别切缘的特异度为 95 5 %。RIGS判别淋巴结的灵敏度及特异度分别为 92 0 %、87 8% ,与临床判别相比差异有显著性意义 (χ2 =5 84,P <0 0 5 )。免疫组化证实RIGS能够检出部分病例中常规病理检验未发现的淋巴结微转移灶。结论 应用12 5I标记的抗CEA单抗CL5 8进行结直肠癌RIGS 。

结直肠癌一线治疗方案中添加西妥昔单抗安全有效

卡培他滨和伊立替康（CAPIRI方案），以及卡培他滨和奥沙利铂（CAPOX方案）的联合使用提高了结直肠癌患者的生存率，是2种较先进的治疗方案。近日，德国慕尼黑市慕尼黑一格罗斯哈德恩大学医院的研究人员在目前的Ⅱ期研究中探讨了CARIRI或CAPOX联合抗表皮生长因子受体（人／鼠嵌合单克隆抗体）西妥昔单抗一线治疗转移性结直肠癌方案的疗效和安全性，

^(99m)Tc-C_(50)的生物性能和安全限度实验研究

为评价 2 -亚氨基噻吩盐酸盐 (2 -IT)法标记的抗结肠癌 (CEA)单克隆抗体99mTc -C50 的生物学性能及标记化合物应用的安全性 ,采用 2 -IT法对C50 化学修饰 ,以99mTc -GH转络合法标记C50 。对标记抗体进行免疫活性、稳定性和安全限度的试验 ,并对荷人结肠癌裸鼠进行放射免疫显像。结果表明 ,标记抗体免疫活性为 4 0 .2 %— 73.2 % ,纸层析法测得最佳标记率为 94 .1 % ,胶体含量为 3.8% ,标记后 1 2h内放化纯度均在 90 %以上。标记化合物无热源 ,无毒性 ,荷人结肠癌裸鼠尾静脉注入99mTc -C50 后放射免疫显像显示 ,6h肿瘤区有放射性浓集 ,2 4hT/NT值为 3.4 6—4 .68。表明以 2 -IT法预处理抗CEA单抗能有效地进行99mTc标记 ,对蛋白活性损伤较少 ,标记方法简单 。

Immunoscintigraphy of local recurrent rectal cancer with^(99m)Tc-labeled anti-CEA monoclonal antibody CL58

AIM: To explore a specific diagnostic method for local recurrent rectal cancer.METHODS: Immunoscintigraphy with 99mTc-labeled anti-CEA monoclonal antibody (MoAb) CL-58 was performed for patients suspected of having a postoperative local recurrent rectal cancer and the findings were compared with the results of conventional imaging and pathology.RESULTS: A total of 36 patients with a suspected local recurrent rectal cancer underwent immunoscintigraphy with 99mTc-conjugated CL58. Local recurrence of rectal cancer was identified in 31 patients and established in 30 during operation, endoscopy and pathological examination. No local recurrence was found in 5 patients without specific accumulation of 99mTc during the follow-up. Immunoscintigraphy had a positive rate of 86.11%, a specificity of 83.33%, and a sensitivity of 100%.CONCLUSION: Immunoscintigraphy has a highly specific and predictive value for detecting local recurrent rectal cancer, especially after abdominal perineal resection (APR).

结直肠癌靶向药物治疗研究进展

1分子标志物与靶向药物疗效 近年来。结直肠癌的研究重点还是分子靶向治疗，其中最引人注目的是KRAS突变与抗表皮生长因子受体（EGFR）单克隆抗体疗效之间的关系。

携带WT—KRAS基因的mCRC患者可从Erbitux治疗获益

Ⅲ期CRYSTAL临床研究的最新结果表明，与单独使用FOLFIRI化疗方案（伊立替康＋亚叶酸＋氟尿嘧啶）治疗具有野生型KRAS（WT—KRAS）基因的转移性结直肠癌（mCRC）患者相比，抗表皮生长因子受体单克隆抗体Erbitux（cebuximab）（Ⅰ）与FOLFIRI联用方案可使生存期达两年的患者比例提高，但KRAS基因突变的肿瘤患者中没有这种表现。具有WT—KRAS基因的患者在接受了（Ⅰ）和化疗联合治疗后，