错位阻双单克隆抗体夹心ELISA竞争法测定同位阻群抗体相对亲和力

在抗乙型肝炎病毒表面抗原单克隆抗体位阻分析的基础上,选用错位阻双单克隆抗体夹心ELISA竞争法测定同位阻群抗体相对亲和力。并测出了第4组、第5组相对亲和力最好的抗体为9B_5和24D_2。方法简便易行。

甲型副伤寒结合疫苗人免疫血清破伤风类毒素抗体亲和力的检测与分析

目的建立甲型副伤寒结合疫苗人免疫血清中破伤风类毒素(tetanus toxoid,TT)抗体亲和力的检测方法,探究甲型副伤寒结合疫苗免疫人体后,免疫系统对载体蛋白质TT的亲和力成熟情况,并分析与免疫后抗体含量增长情况的关系。方法采用间接ELISA检测甲型副伤寒结合疫苗免疫前后血清中TT抗体含量,利用硫氰酸钾(potassium thiocyanate,KSCN)洗脱测定抗体亲和力。检测免疫后抗体含量高增长倍数组(免疫后相比免疫前抗体含量增长>10倍)和低增长倍数组(免疫后相比免疫前抗体含量增长<2倍)血清,计算相对亲和力指数。结果KSCN洗脱对TT与酶标板之间的物理性吸附没有影响(P>0.05)。KSCN的最适洗脱浓度为3.1 mol/L。对于高抗体含量增长倍数组,免疫后相比免疫前抗体亲和力明显成熟,免疫前与免疫后抗体亲和力差异有统计学意义(P=0.0050,P<0.05),对于低抗体含量增长倍数组免疫后抗体亲和力成熟不明显,免疫前与免疫后抗体亲和力差异无统计学意义(P=0.8522,P>0.05)。结论KSCN可用于甲型副伤寒结合疫苗人免疫血清抗体亲和力测定,结果真实、可靠。用单一KSCN浓度洗脱法测定抗体含量差别较大的血清抗体亲和力进行了尝试,免疫前和免疫后血清抗体亲和力都能被良好地测定。对免疫后亲和力明显成熟的高抗体含量增长倍数组,免疫后抗体含量的增长很大程度上依赖于其中高亲和力抗体的增长。