抗中性粒细胞胞质抗体的实验室检测及临床应用

抗中性粒细胞胞质抗体（ANCA）是针对存在于中性粒细胞和单核细胞胞质颗粒中的抗原的一组抗体,通常被认为是与中性粒细胞胞质中的嗜苯胺蓝颗粒和特异性颗粒反应的自身抗体[1]。目前认为ANCA对系统性血管炎、溃疡性结肠炎、系统性红斑狼疮（SLE）等多种疾病的诊断和鉴别诊断具有重要意义。因此作为对ANCA相关性疾病进行诊断的特异性血清学工具,ANCA的检测也日益重要。

单克隆抗体PAP法对实验感染雏鸭体内鸭肝炎病毒的定位检测

本实验运用单克隆抗体PAP法，对实验感染鸭肝炎病毒雏鸭的组织切片进行染色观察，旨在动态研究病毒在雏鸭体的分布以及病毒与组织病变的关系。研究结果显示，感染后3小时，雏鸭心肌、肝、脾、胰、腿部肌肉、大脑等组织的细胞浆内均出现了PAP染色的特异棕黄色产物。除胰脏组织切片的PAP反应性在感染后168小时达到最高外，上述其他组织的最高PAP反应性均在感染后24小时；对同期的不同组织切片比较观察发现，肝、腺、胰外分泌腺、肾小管上皮细胞及腿部肌肉细胞的PAP反应性比心肌及大脑神经元细胞的PAP反应性强。由此表明，鸭肝炎病在感染后3小时达全身化，并主要侵害肝、脾、肾、胰及腿部肌肉，继而引起相应的变化。辣根过氧物酶-抗辣根过氧化酶法（PAP）是目前公认的高灵敏性、高特异性的免疫组织化学染色方法之五。有资料表明，该方法不仅可用于各种病原微生物、肿瘤性抗原及其他生物性抗原物质的定位检测，还可同时进行H．E或细胞核染色，对相关的组织细胞的结构进行观察，因而，PAP法被广泛用于病理学、细胞生物学等领域的研究。近年来随着各种抗原物质的单克隆抗体的生产，尤其是鼠源性PAP单抗试剂的推广应用，PAP法的特异性、灵敏性大大提高，应用范围越来越广。据此，本研究在建立雏鸭病毒性肝炎疾?

流式细胞仪检测人外周血淋巴细胞亚型的实验探讨

流式细胞仪(flowcytometry,FCM)是单克隆抗体技术、激光技术、电子计算机技术等学科高度发展、综合的结晶,FCM的应用标志着医学生物学研究进入了细胞和分子水平,为微观认识细胞提供了精密、准确的方法。测定琳巴细胞亚型对了解机体的免疫功能状态,指导临床诊疗等均有重要的参考价值。采用流式细胞仪检测,具有简单、快速、计数细胞量大、重复性好、灵敏度高等优点,但在实验中也存在很多影响因素。为此,对可能出现的问题作简要探讨。

结核感染T细胞及结核抗体检测在女性生殖器结核诊断中应用研究

目的浅析在女性生殖器结核诊断中采用结核抗体检测(TB-Ab)与结核感染T细胞斑点实验(T-SPOT.TB)的诊断价值。方法回顾性分析我院收治疑似生殖器结核的62例女性患者临床病案资料作研究样本,所有患者均接受TB-Ab与T-SPOT.TB;分析两种检测方式合并的联合检测与任一单一检测方式单独使用的诊断结果差异,评估临床最佳诊断方案。结果62例受检者中,最终确诊罹患生殖器结核者53例;TB-Ab诊断真阳性、真阴性、假阳性、假阴性依次为4、3、6、12例,准确率、特异度与敏感度依次为70.97%、33.33%、77.36%;T-SPOT.TB诊断真阳性、真阴性、假阳性、假阴性依次为46、5、4、7例,准确率、特异度与敏感度依次为82.26%、55.56%、86.79%;TB-Ab+T-SPOT.TB诊断真阳性、真阴性、假阳性、假阴性依次为51、8、1、2例,准确率、特异度与敏感度依次为95.16%、88.89%、96.23%。结论TB-Ab+T-SPOT.TB联合检测在女性生殖器结核诊断中效能最高。

EB病毒抗体检测在儿童传染性单核细胞增多症诊断中的应用

EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)属于4型疱疹病毒,类似其他疱疹病毒科的病毒,人群对EBV普遍易感,大多数人初次感染发生在儿童或青少年时期并可终生携带.传染性单核细胞增多症(infectious mononucleosis,IM)是典型的EBV初次感染表现;EBV感染可能导致不良预后,如发展成为慢性活动性EBV感染(CAEBV)和EBV相关的噬血性淋巴组织增生(EBV-HLH).另外EBV还与儿童及成人的淋巴瘤等多种肿瘤发病有关.因而及时准确的实验室诊断有助于临床对EBV感染的时相、机体状况和发生不良转归的风险进行评估,这对于儿童EBV感染性疾病的诊断及预后至关重要[1].本研究通过对EBV抗体单个早期抗原M抗体(EA-IgM)、衣壳抗原M抗体(VCA-IgM)、衣壳抗原G抗体(VCA-IgG)、核心抗原G抗体(NA-IgG)以及联合抗体进行分析,以期评价此种检验方法对于儿童传染性单核细胞增多症的诊断价值.

草鱼呼肠孤病毒HZ08株抗体IPMA检测方法的建立及应用

为建立一种检测草鱼呼肠孤病毒HZ08株(HZ08)抗体的免疫学方法,本实验以接种HZ08病毒的细胞培养板为抗原板,以免疫弱毒疫苗的草鱼血清为抗体,通过反应条件优化,建立了检测GCRV HZ08血清抗体的免疫过氧化物酶单层细胞实验(IPMA)方法,并对该方法特异性、敏感性、重复性、与ELISA检测结果的符合率及对临床血清样品的检测效果等进行了验证。结果显示,HZ08株种毒按照1×103拷贝/μL浓度接种后72h固定,HRP-Ig G二抗1∶1000稀释,待检血清1∶100稀释时效果最佳;该IPMA方法与草鱼阴性血清、免疫细菌三联疫苗的草鱼血清、感染GCRV JX0901(GCRVⅠ型)的草鱼血清无交叉反应;GCRV HZ08株阳性血清稀释至1∶800时仍能检出;批内和批间重复性实验显示,该方法具有良好的重复性;符合性实验结果显示,该IPMA方法与ELSIA方法的阳性和阴性符合率分别为95.7%和87.5%;用建立的IPMA方法检测草鱼出血病弱毒疫苗免疫草鱼,免疫2周后抗体水平达到峰值;对现地送检的126份草鱼血清样本进行检测,平均检出阳性率为72.2%。研究表明,建立的HZ08株IPMA方法特异性强、重复性好、敏感性高,为GCRVⅡ型的流行病学调查、疫苗免疫效果评价及抗原抗体检测提供了一种有效的检测手段。

CMV感染细胞核抗早期抗原抗体(PENA)的测定及临床评价

目的 对目前国内各种广泛应用于婴、幼儿的CMV实验室检测方法进行初步评价。方法 本研究建立了应用间接荧光免疫法测定CMV细胞核抗早期抗原抗体 (PENA)的新方法 ,同时进行PCR检测和ELISA检测IgM、IgA、IgG实验 ,对 4 91例临床可疑为CMV感染的患儿进行检测 ,同时进行PCR方法及ELISA -IgM、IgA、IgG方法的检测 ,观察结果 ,并与尿中寻找CMV包涵体方法结果相比较。结果 PENA( 1/2 0 )阳性率 5 4 99% ,PENA( 1/10 0 )阳性率 2 1 70 % ,PCR方法的阳性率 5 5 80 % ,ELISA -IgM阳性率 8 76 % ,ELISA -IgA阳性率 5 5 0 % ,ELISA -IgG阳性率 6 8 4 3%。结论 PENA方法可以特异的检测出病人血清中的抗病毒早期抗原抗体的存在 ,并具有敏感、特异、简便的特点 ,是一种实验室检测CMV的新方法 ,可作为临床检测CMV感染的补充方法 。

非典型呼吸道病原体的实验室检测方法

非典型呼吸道病原体感染早期临床表现主要为全身乏力、食欲下降,继而出现明显呼吸道症状,剧烈咳嗽,干咳或血痰,肌肉关节酸痛等症状,体格检查通常无异常,胸部X线条索或点片状阴影,白细胞大多正常或偏低.非典型呼吸道病原体检测大部分依靠实验室检查,检测的方法多种多样,主要的方法有：血清学和直接检测法,细菌的分离培养和病毒的组织细胞培养法,间接、直接免疫荧光抗体法,酶免疫测定法,核酸扩增法.

人类免疫缺陷病毒感染的实验室检测

人类免疫缺陷病毒(HIV)是艾滋病(AIDS)的病原。人受HIV感染后,有较长时间的无症状带毒,一般为2～6年,有的带毒时间可更长。由于无症状的HIV感染者能成为重要的传染源,所以HIV感染的检测尤为重要。本文就此进行简要综述。

一例头孢曲松药物性抗体导致溶血危象的识别与检测

目的通过对头孢曲松药物性抗体导致的溶血危象进行识别和检测,方法用全自动生化仪检测Hct、Hb、胆红素和尿血;血型检测、直接抗球蛋白实验、不规则抗体检测和自身对照实验采用微柱凝胶法完成;根据患者用药史作药物致敏红细胞检测实验以是否有药物抗体,并送第三方实验室做药物抗体的确认试验和效价检测。结果在用药后d7,患者RBC数为0.69×10^(12)个/L,Hct为0.14,Hb为28 g/L,总胆红素为82.3μmol/L,直接胆红素为40.4μmol/L,间接胆红素为41.9μmol/L,尿隐血实验阳性,出现了严重的溶血危象;ABO血型为B型,Rh血型为ccDEE;不规则抗体筛查结果为阴性;直接抗球蛋白试验(抗-IgG)为强阳性(4+),抗-C3d为强阳性(4+),盐水介质自身对照为强阳性(4+);患者体内有IgM和IgG抗头孢曲松钠药物抗体,药物抗体效价为256。结论在头孢曲松药物的使用过程中要特别注意药物性抗体产生,当患者出现贫血时,应进行对应的实验室检查,并立即停药和对症治疗,血液制剂的选择应防止补体的输入而加重病情。

骨髓细胞瘤禽白血病的实验室诊断

禽白血病是由禽白血病病毒（avian leucosis virus,ALV）引起的多种肿瘤性疾病的总称,主要以造血细胞恶性增生为特征,包括淋巴细胞性白血病、成红细胞性白血病、成髓细胞性白血病、血管瘤病、骨髓细胞瘤病、骨化石病等。由鸡分离的ALV分为A、B、C、D、E、J 6个亚群,在自然条件下,由ALV导致的肿瘤病例主要是A、B亚群引起的,J亚群则主要引起肉用型鸡髓样细胞性肿瘤。

炎症性肠病中抗中性粒细胞胞浆抗体的研究进展

炎症性肠病（inflammatoryboweldisease，IBD）是一种慢性非特异性肠病，目前病因并不明确。随着炎症性肠病成为临床较常出现的疾病，对于它的早期诊断、治疗、预后的研究就日渐重要。而对于它的实验室检查较为缺乏。近年来实验室的血清学研究不断发展对于疾病的检测有着重要意义。实验室血清学检测炎症性肠病的报道也日渐增多，其中的抗中性粒细胞胞浆抗体（AntineutrophilCytoplasmicAutoantibodies，ANCA）与对于系统性血管炎炎症性肠病等多种疾病的诊断和鉴别诊断具有重要的意义。

自身免疫性溶血性贫血的实验室检测与输血疗效观察

大量的临床研究证实，当人体的免疫监视功能出现异常时，一旦受到外来抗原的刺激，就会出现与自身抗原相对应的抗体，导致人体出现自身红细胞致敏或抗红细胞抗体；当其受到补体细胞的活化作用影响时，就会增加红细胞的受破坏程度，最终导致患者出现自身免疫性溶血性贫血。为了对自身免疫性溶血性贫血的实验室检测情况及其输血治疗的效果进行全面深入了解，本研究将对我院2006年11月-2013年11月所收治的52例AIHA患者的临床资料进行回顾性分析，现报告如下。