猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体依赖增强作用研究进展

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起母猪繁殖障碍和仔猪的呼吸道症状而导致高病死率的传染病,PRRSV抗体依赖增强作用(ADE)是造成PRRS免疫失败的重要因素,受到国内外学者的高度重视。近年来,对ADE的机理已进行了深入的研究,主要是巨噬细胞通过FcγR介导摄取PRRSV引发ADE现象。论文综述了PRRSV的结构蛋白和ADE机理,为PRRS的进一步研究和疫苗的研发提供参考。

高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒体外抗体依赖增强作用的初步研究

为了研究高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)体外抗体依赖增强作用,试验对HP-PRRSV TJ-92株毒液(1×10^(6.0)TCID_(50)/0.1 mL)进行10倍倍比稀释,与等体积2倍倍比稀释的各稀释度HP-PRRSV TJ-92株特异性阳性血清(中和效价为1∶2~5)中和后,在Marc-145细胞上培养增殖72 h,测定收获毒液的病毒含量。结果表明:能使1×10^(0 )TCID_(50)～1×10^(6.0) TCID_(50 )HP-PRRSV毒液病毒含量增高最大的阳性血清稀释度依次为1∶2~9、1∶2^(10)、1∶2~9、1∶2~8、1∶2~9、1∶2~7、1∶2~8,经计算,HP-PRRSV毒液病毒含量最高可提升1×10^(4.5)TCID_(50)/0.1 mL。说明HP-PRRSV在体外表现出抗体依赖增强作用,且被中和HP-PRRSV含量越低时增强作用越明显。

人冠状病毒抗体依赖增强作用的研究进展

抗体依赖性增强作用(ADE)已成为病毒致病机制、抗体药物治疗和疫苗开发的关键因素。在特定情况下,抗体能介导冠状病毒与其病毒受体或Fc受体(FcR)结合,增强病毒感染能力,进而导致ADE。ADE的发生受病毒和宿主一系列复杂因素的调节,如病毒包膜蛋白结构、与受体的亲和力、抗体水平等。文章综述了近年来ADE在多种人冠状病毒研究中的最新进展,为疫苗设计、抗体相关药物及免疫治疗等提供一定的理论依据。

prM抗体在登革抗体依赖增强作用中的研究进展

登革病毒感染在热带和亚热带地区是一种常见的病毒性疾病,主要通过虫蚊叮咬感染人类。登革病毒分为四个亚型,异型二次感染时引起登革出血热和登革休克,抗体依赖增强作用在体内外已被证实是登革二次感染导致严重病症的主要机制。prM抗体具有潜在的抗体依赖增强作用活性和低中和能力。本文主要讨论prM抗体在登革病毒抗体依赖增强作用中的研究进展。

病毒病疫苗的抗体依赖增强作用及其对疫苗研究的启示

疫苗是最经济、有效的公共卫生干预措施之一。病毒病疫苗接种后产生的中和抗体可中和病原,降低病原感染能力,从而预防传染病的发生。然而在罕见情况下,个别疫苗产生的抗体却可以增强病原的感染,加重疾病病情,即抗体依赖增强作用(Antibody-dependent enhancement,ADE)。本文对疫苗接种后ADE产生的机理、既往发生ADE的疫苗、ADE在人体和动物临床表现等进行了综述,为新疫苗在研发中和上市后尽早发现和预防ADE、保证疫苗使用安全提供参考依据。

HCV感染人滋养层细胞过程中抗体依赖性增强作用的初步研究

目的研究丙型肝炎病毒(HCV)在感染人滋养层细胞的过程中是否存在抗体依赖性感染增强(ADE)作用,探讨HCV母婴传播的分子机制。方法将HCV阳性血清以4种不同方式感染体外培养人滋养层细胞,应用RT-PCR法对标本进行HCVRNA定性检测,并进一步评估不同浓度CD16单抗对感染过程的阻断作用。此外,应用免疫电镜技术观察滋养层细胞感染HCV病毒颗粒情。结果HCVRNA在全血清组、CD81单抗阻断组及LDL-R单抗阻断组多个标本均为阳性表达,且平均拷贝数较高,在FcγRⅢ(CD16)单抗阻断组多个标本内未能检测到HCVRNA的表达,且阳性标本拷贝数较低;CD16单抗对感染的阻断作用随浓度的升高而增强;在全血清组、CD81单抗阻断组及LDL-R单抗阻断组多个标本细胞内可间断测得未脱壳的HCV病毒颗粒,CD16单抗阻断组细胞内未能检出。结论滋养层细胞膜CD81和LDL-R分子不参与HCV感染滋养层细胞的过程,而FcγRⅢ分子则与此过程密切相关。HCV感染人滋养层细胞过程中存在抗体依赖性增强作用。

病毒的抗体依赖性增强作用及其机制

抗体依赖性增强（ADE）作用是指某些病毒在相应抗体协助下复制或感染能力显著增强的现象。使用常规疫苗免疫来防治具有ADE作用的病毒病常常难以奏效,甚至引起某些疾病病情加剧。近年来,关于病毒感染的抗体依赖性增强作用的机制研究取得了很大的进展,对具有ADE现象病毒有效疫苗的研发具有十分重大的意义。

病毒感染的抗体依赖性增强作用的机制及其意义

抗体协助病毒进入靶细胞,提高感染率,这一现象就是抗体依赖性增强作用(Antibody-dependentenhancement,ADE)。抗体介导病毒感染的敏感性增强的例子已经被很多种不同病毒属的感染证明,有充分的理由相信在一方面保护免疫的诱导作用和另一方面增强敏感性的诱导作用之间存在微妙的平衡。ADE作用的存在,使常规疫苗免疫来防制这类病毒病常常难以奏效。近年来,关于病毒感染的抗体依赖性增强作用的机制研究取得了很大的进步,对有ADE现象病毒疫苗的研发具有十分重大的意义。

抗体依赖性增强作用及对新型冠状病毒疫苗研发的思考

通常情况下病毒性疫苗诱导机体产生的中和抗体能与入侵病毒结合并使其失去感染宿主细胞和发生疾病的能力,但在某些情况下疫苗接种后诱导产生的抗体不但未产生保护作用,反而加重了疾病的临床表现,即通过抗体依赖性增强作用导致疫苗增强性疾病。本文对既往疫苗临床研究和冠状病毒动物试验研究中发生的抗体依赖性增强作用及其可能的作用机制等进行了综述和分析,提出了对新型冠状病毒疫苗研发过程中安全性的思考,为尽早发现和认知抗体依赖性增强作用/疫苗增强性疾病并进行风险控制提供参考。

登革热的抗体依赖性感染增强的体外实验研究

目的建立异型登革热病毒(DENV)感染所产生的抗体依赖感染增强作用(ADE)的体外实验研究模型。方法将梯度稀释的抗-Ⅱ型登革热膜前蛋白prM单克隆抗体与Ⅲ型登革热病毒(MOI=3)于37℃、5%CO2培养箱内孵育90min形成抗体-病毒复合物后感染K562细胞,通过间接免疫荧光染色,real-time PCR检测DENV抗原在细胞内的表达增强。结果抗体依赖增强作用(ADE)的效果取决于抗体浓度。稀释度为1/2560的抗体与DENV结合共同感染K562后,细胞内登革热病毒抗原的免疫荧光染色结果有明显增强,real-time PCR检测的结果也进一步证实了K562细胞内登革热病毒数量显著增加。结论成功建立了登革热病毒的异型抗体依赖感染增强作用的体外研究模拟,为后续的ADE作用机制的研究提供了可靠的研究模型和实验基础。

登革病毒prM抗体的中和作用及ADE作用研究

【目的】研究登革病毒(DENV)前膜蛋白(pr M)多克隆抗体对不同型别登革病毒的中和作用和抗体依赖性感染增强作用(ADE),为进一步阐明pr M蛋白在登革病毒致病与免疫过程中的重要作用提供依据。【方法】采用ELISA方法检测登革热患者血清中是否存在pr M抗体;用重组登革病毒2型(DENV-2)pr M蛋白免疫家兔,制备pr M蛋白多克隆抗体;采用空斑减数中和试验和流式细胞术检测pr M抗体对4种血清型登革病毒(DENV-1、DENV-2、DENV-3、DENV-4)的中和作用及ADE作用。【结果】登革热患者血清中存在特异性pr M抗体;pr M抗体对4种血清型登革病毒只有部分中和作用,但在一定浓度范围内对DENV1-4型均有明显的感染增强活性,且对异型DENV的感染增强作用强于同型,其中对登革病毒2型未成熟颗粒(im DENV-2)的感染增强作用最为明显。【结论】登革热患者血清存在pr M特异性抗体;pr M抗体对不同血清型DENV均只有较弱的中和活性,但却呈现出较强的ADE效应,证明登革病毒pr M抗体是一种感染增强性抗体。

FcγRⅡB介导的PRRSV感染的抗体依赖性增强作用

将PRRSV Hn-1/06株阳性血清(中和效价为1∶2)做2～8倍倍比稀释后,分别与等体积含100TCID50/100μL的PRRSV Hn-1/06株病毒液混合,制备感染性免疫复合物。取纯化的猪IgG和兔抗猪IgG制备非感染性免疫复合物。用鼠抗FcγRⅡB阳性血清封闭猪肺泡巨噬细胞(PAM细胞)表面的FcγRⅡB,然后分别将感染性免疫复合物和非感染性免疫复合物与PRRSV的混合物感染封闭后的PAM细胞,培养48h后收获样品,采用荧光定量RT-PCR检测收获样品中PRRSV的含量。结果表明,选择性封闭PAM细胞的FcγRⅡB能增强PRRSV的抗体依赖性增强作用。

抗体依赖性增强作用对疫苗研发的影响

抗体依赖性增强作用(ADE)是病毒学中一种常见现象。在登革热病毒(Dengue virus,DV)、严重急性呼吸综合征冠状病毒(severe acute respiratory syndrome coronavirus,SARS-CoV)、流感病毒、HIV等病毒的感染机制研究和疫苗研发使用过程中,均发现了ADE。由于预存的特异性抗体或亚中和滴度的抗体可增强病毒感染性,导致病情加重,疫苗接种产生的抗体,可能不仅没有起到预防感染的作用,反而促进感染的发生。本文将重点介绍ADE对疫苗研发的影响及其评价方法。

抗体依赖的增强作用在传染性疾病中的研究新进展

抗体依赖的增强作用(ADE)是指某些病毒特异性抗体(一般多为非中和抗体)与病毒结合后,通过其Fc段与某些表面表达FcR的细胞结合从而介导病毒内吞和复制,增强病毒感染的过程。本文概述了ADE在呼吸道合胞病毒、登革病毒、流感病毒等几种传染性疾病中的相关研究发现,借鉴ADE在几种病毒传染性疾病中发生的情况,探讨新型冠状病毒肺炎发生ADE的可能性及其作用机制,期望为新型冠状病毒肺炎发病机制、重症治疗和疫苗研发提供一些见解。

疫苗增强性疾病风险探讨

目的对疫苗增强性风险进行探讨,为新型冠状病毒疫苗上市后安全性监测提供参考。方法通过检索、整理国内外关于病毒类疫苗与疫苗增强性疾病的研究成果,关注新型冠状病毒疫苗潜在的安全性问题。结果与结论2020年新型冠状病毒引发的疫情蔓延全球,由于目前尚无针对新型冠状病毒的特效治疗药物,新型冠状病毒疫苗的研发己成为全球关注的热点。疫苗增强性疾病是疫苗研发和上市后安全性监测中普遍关注的一个问题。根据目前已有的研究成果,疫苗增强性疾病风险成为新型冠状病毒疫苗的不确定性因素,需要在今后的研究和使用中认真分析和评价。

鹅星状病毒感染抗体依赖性增强作用

为了探究鹅星状病毒感染是否存在抗体依赖性增强作用,用中和效价为1∶94、1∶141和1∶282共3种不同抗体滴度(低、中、高效价)的鹅星状病毒卵黄抗体分别进行雏鹅保护试验和鹅胚中和试验,同时设空白对照和攻毒对照。结果显示,雏鹅保护试验中抗体效价1∶94组鹅均发病,病死率90%(9/10),1∶141效价组鹅的发病率为30%(3/10),病死率20%(2/10),1∶282效价组鹅无发病及死亡;攻毒对照组鹅100%发病,病死率80%(8/10);1∶94抗体组动物发病时间和死亡时间均早于攻毒对照组;荧光定量PCR检测结果显示1∶94和1∶141抗体效价组Ct值均小于攻毒对照组。鹅胚中和试验结果显示,3个抗体处理组鹅胚病死率分别为100%,20%和0,攻毒和阴性对照组分别为100%和0,1∶94效价组鹅胚死亡时间显著早于攻毒对照组;荧光定量检测结果显示1∶94效价组平均Ct值显著小于1∶141效价组和攻毒对照组。结果说明低中和效价的鹅星状病毒卵黄抗体能增强鹅星状病毒在雏鹅和鹅胚体内的复制能力,发病率和病死率增加,证实鹅星状病毒感染存在抗体依赖性增强作用,其结果可为临床鹅星状病毒病的防控提供理论依据。

抗体依赖性感染增强作用与新型冠状病毒肺炎防治

新型冠状病毒肺炎(coronavirus disease 2019,COVID-19)是目前世界多国共同面临的最严重的突发公共卫生事件。2020年3月,国际病毒分类委员会将引发COVID-19的冠状病毒正式命名为严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)。尽管针对COVID-19的研究正在广泛开展,至今却仍无疗效明确的药物或者疫苗问世。尤其是针对此新型病毒免疫机制的研究尚处空白。结合以往严重病毒感染引发的免疫不良反应,以下概述抗体依赖性感染增强作用(antibody dependent enhancement,ADE)的概念及发病机制及其在冠状病毒(SARS-CoV、MERS-CoV)中的研究现状,旨在为COVID-19的防治提供潜在思路。

仔猪母源抗体的衰减规律及免疫日龄:蓝耳

猪蓝耳病是目前猪场普遍感染和引起持续损失的一个疾病,免疫程序非常重要。杜喜忠等(2012)的研究表明,蓝耳病母源抗体21日龄开始急剧下降,半衰期9天左右,在断奶前后母源抗体基本下降到临界值。韩先桂(2011)的研究结果显示,通过14、21、28日龄免疫蓝耳病活疫苗的检测结果看出,14~21日龄免疫效果最好。根据蓝耳病母源抗体的消长规律和蓝耳病病毒特有的抗体依赖性增强作用(ADE)以及蓝耳病活疫苗产生中和抗体缓慢的特点,蓝耳病活疫苗的免疫宜早不宜晚,建议14~21日龄免疫,同时做好母猪群蓝耳病病毒抗体的监测和商品猪群蓝耳病稳定性的监控。

登革病毒2型prM蛋白的表达及其抗体的ADE作用研究

目的建立登革病毒2型(DENV-2)前膜蛋白(prM)的原核稳定表达系统,并制备prM多克隆抗体,研究登革病毒特异性prM抗体的中和作用及抗体依赖性感染增强作用(ADE)。方法应用大肠杆菌表达系统表达全长DENV-2 prM蛋白,经电洗脱法纯化重组蛋白,免疫家兔,制备兔抗prM蛋白多抗;应用空斑减数中和试验(PRNT)和流式细胞术(FCM)分别检测prM兔多克隆抗体的中和作用和ADE效应。结果重组prM蛋白在原核系统可获得高效表达,prM蛋白的表达量占大肠杆菌全菌蛋白的15%左右;其免疫血清经Western blotting法证实为登革病毒特异性prM多克隆抗体,用ELISA法检测效价为1:800 000。PRNT表明,prM抗体对成熟和不成熟DENV-2感染C6/36细胞中和作用有限,最大中和程度分别为49.84%和50.22%;FCM结果表明,prM抗体能在较大的抗体稀释度范围(10-2～10-6)增强成熟和不成熟DENV-2感染,且在10-3稀释度时达到最高峰。结论重组DENV-2 prM蛋白有很强的免疫原性,其诱生的prM抗体对登革病毒仅有较弱的中和活性,但却呈现出较强的ADE作用,揭示prM抗体是一种感染增强性抗体。

猪无名高热综合征临床病例研究

通过电镜直接观察从吉林省、辽宁省部分地区收集到的猪无名高热综合征病料,发现主要为猪繁殖与呼吸综合征病毒、副粘病毒、猪瘟病毒;将从吉林省的无名高热综合征病料中分离到的副粘病毒、病料原液以及由病料制得的自家灭活疫苗分别接种到血清检测无名高热综合征主要病原抗体阴性的健康仔猪,同时设立阴性对照,对临床感染的仔猪进行了病理变化、病毒分离、细菌检测等方面的鉴定分析,对无名高热综合征病原的致病特点、发病规律和灭活疫苗使用中出现的抗体依赖性增强作用(ADE)进行了探讨研究。结果表明:初步认定两省部分地区无名高热综合征的主要病原体为PRRSV,由病料所制得灭活疫苗在活体中具有抗体依赖性增强现象。