制备兔抗人IgG抗体的一种简便方法

我们采用中等剂量抗原免疫法，用加佐剂的纯化人IgG抗原对家兔足掌、皮下和肌肉多点注射进行基础免疫，用不加佐剂的单独人IgG抗原肌肉和皮下多点注射后，再经耳缘静脉注射进行加强免疫相配合，制备成高效价（1：32）兔抗人IgG抗血清。

一种制备兔抗人IgG抗体的简易方法

目前，制备兔抗人ＩｇＧ的方法很多，但没有一个统一的具体方案，难以制备出理想的高效价抗体。我们根据抗体产生的基本原理，参照有关文献，探索出一种能得到高效价抗体的简易的方法，介绍如下：材料和方法１抗原制备参照文献［１、２］进行。选取多份健康人混合血清，新...

抗人IgG_4单克隆抗体用于ELISA法诊断血吸虫病与疗效考核的研究

目的探讨检测特异性IgG4诊断血吸虫病的效果及疗效考核价值。方法采用SEA间接ELISA法检测血吸虫病人血清中的特异性IgG和IgG4抗体及对肺吸虫、肝吸虫病人和健康人血清的交叉反应以及血吸虫病人治疗后不同时期特异性IgG和IgG4抗体的变化。结果血吸虫病人血清中IgG4敏感性为93.02%,特异性为100%,而IgG抗体的敏感性为95.35%,特异性为97.62%,IgG4与IgG无论其敏感性还是其特异性差异均无显著性(P>0.05),与其它寄生虫病的交叉反应,IgG4显著低于IgG且差异显著(P<0.05),血吸虫病人治后6个月IgG4抗体阴转率显著高于IgG(P<0.05),治后12个月IgG4的阴转率与IgG比较差异非常显著(P<0.01)。结论ELISA法检测特异性IgG的诊断效能与IgG4相似,而特异性IgG4抗体可能系一短程抗体,用于评价疗效更具实际应用价值。

一种制备酶标记抗体的新技术及在血痕种属鉴定的应用

本实验建立了一种过碘酸钠氧化法为基础、制备ＨＲＰ标记的免抗人ＩｇＧ抗体的新技术。首先以己二酰二肼作为肼化剂，在ＩｇＧ分子上接上肼基，然后以过碘酸钠作为氧化剂，使ＨＲＰ分子上的糖基氧化为醛基，进而使醛基与联结在ＩｇＧ分子上的肼基形成Ｓｃｉｆｆ氏碱而达到酶与抗体的联接。在用斑点ＥＬＩＳＡ方法鉴别血痕种属的研究中，该法制各的酶标记抗体具有高效价，高敏感度，高特异性等优点。

多种肿瘤传代细胞中lg样物质存在与检测

目的：探讨lg样物质是否在多种肿瘤细胞内存在广泛的表达，筛选出lg样蛋白高表达细胞株。方法：通过免疫组织化学方法（直接法、APAAP法），分别用抗人IgG多克隆抗体、抗人IgG重链、轻链单抗，对乳腺癌（T47－D、MCF－7）、大肠癌（HT－29、HCT－8）、卵巢癌（SKOV3、Ca）、肺癌（A549）、口腔上皮样癌（A431）、肝癌（BC－7402）、宫颈癌（S3、MR）等上皮性恶性肿瘤及部分造血系统肿瘤传代细胞（Ran、HL－60、K562）的胞浆内屹样物质进行了检测。结果：当用抗人IgG多抗进行检测时，所有的上皮性恶性肿瘤细胞同阳性对照（杂交瘤）一样，都呈阳性反应；而在造血系统肿瘤中，除Ran细胞呈弱阳性反应外，K562、HL－60为阴性反应。用抗人IgG轻、重链单抗进行APAAP法检测时，所得结果基本同直接法，但在上皮性恶性肿瘤细胞株中显示了明显的阳性强度差异，如：HeInMR、CaOV3、MCF－7、T47－D、对抗人IgG重链单抗呈强阳性反应；而HCT－8、A549、A431、BCL－7402、等细胞株为弱阳性，SKOV3则为阴性。抗人IgG。链阳性率高于λ链。结论：Ig样物质在所检测的上皮性恶性肿瘤传代细胞系中存在广泛的表达。

两种病理类型肾病患者尿IgG对人肾小管上皮细胞表达巨噬细胞移动抑制因子的影响

目的分离纯化表现为肾病综合征(NS)的微小病变型(MCD)及膜性肾病(MN)患者尿IgG,比较它们对人近端小管上皮细胞(HK-2)表达巨噬细胞移动抑制因子(MIF)的影响。方法采用硫酸铵沉淀、蛋白G亲和层析纯化尿中IgG,并经SDS-PAGE、Western印迹分析鉴定。用不同浓度(0、0.5、1.0、2.5、5.0、10.0mg/ml)的上述两种患者的尿IgG分别刺激HK-2细胞6h,应用RT-PCR检测细胞表达。MIFmRNA的变化:应用Western印迹检测细胞中MIF的蛋白水平。结果纯化的尿IgG经SDS—PAGE分析显示其分解为4个片段,以兔抗人IgG抗体进行免疫印迹鉴定,证实这些蛋白条带均为IgG成分。两种不同病理类型NS患者的尿IgG均可上调HK-2细胞MIF的基因及蛋白表达,并呈剂量依赖性。MN患者的尿IgG0.1mg/ml即可明显上调HK-2细胞.MIFmRNA和蛋白表达(P<0.01);而MCD患者的尿IgG需达到2.5mg/ml才具有显著上调效应。结论呈NS的MCD和MN患者尿IgG可上调HK-2细胞表达MIF。MN患者尿IgG的作用强于MCD患者,提示这两种不同病理类型患者尿IgG可能存在结构或功能上的差异。

反义IgG寡核酸诱导膀胱肿瘤细胞T24凋亡及其增强丝裂霉素敏感性的研究

研究结果显示多种上皮来源的肿瘤细胞可产生IgG，抗人IgG抗体可以抑制肿瘤细胞生长并促进细胞凋亡。为此，我们将IgG反义寡核苷酸（ASODN）作用于膀胱癌细胞系T24，观察其对T24细胞的生物学效应。