硫氰酸盐洗脱法测定噬菌体抗体的相对亲和力

目的 建立一种测定噬菌体抗体相对亲和力的方法。方法 参照硫氰酸盐洗脱法测定完整抗体分子和Fab段相对亲和力的方法 ,在ELISA实验中以酶标抗M13为二抗检测 5个单克隆噬菌体抗体的相对亲和力 ,并与可溶性Fab段的相对亲和力进行比较。结果 噬菌体抗体可以耐受硫氰酸盐的洗脱 ,用硫氰酸盐洗脱法测定 5个噬菌体抗体所得亲和力排序与测定其相应可溶性抗体分子片段所得结果一致。结论 硫氰酸盐洗脱法可用于噬菌体抗体相对亲和力的测定。

BED-CEIA估计HIV-1新近感染率的有效性及其影响因素的评价

在艾滋病流行病学研究中,衡量艾滋病流行趋势最常用的指标是HIV累积感染率和新近感染率.与累积感染率相比,新近感染率对艾滋病流行趋势预测、干预效果评价以及防制策略的制定等能提供更直接的信息.在获取新近感染率的方法中,除了经典的流行病学队列随访方法,目前普遍使用的血清学方法之一是IgG捕获BED酶联免疫法（BED-CEIA）.2001年,美国疾病预防控制中心（CDC）艾滋病免疫和诊断室评估了16种基于不同抗体和原理的HIV-1新近感染检测方法,发现新近感染者与既往感染者相比,各种抗体滴度均较低;其中gp41抗体滴度在新近感染者和既往感染者中的差别最大,两者的滴度区间几乎没有重叠,新近感染者的gp41抗体亲和力低于既往感染者,从而认为gp41抗体能够区分新近感染者和既往感染者,并且酶联免疫实验操作相对简单、效果也较理想,因此该室着手开发基于gp41抗体的HIV-1新近感染检测的酶联免疫方法[1].