匹拉米洞半定量检测法与双抗体夹心法检测粪便隐血的比较

目的探讨FOBpsm和IFOB两种方法检测粪便隐血的灵敏度和特异性及抗干扰能力。方法分别采用两种方法分别对512例消化科患者标本进行隐血检测,同时测定已知Hemoglobin,Hb的红细胞悬液以及在粪便中加入动物血、菠菜、铁剂、铋剂、维生素C等干扰物质对两种方法检测的灵敏度、特异性、检测上、下限以及抗干扰能力进行分析。结果FOBpsm的阳性率为44.1%,IFOB的阳性率为77.7%,P<0.005,差异具有统计学意义。FOBpsm检测Hb的浓度范围:20μg/mL>100mg/mL。IFOB检测Hb的浓度范围:1μg/mL~10mg/mL。IFOB检测加入各种干扰物质的粪便标本时均能准确排除干扰,FOBpsm则出现假阳性或假阴性结果。结论IFOB的灵敏度、特异性及抗干扰能力均优于FOBpsm。但是,FOBpsm能够避免钩状效应,两种方法应互相应用弥补方法学的不足。

应用ELISA双抗体夹心法检测猪细小病毒抗原的研究

研究建立了从胎猪脏器中检测猪细小病毒（ＰＰＶ）抗原的ＥＬＩＳＡ双抗体夹心法。试验方法的最佳工作条件为，抗体浓度１：４００，酶标抗体浓度１：５０。５４份胎猪样品阳性检出率为５９．３％，不同脏器的阳性检出率分别为，心３６．４％、肝脏７２．７％、脾脏５０％、肺脏６６．７％、肾脏６６．７％。

用单克隆抗体酶联免疫吸附试验双抗体夹心法检测红内期恶性疟原虫抗原

本文介绍了以兔抗恶性疟原虫（p、f）多克隆抗体包被,用混合的二种单克隆抗体进行反应酶联免疫吸附试验（ELISA）双抗体夹心法检测人体红细胞内的恶性疟原虫抗原。恶性疟（镜检确诊）和非疟疾患者的滤纸血样本测定符合率分别为91.5％（43/47）和96％（24/25）。检测敏感度为5个疟原虫/10~6红细胞,对恶性疟原虫的海南和江苏地理株的测定结果显示,两者的符合率无显著差异。但对间日疟样本测定结果不理想。

酶联免疫双抗体夹心法检测牛初乳素中免疫球蛋白IgG

〔目的〕建立检测牛初乳素为原料的保健食品中免疫球蛋白IgG的常用酶联免疫双抗体夹心法。〔方法〕分离纯化小牛血清中IgG,以牛IgG免疫新西兰兔,获得抗牛IgG的血清,分离纯化,制备兔抗牛IgG。〔结果〕1000ng/孔兔抗牛IgG饮被酶联板,3倍比稀释牛IgG,夹心法检测。〔结果〕在牛IgG0.031mg/ml-2.50mg/ml范围,浓度与吸光度值线性相关,方程为:y=0.358+0.767x,相关系数为r=0.995,当添加50mmIgG时,回收率为88.4％,变异系数为6.1％。〔结论〕该方法具有特异性强、快速、灵敏和分析成本低等特点。

双抗体夹心法检测胆管癌患者血清中胆管癌相关抗原的临床意义

胆管癌相关抗原（ＣＣＲＡ）是我们从人胆管癌组织中提取的一种新的肿瘤标志物。建立了检测ＣＣＲＡ的ＥＬＩＳＡ方法，检测了４０例正常人及２６８例良恶性疾病病人血清的ＣＣＲＡ浓度，后者包括胆管癌３６例、原发性肝癌４０例、胰腺癌２６例、胃癌３１例、结直肠癌３４例、肺癌１７例、肝硬变２０例、胆石症４０例及胃溃疡２４例。结果显示：４０例正常对照组的血清ＣＣＲＡ浓度为（１４．３８±７．３４）μｇ／ｍｌ（ｘ±ｓ），正常上限为２８．９５μｇ／ｍｌ（ｘ＋２ｓ）；血清ＣＣＲＡ诊断胆管癌的敏感性是７７．７８％，明显高于其它肿瘤组（０～２５）％（Ｐ＜０．００１），特异性是（７５～１００）％。认为对于胆管癌的诊断，ＣＣＲＡ可能是一种较特异的肿瘤相关抗原。

ELISA双抗体夹心法检测河蟹“颤抖病”病毒

用纯化的河蟹“颤抖病” (暂定名 )病毒分别免疫家兔和山羊 ,制备高效价的抗血清。羊抗血清经硫酸铵盐析纯化。经方阵滴定 ,选择P/N =2 95时作 1∶10 0稀释的抗血清为工作浓度 ,建立ELISA双抗体夹心法检测样本 14 4份 ,包括来自长江水域的野生河蟹、人工感染发病的河蟹、 1999年和 2 0 0 0年从江苏采集的自然发病的病蟹及市场购买河蟹。结果显示 ,病蟹和市场购买河蟹的阳性率为 6 6 7%～ 10 0 % ,人工感染的病蟹和人工感染石蟹致病组阳性率均为 10 0 % ,来自长江水域的健康河蟹及未接种病毒的对照石蟹阳性率均为 0 ,表明建立的方法可以用于检测河蟹“颤抖病”

应用ELISA双抗体夹心法诊断鸭冠状病毒性肠炎的研究

将电镜检查鸭冠状病毒阳性的病鸭肠管及粪便,经PEG沉淀及蔗糖线性梯度超速离心提纯抗原。用其免疫豚鼠制备抗血清,经饱和硫酸铵粗提,再经QAE-ScphadcxA50离子柱纯化提取IgG。纯化IgG与辣根过氧化物酶(HRP)用过碘酸钠法进行标记,制备酶标抗体,建立ELISA了双抗体夹心法,以诊断鸭冠状病毒性肠炎抗原,对发病鸭及回归试验、人工感染试验中收集的55份粪便样品,用本试验检测,并用电镜检查作为对照,证明该法具有特异、敏感、快速、简便之优点,解决了仅靠电镜检查的局限性。

应用双抗体夹心法ELISA检测IBDV的研究

从抗ＩＢＤＶ高免蛋黄液中提取ＩｇＧ，用作包被抗体和酶标记，建立了检测ＩＢＤＶ的双抗体夹心法ＥＬＩＳＡ。经抗原阻断，无关病毒对照、取代、验证等项试验，并与常规ＡＧＰ法比较，对来源不同的１００多个样品进行检测，结果表明：该法对患鸡腔上囊、脾脏的检出率均为１００％，比ＡＧＰ法敏感１００倍以上，用肉眼观察阳性与阴性之间颜色差异显著，不存在非特异性反应。试验证明该法具有满意的待异性、敏感性、快速性和稳定性，是ＩＢＤ早期病原学诊断和流行病学调查的有效手段。

检测瞬时受体电位通道6的ELISA双抗体夹心法的建立

目的建立ELISA双抗夹心法以用于TRPC6蛋白的测定。方法采用mAb相加法和配对实验,选择最佳配对组合;并通过cELISA法测定mAb阻断率,以选亲和力较高的mAb进行HRP标记,最终建立ELISA双抗体夹心法以用于大鼠和小鼠脑组织TRPC6蛋白的测定。结果 mAb-A2与mAb-F11的AI>50%,配对较佳;mAb-F11亲和力较强,IC50为0.6μg/ml;HRP标记mAbF11的最低工作浓度为1∶1 600;建立ELISA双抗夹心法可检测到大鼠和小鼠脑组织TRPC6蛋白分别为(1.42±0.06)μg/ml和(0.88±0.04)μg/ml。检测线性范围0.625～10μg/ml,R2=0.992,组间变异系数小于10%。结论所建立的ELISA双抗夹心法灵敏高,特异性强,重复性好,可用于脑组织中TRPC6蛋白的测定。

双抗体夹心法检测血清S-100蛋白及其临床意义

目的 :为研究血清中S 1 0 0蛋白与脑组织病变的关系。方法 :采用S 1 0 0蛋白单克隆抗体为包被抗体和抗S 1 0 0多克隆抗体为检测抗体的双抗体夹心ELISA方法 ,检验神经系统损伤及脑肿瘤组与正常对照组 (无神经系统损伤、无肿瘤 )的血清中S 1 0 0的含量。结果 :神经系统损伤患者S 1 0 0蛋白大多 >0 .1 5 μg·L-1 ,正常对照组 <0 .1 5 μg·L-1 ,差别有显著性。结论 :S 1 0 0蛋白可作为衡量脑组织病变 (脑损伤、脑肿瘤 )的一个临床指标 。

ELISA双抗体夹心法检测幼犬轮状病毒的研究

应用ELISA双抗体夹心法对幼犬轮状病毒感染情况进行调查,结果表明兰州地区幼犬轮状病毒感染阳性率为57.1%,其中2～4月龄的幼犬占阳性病例的75.0%,而2月龄以内及大于4月龄的犬感染轮状病毒的病例较少。

用双抗体夹心法检查鸡传染性支气管炎病毒抗原

鸡传染性支气管炎(IB)尽管有多种诊断方法,但诊断和鉴别诊断仍有一定困难。尤其在疾病的早期,要靠检测病毒抗原。我们用多种IB病毒(IBV)株多次感染SPF鸡,制备IB阳性血清并经过纯化处理,用作第一抗体;用具有群特异性IB单克隆抗体(Mab)作为第二抗体;中间夹被检材料(抗原)。用标记的山羊抗鼠IgG为指示系统。

酶斑点杂交法与双抗体夹心法检测汉坦病毒感染的比较

目的将酶标抗汉坦病毒NP抗原单链抗体应用于酶斑点杂交法和双抗体夹心法,检测汉坦病毒感染,探索价格低廉早期HFRS诊断试剂。方法以戊二醛偶联辣根过氧化物酶和抗汉坦病毒NP抗原单链抗体,制备酶标单链抗体,并应用于酶斑点杂交法和双抗体夹心法中,检测56份早期HFRS患者血清及66份阴性对照血清。结果56份HFRS患者血清中,双抗体夹心法检测出29例阳性,阳性率为51.79%,酶斑点杂交法检测出28例阳性,阳性率为50.00%,两方法检测66例阴性对照血清,结果均为阴性。统计学处理,两方法差异不显著。结论以酶标抗汉坦病毒NP抗原单链抗体制备的酶斑点杂交和双抗体夹心诊断试剂,均为稳定性好、假阳性率低、造价低廉、诊断可靠的诊断试剂。

应用ELISA双抗体夹心法检测法氏囊病毒

从抗传染性法氏囊病（ＩＢＤ）高免卵黄液中提取ＩｇＧ，用作包被抗体和酶标记抗体，建立了检测ＩＢＤ病毒的ＥＬＩＳＡ双抗体夹心法，经特异性检验，阻断实验，敏感性检验等，证明此方法具有良好的特异性、敏感性，比普通免疫琼扩法可提高灵敏度１０００倍以上。为大样本检测ＩＢＤ病毒提供了一种有效的方法，是ＩＢＤ病原学诊断及流行病学调查的可靠手段，值得推广、使用。

双抗体夹心法测定注射用重组人白细胞介素-2的含量

目的:建立用双抗体夹心法(ELISA 法)测定注射用重组人白细胞介素-2的含量。方法:采用酶标仪在450 nm 处测量白细胞介素-2复合物的 A_(450nm)值,并计算重组人白细胞介素-2冻干粉的百分含量。结果:白细胞介素-2浓度在31.25～500 pg·mL^(-1)范围内线性关系良好(r=0.9999);低、中、高3种浓度的回收率分别为97.3%,98.4%,101.4%,RSD 均小于5.0%。质量控制符合要求。精密度在误差许可范围内。注射用重组人白细胞介素-2的含量为49.55μg·mg^(-1)。结论:方法准确、可靠,注射剂辅料对测定无干扰,可用于注射用重组人白细胞介素-2的含量测定。

ELISA(双抗体夹心法)共系统检测抗-HBe与HBeAg结果分析

目的探讨用双抗体夹心法检测HBeAgEIA商品试剂盒共系统检测抗-HBe与HBeAg的可行性及结果判定方法。方法用双抗体夹心法检测HBeAgELISA试剂盒结合配套中和(竞争)抑制法检测抗-HBeELISA试剂盒中的中和试剂(HBeAg)等试剂组分共系统检测1000份随机血清(浆)标本抗-HBe与HBeAg,并分别以常规ELISA检测抗-HBe与HBeAg作平行对照。结果ELISA共系统检测抗-HBe与HBeAg易于目测;它们的比色判定临界值同常规ELISA易于设定(或使用临界值血清,检测HBeAg时也使用抗-HBe阴性对照),与常规ELISA检测比色判定无显著性差异(配对计数资料比较的χ2检验:相关检验均为P<0.005,υ=1,a=0.05;抗-HBe优劣检验(ELISA共系统检测抗-HBe前两项COV与抗-HBe临界值血清)均为P>0.900,υ=1,a=0.05;HBeAg优劣检验依次为HBeAg临界值血清:(1)P>0.900,υ=1,a=0.05,抗-HBe阴性对照;(2)0.100>P>0.050,υ=1,a=0.05,ELISA共系统检测HBeAgCOV;(3)0.100>P>0.050,υ=1,a=0.05,但χ21<χ22<χ23)。结论用双抗体夹心法检测HBeAgELISA试剂盒与配套中和(竞争)抑制法检测抗-HBeELISA试剂盒试剂组分重组共系统检测抗-HBe与HBeAg是可行的,两种试剂盒能够相互替代,在有优质现代酶标仪的实验室,可以省去常规ELISA试剂盒其中之一,实用价廉,值得推广。

双抗体夹心法检测血吸虫病患者血清中循环抗原

为探讨检测急性和慢性血吸虫病患者体内成虫的存活率的方法。采用双抗体夹心法检测血吸虫病患者血清中循环抗原 ,并与乳胶凝集试验 (L AT)及间接血球凝集试验 (IHA)进行比较 ,结果急性期和慢性期血吸虫病患者循环抗原阳性率分别为 88.2 3%及 2 7.39%。明显高于同期 L AT及 IHA法的检出率。结论 ,循环抗原具有较强的特异性和敏感性 ,双抗体夹心法弥补了 L AT及

双抗体夹心法测定啤酒中的泡沫活性蛋白的研究

啤酒泡沫是决定啤酒质量的重要因素之一,也是消费者评价啤酒质量好坏的第一特征。泡沫活性蛋白是啤酒泡沫中的重要成分,而Z4蛋白又是泡沫活性蛋白的主要成分。实验主要进行了Z4蛋白的提取纯化和Z4蛋白的单克隆抗体的开发,以及利用夹心法测定Z4蛋白的参数条件的优化和测定结果与泡持性的关系的研究。

ELISA捕捉法与双抗体夹心法检测HFRSV-IgM抗体的比较

本文用ELISA双抗体夹心法和ELISA捕捉法同时检测HFRS患者血清250份,阴性对照血清57份。结果表明:两方法均无假阳性反应,捕捉法的变异系数为8％,双抗体夹心法为10.2％;捕捉法和双抗体夹心法的GMT分别为108800和22400,捕捉法是夹心法的48.6倍。