低危人群梅毒螺旋体抗体初筛试验结果分析及流程改进建议

目的通过分析低危人群中梅毒螺旋体抗体初筛试验结果,对相应流程提出改进措施。方法用化学发光微粒子免疫分析法(chemiluminescent microparticle immunoassay,CMIA)进行梅毒血清学初筛试验,阳性标本进行梅毒螺旋体颗粒凝集试验(Treponema pallidum particle agglutination,TPPA)和梅毒快速血浆反应素环状卡片试验(rapid plasma regain card test,RPR)。CMIA与TPPA结果不符者用荧光螺旋体抗体吸收试验(fluorescent treponemal antibody absorption test,FTA-ABS)验证。结果41 275份血清标本中,经CMIA初筛阳性608份(1.47%),CMIA S/CO值中位数(25分位数,75分位数)为7.31(2.12,20.33)。608份初筛阳性标本中,TPPA复检阳性仅369份(占60.69%),RPR阳性182份(占29.93%)。239份CMIA阳性而TPPA阴性的标本中,FTA-ABS验证结果显示,Ig M类抗体全部阴性,19份Ig G类抗体阳性。当CMIA S/CO≥1时进行TPPA法复检,TPPA复检阳性者判断为梅毒感染血清学阳性时,假阴性率为4.9%(19/388),假阳性率为0%。结论 CMIA法梅毒血清学初筛试验存在假阳性问题,应当结合TPPA复检结果进行判断,并注意定期复查。

梅毒螺旋体抗体明胶凝集试验测定梅毒特异性抗体室间质量评价结果分析

梅毒特异性抗体检测方法较多，国际上通用的试验是梅毒螺旋体血凝试验和荧光密螺旋体抗体吸收试验。梅毒螺旋体抗体明胶凝集试验（TPPA）是国内检测梅毒特异性抗体的常用方法，也是确诊梅毒的标准方法，其特异性和敏感性均较高．因此．也是卫生部临床检验中心推荐的检测梅毒的方法之一。

TPPA结合RPR方法在住院及手术患者梅毒感染检测中的应用价值

目的:探究梅毒螺旋体明胶凝集法(TPPA)结合快速血浆反应素环状卡片试验(RPR)方法在住院及手术患者梅毒感染检测中的应用价值。方法:选取疑似梅毒的住院及手术患者118例,均行TPPA、RPR及荧光梅毒螺旋体抗体吸收试验(FTA-ABS)检查。以FTA-ABS检查结果作为金标准,分析TPPA、RPR检查结果,并比较2种方法单一及联合检测诊断效能。结果:118例疑似梅毒患者中,经FTA-ABS检查确诊梅毒患者65例(55.08%),非梅毒患者53例(44.92%)。65例梅毒住院及手术患者科室分布前三为呼吸内科、妇科及心内科。以FTA-ABS检查结果作为金标准,TPPA检查阳性65例,阴性53例;RPR检查阳性61例,阴性57例。TPPA结合RPR诊断的准确率98.31%,比TPPA、RPR单一诊断的89.93%、84.75%高,敏感度98.46%、特异度98.11%、阳性预测值98.46%、阴性预测值98.11%比RPR的83.08%、86.79%、88.52%、80.70%高(P<0.05)。TPPA结合RPR诊断的AUC(95%CI)为0.983(0.940-0.998),比TPPA、RPR单一诊断的0.897(0.828-0.946)、0.849(0.772-0.909)高(P<0.05)。结论:TPPA结合RPR方法在住院及手术患者梅毒感染检测中的应用价值较高,可提升诊断准确率及敏感度。

化学发光微粒免疫分析法检测抗TP抗体的性能评价和应用

目的探讨化学发光微粒免疫分析法(CMIA)检测抗梅毒螺旋体(TP)抗体的性能和S/CO值设定方案。方法采用CMIA检测116例患者的血清抗TP抗体,同时用荧光螺旋体抗体吸收试验(FTA-ABS)确认。分别以FTA-ABS检测结果和临床诊断结果作为标准,采用受试者工作特征(ROC)曲线评价CMIA检测抗TP抗体的性能。结果采用CMIA检测116例患者的抗TP抗体,其中有98例S/CO值>1.1、18例S/CO值≤1.1;FTA-ABS检测结果为阳性70例、弱阳性16例、阴性30例;临床诊断结果为阳性58例、阴性58例。ROC曲线分析结果显示,以FTA-ABS结果为标准,CMIA检测抗TP抗体的曲线下面积为0.885,CMIA S/CO值的最佳临界值为3.66,敏感性为95.7%,特异性为80.0%,Youden指数为0.757,当CMIA检测抗TP抗体的阳性预测值≥95%时,S/CO值为4.25;以临床诊断结果为标准,CMIA检测抗TP抗体的曲线下面积为0.944,CMIA S/CO值的最佳临界值为4.25,敏感性为87.9%,特异性为88.5%,Youden指数为0.764。结论 CMIA的敏感性高,无漏诊,有一定的误诊率,适合作为初筛实验。

应用TRUST和FTA-ABS-IgM试验判愈梅毒的探讨

目的探讨梅毒螺旋荧光抗体IgM检测治疗后梅毒患者复查结果的临床意义。方法1503例梅毒患者经驱梅治疗后在不同时期复查,收集血清标本进行甲苯胺红血清不加热试验(TRUST)、IgG梅毒螺旋体明胶凝集试验(IgG-TPPA)及IgM荧光梅毒螺旋体抗体吸收试验(FTA-ABS-IgM)检测。结果各复查期限内FTA-ABS-IgM阳性率均高于TRUST阳性率,48例(48/1503,3.19%)TRUST持续阳性,经3次以上检测FTA-ABS-IgM均为阴性,判定为血清固定。结论TRUST可用于观察疗效,FTA-ABS-IgM可协助临床判定梅毒复发、再感染及临床治愈,对判定血清固定有重要意义。

FTA-ABS在电化学发光法检测梅毒抗体低值标本中的临床应用与研究

目的采用荧光梅毒螺旋体抗体吸收试验(FTA-ABS)对电化学发光免疫分析(ECLIA)法检测的梅毒螺旋体抗体低值(1≤COI<10)标本进行复检,探讨FTA-ABS在ECLIA法测定梅毒螺旋体抗体低值标本中的临床意义。方法收集2020年3-6月ECLIA法检测梅毒螺旋体抗体低值402份标本,进行梅毒螺旋体颗粒凝集试验(TPPA),选出TPPA结果阳性43份、阴性37份、可疑20份,ECLIA法抗体低值血清标本采用FTA-ABS进行IgG和IgM特异性抗体检测。结果100份标本中,FTA-ABS IgM/IgG检测阳性64份,其阳性标本数与TPPA检测结果比较差异有统计学意义(P<0.05)。其中COI为1~5的74份标本FTA-ABS检测阳性例数47份(63.51%)、TPPA阳性28份(37.84%),TPPA结果可疑16份,两者方法比较差异有统计学意义(P<0.05)。COI值为5~10的26份标本,两者方法检测结果比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论在ECLIA测定梅毒螺旋体抗体低值(1≤COI<10)标本中,TPPA与FTA-ABS两者检测方法差异有统计学意义(P<0.05)。在检测梅毒螺旋体抗体低值时,将TPPA与FTA-ABS联用,特别是TPPA结果可疑时,有助于提高临床检测效果。

时间分辨荧光免疫法筛查低危人群梅毒螺旋体抗体分析

目的分析时间分辨荧光免疫法用于低危人群梅毒螺旋体抗体筛查的结果,研究其适用性和流程。方法采用时间分辨免疫荧光法(TRFIA)检测住院患者血清中梅毒螺旋体抗体含量,TRFIA阳性标本用梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)确认。二者不符者用荧光密螺旋体抗体吸收试验(FTAABS)验证。结果 15 786例住院患者血清标本中,TRFIA法筛查阳性317例(2.01%),其S/CO值中位数为20.61(9.48,33.55)。筛查阳性标本经TPPA确认,阳性284例,保留2例。33例结果不一致标本经FTA-ABS验证,1例TP-Ig M阳性(TPPA为保留),2例TP-Ig G阳性。随机抽取TRFIA筛查阴性标本253例,TPPA验证皆阴性。TRFIA法对梅毒螺旋体抗体检测的敏感性和特异性分别为100%和89.08%。结论 TRFIA法适合作为低危人群梅毒螺旋体抗体的筛查方法,可结合TPPA等确诊方法进行结果判断,不一致标本可用蛋白印迹技术或FTA-ABS法第三方验证,或者随访后再次检测。

梅毒实验诊断中增强化学发光技术与其它血清学比对以及在急诊筛查流程的探讨

目的 通过分析梅毒螺旋体血清学比对试验,探讨增强化学发光技术（enhanced chemiluminescence technologies,ECT）在急诊化验室筛查流程.方法 增强化学发光技术与梅毒螺旋体颗粒凝集试验（TP-PA）法同时检测2013年4月～2014年5月间257例患者血清标本梅毒螺旋体抗体,二者不相符的检测结果,使用梅毒快速血浆反应素环状卡片试验（RPR）和荧光螺旋体抗体吸收试验（FTA-ABS）进行验证.结果 ECT与TP-PA比对敏感度为98.9％,特异度为88％,二者具有较高的一致性（K=0.921,P＜0.05）;二者结果不符标本11例（4.28％）,ECT阳性TP-PA阴性的不符标本9例中,FTA-ABS IgG抗体9例均为阴性,RPR检测阳性1例;ECT阴性TP-PA阳性的不符标本2例,RPR检测与FTA-ABSIgG抗体均为阴性.经FTA-ABS验证后的ECT敏感度为100％,特异度为88.3％.结论 ECT敏感度高,特异度较好,且简便快速的方法学适用于急诊化验室梅毒血清学试验筛查.ECT阳性时,建议使用RPR检测以确定疾病的活动性.

疑似神经梅毒患者脑脊液实验室检查指标分析

目的探讨脑脊液(cerebrospinal fluid,CSF)中白细胞计数、蛋白质含量、梅毒血清学检测在神经梅毒诊断中的应用价值。方法选取2015年1月至2019年12月首都医科大学附属北京佑安医院收治的疑似神经梅毒患者629例,按照神经梅毒的诊断标准分为神经梅毒组(101例)和非神经梅毒组(528例),采集CSF进行脑脊液白细胞计数(white blood cell count,CSF-WBC)、脑脊液蛋白质定量(CSF-protein)及脑脊液梅毒血清学检测[快速血浆反应素试验(rapid plasma reagent test,RPR)、梅毒螺旋体颗粒凝集试验(treponema pallidum particle agglutination,TPPA)、梅毒荧光密螺旋体抗体吸收试验(fluorescent treponema pallidum antibody absorption test,FTA-ABS)],分析上述指标在神经梅毒诊断中的应用价值。结果629例患者CSF-WBC、CSF-protein、脑脊液RPR、TPPA、FTA-ABS敏感性分别为88.12%、14.85%、87.13%、98.02%、95.05%,特异性分别为87.50%、99.43%、90.91%、42.05%、39.39%。ROC分析,脑脊液RPR、WBC和CSF-protein的AUC分别为0.904、0.931、0.813、CSF-WBC的最佳诊断界值为10.5×106/L,CSF-protein最佳诊断界值为208.36 mg/L。结论CSF-WBC、CSF-protein、脑脊液RPR对神经梅毒的诊断有重要价值,脑脊液TPPA、FTA-ABS阴性结果可排除神经梅毒,降低CSF-protein诊断界值可提高其诊断效能。

164例HIV-1感染者梅毒RPR出现生物学假阳性情况分析

目的了解性病门诊人类免疫缺陷病毒1亚型(HIV-1)感染者梅毒快速血浆反应素试验(RPR)出现生物学假阳性(BFP)情况。方法收集该院性病门诊中已确诊HIV-1感染者,采用梅毒螺旋体抗体吸收试验(FTA-ABS-IgG)、RPR进行检测,对RPR出现BFP的HIV-1感染者,根据抗病毒治疗情况分成已治疗和未治疗两组,检测病毒载量及CD4^(+)T细胞检测并进行比对,观察抗病毒治疗情况对RPR出现BFP有无影响,1年后随访检测RPR,分析RPR出现BFP的临床转归情况。结果2146例已确诊HIV-1感染者中RPR出现BFP的有164例;4072例HIV抗体阴性者中RPR出现BFP的有22例,HIV-1感染者和HIV阴性者BFP发生率差异有统计学意义(P<0.01)。164例RPR出现BFP的患者中未进行抗病毒治疗140例,病毒载量基线HIV RNA 3.50(1.48~6.15)lg copies/mL,CD4^(+)T细胞计数344.50(239.75~480.25)mm^(3);已进行抗病毒治疗24例,未检测到HIV RNA目标基因,CD4^(+)T细胞计数420.00(289.25~611.75)mm^(3)。1年后随访检测RPR,其中109例转为阴性,31例RPR持续阳性,24例FTA-ABS-IgG转为阳性。结论性病门诊HIV-1感染者RPR出现BFP和HIV感染存在一定关系,未进行抗病毒治疗的HIV-1感染者,RPR更容易出现BFP,对HIV-1感染者RPR出现BFP情况,建议临床进行随访追踪,以便及时治疗或排除梅毒感染。

蛋白印迹法Western—Blot诊断梅毒的临床评价

蛋白印迹法(Western-Blot)是80年代新发展起来的一种先进检测技术,它结合了免疫学和生物化学的特点,特异性强,敏感性高。本文试以荧光梅毒螺旋体抗体吸收试验(FTA—ABS)和快速血浆反应素试验(RPR)作为对照,对蛋白印迹法用于诊断梅毒的若干问题作一临床评价。

梅毒不同检测方法的比较

目的通过与梅毒螺旋体-酶联免疫吸附试验(TP-ELISA)的比较评价其它不同梅毒检测方法的检测效率。方法用国产TP-ELISA检测试剂盒检测阳性标本44例,分别用梅毒螺旋体血凝试验(TPHA)、梅毒甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)、荧光密螺旋体抗体吸收试验(FTA-ABS)对44例患者的血清标本进行检测,并将检测结果与TP-ELISA进行比较。结果TPHA与TP-ELISA符合率为97.73%,两者之间差异无统计学意义(P>0.05);TRUST与TP-ELISA符合率为38.63%,差异有统计学意义(P<0.05);FTA-ABS与TP-ELISA符合率为13.51%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论TP-ELISA和TPHA可用来初筛梅毒,TP-ELISA更为简便、经济,便于质控。

梅毒患者实验室检测结果评价

目的探讨不同组合的血清学检测在梅毒诊断中的价值。方法收集2016年9月~2017年8月在北京地坛医院就诊的20 325例患者血清,分别应用甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)、梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)和荧光密螺旋体抗体吸收试验(FTA)检测梅毒血清样本。结果 20 325例患者中,有4480例确诊为梅毒螺旋体感染,在4480例TPPA阳性TP患者中,TRUST阳性者3342例,占74.6%;TRUST阴性者1138例,占25.4%;其中在3342例TPPA阳性,TRUST阳性的梅毒(TP)患者中,FTA-ABS-Ig M阳性者979例,占29.3%;在1138例TPPA阳性,TRUST阴性的TP患者中,FTA-ABS-Ig M阳性者12例,占1.05%;979例梅毒患者FTA-ABS-Ig M阳性率与TRUST不同稀释倍数呈对数相关(R2=0.9351)。结论对于开展梅毒血清学检测的实验室,应该同时进行TPPA和TRUST两种梅毒抗体的检测,在TRUST阴性和治疗后TRUST持续阳性的情况下,FTA-ABS-Ig M可作为其他两种方法的有效补充。

唇部硬下疳

患者，男，25岁。唇部无痛性溃疡2个月就诊，无其他症状。皮肤科检查：上唇和下唇各见一圆形溃疡，直径0.8～2.4 cm，基底光滑，表面干净，边缘轻微隆起，质硬（图1）。溃疡无触痛，双侧下颌下淋巴结增大。患者自述躯干和四肢曾出现对称分布皮损，无自觉症状，持续1周后消退。人免疫缺陷病毒（human immunoddifciency virus，HIV）检测阴性。快速血浆反应素（RPR）滴度1∶32，梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验（Treponema pallidum particle agglutination assay，TPPA）强阳性。荧光密螺旋体抗体吸收试验IgG 和IgM抗体阳性。患者女性伴侣梅毒血清学实验也是阳性。均给予青霉素肌内注射。4周后皮损消退（图2）。

梅毒的诊断和治疗

诊断梅毒必须结合病史、体格检查和化验进行综合考虑,必要时,还需采取追踪观察、家属调查等辅助方法,病史中很重要的一点是要询问病人有无婚外性接触史及其距发病的时间。当病人否认有婚外性接触史时,要注意其配偶有无婚外性接触史或某种性病。体格检查中除一般内科的项目外,要重点检查全身皮肤粘膜,特别是生殖器、肛门、口腔等部位。实验室检查中根据梅毒的不同时期和病人的不同症状可以化验病人的病变组织、体液、血液或者脑脊液。

确证试验评价梅毒患者感染现状的意义

目的分析梅毒患者的感染现状与治疗疗效的关系。方法用苍白密螺旋体(梅毒密螺旋体)被动血凝试验(TPPA)法确证抗梅毒抗体阳性,并测定它们的梅毒心磷脂反应素(RPR)滴度,分别对比RPR阳性组和阴性组血清与荧光密螺旋体抗体吸收试验(FTA-ABS)的检测结果;追踪检测梅毒感染者治疗的RPR滴度与FTA-ABS的抗体强度。结果RPR阳性组与RPR阴性组的FTA-ABS阳性检出率分别为77.5%与37.5%,差异有统计学意义(2χ=24.47,P<0.05);随着RPR滴度的降低,FTA-ABS的阳性检出率也降低;经过治疗RPR滴度下降的病例,其FTA-ABS检测的抗体强度也随之下降。结论观察梅毒治疗疗效,在监测RPR的下降程度时,也应检测FTA-ABS,两者均为阴性时再停止治疗。

三种梅毒螺旋体IgM抗体检测试剂性能比较分析

目的通过对3种梅毒螺旋体(TP)-lgM抗体检测试剂的性能比较,为推广此项目和临床选择试剂提供参考。方法用荧光梅毒螺旋体抗体吸收试验(FTA-ABS)检测试剂(作为参考试剂)和两种蛋白印迹法(WB)试剂分别检测103例梅毒患者和30例健康对照组血清样本TP-lgM,对结果进行比较分析。结果 103例梅毒患者中的一期梅毒、二期梅毒、胎传梅毒、神经梅毒、隐性梅毒患者,经FTA-ABS法检测,TP-lgM阳性率分别为85.7%(6/7)、100%(20/20)、90.9%(10/11)、33.3%(6/18)、46.8%(22/47)。经Kappa检验分析,WB1试剂与FTA-ABS试剂一致性好(Kappa=0.736),WB2与FTA-ABS试剂、WB1试剂一致性均较差(Kappa=0.565,Kappa=0.566)。结论建议临床使用与"金标准"(FTA-ABS试剂)结果一致性好的WB试剂检测TP-lgM。