抗体固相法体外扩增人肿瘤浸润γδT淋巴细胞

以抗ＴＣＲγδ抗体选择性活化扩增γδＴＩＬ的方法，可以从小量肿瘤组织，有效扩增其中微量存在的γδＴＩＬ。实验证实：本法可在３～４ｗｋ内获得较高纯度的γδＴＩＬ，纯度可达８５％以上。所得γδＴＩＬ具有较为完整的受体库（ｒｅｐｅｒｔｏｉｒｅ）。此法获得的γδＴＩＬ可用于进一步的功能研究、γδＴ细胞克隆及过继免疫治疗研究。

异种HSP_(70)及固相抗体法体外扩增人γδT细胞的比较

目的 :比较异种HSP70 及固相抗体法体外扩增人γδT细胞。方法 :分别用固相抗体法、HSP70BCG 及小鼠榄香烯复合瘤苗热休克蛋白 70 肽复合物 (HSP70m 肽复合物 )体外扩增人PBMCs的γδT细胞 ,流式细胞仪检测细胞表型及亚型分布 ,RT PCR检测各亚型基因的取用。MTT检测γδT细胞的细胞毒作用。结果 :培养 14天后 ,抗体法扩增的PMBCs总数增加 30～ 4 0倍 ,γδT细胞的比率由 3.2 %提高到 86 .7% ;HSP70BCG 组PBMCs总数增加 7～ 8倍 ,γδT细胞的比率由 3.2 %提高到 71.32 % ;HSP70m 肽复合物组PBMCs总数增加 4～ 5倍 ,γδT细胞的比率由 3.2 %提高到 2 7.2 6 %。抗体及HSP70BCG 扩增的γδT细胞以表达Vγ9 Vδ2亚型为主 ,且Vδ1、Vδ2、Vδ3三种基因均得到取用 ,对Daudi具较高的杀伤活性。结论 :抗体及HSP70BCG 均能扩增出高纯度的γδT细胞 ,且具有完整的受体库 ,扩增的γδT细胞具细胞毒活性。

固相抗体直接竞争ELISA法测定氯黄隆在土壤中的残留动态

采用包被抗体直接竞争 EL ISA法测定了氯黄隆在盆土中的残留动态和农田土壤中氯黄隆的残留量。结果表明 :EL ISA法测定土壤中氯黄隆的检测限 <0 .1ng/ g,标准添加回收率为 85.4 %～ 118% ,变异系数为 8.95%～ 16 .14% ,符合残留分析的要求。在本实验条件下 ,氯黄隆在土壤中的半衰期为 2 2～ 2 6 d,6 0 d降解 80 %以上。麦茬大田连续两年使用氯黄隆2 2 .5g/ hm2 、4 5g/ hm2 ,第一年麦收时中性沙质土壤和弱碱性沙壤土中氯黄隆的残留量分别为0 .2 4、0 .56 ng/ g和 0 .30、0 .96 ng/ g,第二年分别为 0 .2 8、0 .6 7ng/ g和 0 .38、1.0 9ng/ g,与平行进行的高效液相色谱法、生物测定法测定结果基本一致。

Th1、Th2及固相凝集法血小板抗体检测与早期流产相关性研究

流产对于产妇的身心危害较大,因此临床对于流产包括早期流产的诊断及防控重视程度极高。固相凝集法血小板抗体检测是近年来研究的重点,Th1、Th2是检测流产患者的免疫及机体炎性状态的重要指标,因此,近年来对此类指标的研究十分常见。本研究就Th1、Th2及固相凝集法血小板抗体检测与早期流产的相关性进行分析研究,现将结果报告如下。

MASPAT配型相合血小板输注无效的异基因造血干细胞移植患者的血小板输注策略

目的:探讨异基因造血干细胞移植患者血小板抗体固相凝集法(MASPAT)配型相合血小板输注无效的原因及血小板输注策略。方法:选取1例因输血诱导产生供者特异性HLA抗体(DSA),且该DSA导致患者移植失败和MASPAT配型相合血小板输注无效的案例,详细分析该患者血小板输注无效原因及血小板输注策略。结果:患者女,32岁,以“发热、白细胞减少”为主要表现起病,于外院明确诊断为急性髓系白血病(高危),化疗缓解后拟行造血干细胞移植入院。在化疗过程中,患者因输注血小板产生DSA,且该DSA存在与首次移植供者不合的HLA基因位点,导致首次移植原发植入失败。该患者在移植前后多次进行血小板输注,结果显示,MASPAT配型相合血小板输注有效率仅为35.3%,进一步分析血小板输注无效的原因为MASPAT方法漏检了抗体。行二次造血干细胞移植时,选择了DSA-供者,且规避初次移植过程中配型相合但输注无效的血小板,结果该患者移植成功,顺利出院。结论:DSA可引发移植失败或使移植物失功。对于已经产生DSA的患者,在输注血小板前仅采用MASPAT配型相合的血小板输注策略会漏检抗体,导致血小板输注无效。

用三种检测方法检测116对不育夫妇抗精子抗体的临床研究

目的探讨男性不育症发生的原因。方法对116对不育夫妇男性做精液分析,用精子制动试验(SIT),免疫选洗法(panning)和固相酶染法(SESA)三种检测循环抗精子抗体的检测方法进行比较研究。结果三种方法测得的血清抗精子抗体阳性结果在男女性别间均无明显差异(P>0.05)。有感染者和无感染者三种方法阳性检出率比较均无显著性差异(3P>0.05)。结论 SIT操作简单,灵敏度高,阳性患者血清滴度高达1∶64,Panning和SESA敏感性特异性都很高,抗体的检出对临床不育的治疗和愈后的判断提供了有价值的指标。

急性胰腺炎患者vW因子、P-选择素的变化及临床意义

目的 探讨急性胰腺炎(AP)患者血浆von Willebrand因子(vWF)、P-选择素的变化及临床意义。方法 采用双抗体夹心固相酶免疫法测定34例AP患者和30例健康献血者的血浆vWF、P-选择素水平,对其进行相关性分析。结果 AP患者发病24h的血浆vWF、P-选择素水平分别为(214.6±53.2)％和(81.8±17.7)μg/L,显著高于正常对照组的(107.5±29.6)％和(14.7±4.5)μg/L(P<0.01)。重症AP患者血浆vWF、P-选择素水平分别为(251.9±62.7)％和(95.9±21.7)μg/L,显著高于轻型AP患者的(195.8±35.7)％和(73.5±16.1)μg/L(P<0.01)。vWF、P-选择素预测重症AP的敏感性、特异性和准确性分别是91.7％、86.4％、88.2％和58.3％、81.8％、73.5％。结论 AP患者存在血管内皮损伤和血小板的过度活化。测定AP患者血浆vWF水平可早期预测病情的严重程度。