抗BVDV Erns蛋白单克隆抗体制备及生物学特性鉴定

为制备抗牛病毒性腹泻病毒(BVDV)Erns蛋白单克隆抗体,本试验用Erns重组蛋白免疫Balb/c鼠,刺激小鼠脾脏产生特异性免疫细胞;通过化学剂诱导剂PEG-4000诱导免疫细胞和骨髓瘤细胞融合,形成杂交瘤细胞;间接ELISA方法结合亚克隆方法筛选阳性细胞孔;鉴定为稳定分泌抗体的细胞株做扩大培养,细胞悬液计数并无菌注射KM小鼠腹腔,制备、收集腹水抗体;SDS-PAGE鉴定抗体大小、ELISA测定抗体效价、Western blot和IFA鉴定抗体特异性。本试验建立了3株稳定分泌抗体的细胞株;腹水抗体重链大小为55 kDa,轻链25 kDa,均为IgG1型,效价高于10^(4),抗体可特异性结合病毒抗原。结果证实,制备的单克隆抗体效价高、特异性好,为制备检测BVDV试剂盒奠定基础。