Monte Carlo模拟研究抗体-抗原复合物生长的标度行为

通过Monte Carlo模拟方法对抗体-抗原复合物在等活性和非等活性条件下生长的标度行为进行了研究.模拟所用算法的有效性通过在等活性条件下的模拟结果与解析结果之间的一致性得以证明.在模拟中,主要考察了抗体-抗原复合物的数量分布函数、重均聚合度以及特征关联长度在临界点附近的标度行为,给出相应的标度指数,并以其检验溶胶-凝胶相变的广义标度律.研究结果表明,非等活性对抗体-抗原复合物的生长具有显著影响,可为临床免疫分析提供相应的理论线索.

禽用病毒-抗体复合物疫苗研究进展

病毒-抗体复合物疫苗是将病毒的特异性抗体按照适当的比例与传染性病毒混合制成的一种新型疫苗。国内外研究者做了大量的相关研究,并且在鸡传染性法氏囊病、新城疫等禽病的复合物疫苗研究中取得了突破性进展,为禽病疫苗的研究及禽病的防控开辟了一条新的独特途径。文章就复合物疫苗研究近况进行简要阐述。

磁性纳米粒子-抗体复合物分离肝癌线粒体

目的利用人肝癌组织,研究磁性纳米粒子-抗体复合物与传统线粒体分离方法之间的差异。方法取人肝癌组织,分别采用磁性纳米粒子-抗体复合物和密度梯度离心方法分离线粒体。扫描电镜观察线粒体形态,Westernblot检测线粒体蛋白标志物,流式细胞仪分析线粒体膜电位变化。结果采用磁性纳米粒子-抗体复合物方法分离得到的肝癌组织线粒体结构完整,无胞核、胞膜等组分的污染,几乎没有过氧化物酶体和溶酶体的污染。经流式细胞仪检测,线粒体膜电位稳定。结论与传统方法相比,磁性纳米粒子-抗体复合物分离方法具备简便易行,分离得到的线粒体结构完整、纯度及活性较高,并且不需要大型设备等优点。

兽用抗原-抗体复合物疫苗研究概况

综述了近年来国内外抗原-抗体复合物疫苗研究进展,着重介绍了兽用抗原-抗体复合物疫苗的优点、制备影响因素、作用机制以及实际应用情况,并对这类兼有药物作用的治疗型疫苗在我国的发展前景进行了评述。

过氧化物酶-抗过氧化物酶复合物(PAP)检测血清抗核抗体

目的 探讨过氧化物酶 -抗过氧化物酶复合物 (PAP)检测血清抗核抗体 (ANA)的实用性。方法 以小鼠肝细胞为基质 ,对 PAP方法测定血清 ANA的滴度、核型进行了方法学检测 ,并同时与间接免疫荧光法相比较 ,测定了 2 0 3例正常人及 46例风湿病患者的血清 ANA。结果 PAP法敏感性高于 IIF法 ,滴度是 IIF法的 1 0～ 6 4 0倍。PAP可提高血清 ANA的阳性检出率 ,还可提高核型的清晰度。结论 PAP法适用于缺乏荧光显微镜的基层医院开展 ANA的检测。

抗药物-药物复合物引起的不规则抗体筛查假阳性结果的消除

目的消除抗药物-药物复合物引起的不规则抗体筛查假阳性结果。方法对微柱凝胶法不规则抗体筛查阳性的29例患者标本,采用盐水介质法、吸收试验和二硫苏糖醇(DTT)法平行检测,将初步确定为抗药物-药物复合物引起的假阳性标本置于4℃冰箱3 d后,再用微柱凝胶法、吸收试验和DTT法平行检测确认抗药物-药物复合物。结果 29例微柱凝胶法不规则抗体筛查阳性的标本中,因抗药物-药物复合物引起的假阳性占62.07%(18/29):置4℃冰箱3 d前后吸收试验和DTT法检测均阳性14例,均为吸收试验阴性和DTT法检测阳性4例。其余11例吸收试验阳性、DTT法阴性标本,置4℃冰箱3 d微柱凝胶法、吸收试验及DTT法检测均为阴性。结论 DTT能够降解抗药物-药物复合物,消除由后者引起的不规则抗体筛查假阳性。

抗磷脂酰丝氨酸-凝血酶原复合物抗体在狼疮抗凝物阳性患者中的危险预测价值

目的研究抗磷脂酰丝氨酸-凝血酶原复合物抗体(a PS/PT)在狼疮抗凝物(LA)阳性患者中的临床事件危险预测价值。方法连续入选2018年1月至2019年9月在北京大学第三医院2次及2次以上LA检测阳性的患者,且每次检测间隔12周及以上,共167例。将研究对象分为发生临床事件组(n=115)和未发生临床事件组(即LA携带者组,n=52),发生临床事件组中又分为发生血栓栓塞事件(TE)组(n=18)、不良妊娠结局(APO)组(n=91)及TE+APO组(n=6)。通过化学免疫分析方法检测研究对象的抗心磷脂抗体(a CL)、抗β2糖蛋白Ⅰ抗体(aβ2GPⅠ)和a PS/PT并进行统计学分析。结果与LA携带者组相比,临床事件组a PS/PT Ig G阳性率(37.4%vs 9.6%,P<0.001)以及a PS/PT Ig G和Ig M同时阳性率(31.3%vs 5.8%,P<0.001)升高;且临床事件组a PS/PT Ig G浓度也升高[(49.2±5.2) units vs(20.1±3.4) units,P<0.01)]。a PS/PT Ig G阳性率在TE+APO组(100.0%)、TE组(55.6%)以及APO组(29.7%)高于LA携带者组(9.6%),P<0.05;a PS/PT Ig G浓度在TE+APO组[(125.7±40.3) units]、TE组[(76.3±61.4) units]和APO组[(40.9±50.2) units]也高于LA携带者组[(38.6±22.1) units],P<0.05。a PS/PT Ig M阳性率只在TE+APO组(100.0%)高于LA携带者组(38.5%),P<0.05,浓度也升高[(116.3±40.0) units vs(46.5±52.1) units,P<0.05)]。而a PS/PT Ig G和Ig M同时阳性率在TE+APO组(100.0%)、TE组(44.4%)以及APO组(24.2%)高于LA携带者组(5.8%),P<0.05。a PS/PT阳性与抗磷脂抗体谱(a CL、aβ2GPⅠ和LA) 3种抗体全阳组具有一致性(Kappa=0.114,P=0.012),且a PS/PT Ig G与Ig M浓度在3种抗体全阳组[(64.6±62.8) units,(84.3±51.8) units)]都高于LA单阳组[(19.7±16.7) units,(29.3±40.8) units,P<0.05]。结论 LA阳性患者在a PS/PT阳性情况下发生临床事件的危险增高,且Ig G与发生临床事件相关度优于Ig M;抗磷脂抗体谱中3种抗体全阳组与a PS/PT阳性具有一致性且发生临床事件危险度最高。

开放体系中抗体-抗原复合物生长的Monte Carlo模拟

为了研究更接近于真实的免疫反应系统中抗体-抗原复合物的生长,提出了一个开放的抗体-抗原系统模型,在这一体系中抗体、抗原分子能以一定的方式产生并参与反应.通过Monte Carlo模拟方法分别考察了线性体系和支化体系的演化过程,所采用的算法包含了一个自洽的叠代方法计算等待时间,以此算法为基础,研究了抗体和抗原分子不同输入方式对复合物数均和重均聚合度的影响,发现不同体系在演化过程中的相关统计特征都可以反映输入方式的变化,因而可以通过观测平均物理量来识别输入方式.

病毒 - 抗体复合物疫苗应用研究进展

病毒－抗体复合物疫苗应用研究进展ＣｒａｉｇＥ．Ｗ．等著赵有编译傅先强校利用特异性高免血清或抗体按照适当的比例与传染性病毒混合做成病毒－抗体复合物，可作为疫苗（ＩＢＤＶ－Ａｂ）给动物接种。目前此项技术已成功地用于鸡传染性法氏囊炎的免疫。但对病毒和抗体的...

β_2-糖蛋白Ⅰ/氧化型低密度脂蛋白复合物的研究进展

β2-糖蛋白Ⅰ与氧化型低密度脂蛋白结合形成2β-糖蛋白Ⅰ/氧化型低密度脂蛋白复合物,它在体内存在与否和高氧化应激状态、炎症有关。自身免疫性疾病以及一些伴有心血管病变的有慢性炎性反应的疾病患者血清β2-糖蛋白Ⅰ/氧化型低密度脂蛋白复合物水平明显升高,自身免疫性疾病患者血清中还可检测到复合物自身抗体的存在。体外实验显示,β2-糖蛋白Ⅰ/氧化型低密度脂蛋白复合物与其自身抗体形成的免疫复合物,通过Fcγ受体途径被巨噬细胞摄取,这可能是导致氧化型低密度脂蛋白被巨噬细胞摄取的主要路径之一。

葡萄糖-6-磷酸异构酶免疫复合物检测方法的建立及其在类风湿关节炎诊断中的应用

目的建立葡萄糖-6-磷酸异构酶(G6PI)免疫复合物测定方法,初步探讨其与类风湿关节炎(RA)发病机制的关系及其对RA辅助诊断、病情监测的作用。方法建立C1q抗体捕获ELISA方法,并对311例血清标本(RA患者176例、其他免疫疾病患者35例和健康体检者100例)和44例关节液标本(RA患者33例、非RA关节疾病患者11例)中的G6PI/G6PI抗体/C1q免疫复合物水平进行检测。结果以波长450 nm吸光度值(A_(450nm))表示复合物含量,176例RA患者血清中G6PI免疫复合物为0.918±0.507,显著高于其他免疫疾病对照组(0.746±0.399)和健康对照组(0.696±0.362),P<0.01;而两对照组间差异无统计学意义。RA活动组为1.045±0.529,显著高于非活动组(0.764±0.436),P<0.01。以健康对照组A_(450nm)值建立正常参考区间,结果G6PI免疫复合物对RA诊断的敏感性和特异性分别为60.2%和67.4%,活动期RA的阳性率为74%,显著高于非活动期(43.7%)。33例RA患者、11例其他关节疾病患者关节液中G6PI免疫复合物A_(450nm)分别为0.835±0.497和0.596±0.132,RA患者组显著高于其他关节病组,P<0.05。结论 RA患者血清和关节液G6PI免疫复合物含量增高,且增高程度与RA病情活动相关;G6PI免疫复合物可能在RA发病中起重要作用,且与疾病的活动性密切相关。

血浆凝血酶-抗凝血酶Ⅲ复合物对评价心房颤动患者血栓栓塞危险性的价值

目的探讨心房颤动(房颤,AF)患者血液凝血系统分子标志物凝血酶-抗凝血酶Ⅲ(TAT)浓度变化及其对评价房颤患者血栓栓塞危险性的价值。方法研究期间,行经食管超声心动图(TEE)检查发现,左心房和/或左心耳血栓者10例,另有外周动脉明确血栓栓塞并发症者8例,共18例为血栓组;行 TEE 检查未发现 LA 和/或 LAA 血栓且排除血栓栓塞并发症病史者为无血栓组(17例);未行 TEE 检查及排除外周动脉血栓栓塞并发症的房颤患者54例为房颤组,对照组33例为无房颤组。各组均分别采用酶联免疫双抗体夹心法(ELISA)和发色底物法测定血浆 TAT、D-D 浓度和 AT-Ⅲ活性,对其结果进行对比分析。结果 AF 患者无论是否伴有血栓,其 TAT 及 D-D 含量均明显高于无房颤组(P<0.05),AT-Ⅲ活性明显低于无房颤组(P<0.05)。血栓组患者 TAT、DD 水平明显高于无血栓组(P 均<0.05)。结论房颤患者可引起凝血系统的激活;检测房颤患者血浆中 TAT 可能成为评估房颤患者血栓栓塞危险性的一种有价值的方法。

t-PAIC单克隆抗体制备及磁微粒化学发光免疫检测

以组织型纤溶酶原激活剂-抑制剂复合物(t-PAIC)为免疫原制备和筛选了一对特异性单克隆抗体,并建立了一种检测人体血浆t-PAIC的磁微粒化学发光免疫检测方法。通过与参比方法比对,选定了反应速度更快的一步法作为反应模式,然后对t-PAIC检测方法的检测性能进行了评估。结果显示:该方法的空白限为0.43 ng/mL,检出限为0.91 ng/mL;线性范围为0.91~100ng/mL;重复性CV小于4%,精密度CV小于3%;样本回收率在100%~110%之间;常见干扰物对检测结果无明显影响。构建了t-PAIC检测方法的参考区间,健康成年男性参考范围为1.85~15.91 ng/mL,健康成年女性参考范围为1.90~9.43 ng/mL。t-PAIC检测方法反应快速,在血栓疾病诊断中有重要的应用价值。

不明原因复发性流产中aPS/PT IgM/IgG、anti-MCV、α-fodrin的表达及药物干预的妊娠结局分析

目的检测不明原因复发性流产(URSA)患者血清抗磷脂酰丝氨酸凝血酶原复合物(aPS/PT)、抗突变瓜氨酸波形蛋白抗体(anti-MCV)、α-胞衬蛋白抗体(α-fodrin)的表达情况,探究其与URSA的关系。并探讨羟氯喹在抗体表达阳性患者中的应用疗效。方法回顾性选取2018年11月至2022年4月郑州大学附属郑州中心医院收治的596例URSA患者作为研究组,以同期在本院体检的无不良孕产史且已正常生育的健康女性80名为对照组。采用酶联免疫吸附试验法检测两组血清aPS/PT IgG/IgM、anti-MCV及α-fodrin表达水平,并比较两组血清aPS/PT IgG/IgM、anti-MCV及α-fodrin的表达情况。对研究组aPS/PT IgM/IgG、anti-MCV、α-fodrin血清学检测阳性的111例患者进行药物干预。随访14例失访,余下97例患者中,85例自愿接受药物干预,12例拒绝药物治疗,根据其意愿分为治疗A组(n=42),治疗B组(n=43)及未治疗组(n=12)。比较治疗A组、治疗B组与未治疗组的妊娠成功率。结果研究组aPS/PT IgM、aPS/PT IgG、anti-MCV及α-fodrin表达率分别为7.38%、0.50%、7.21%、5.03%,对照组分别为0、0、0、0.12%,研究组血清aPS/PT IgM、anti-MCV表达率均显著高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);两组aPS/PT IgG、α-fodrin比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。治疗A组、治疗B组妊娠率分别为66.67%、88.37%,明显高于未治疗组(25.00%),治疗B组患者妊娠成功率明显高于治疗A组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论URSA患者中aPS/PT IgM及anti-MCV二者异常高表达是URSA发生的危险因素。对于aPS/PT IgG/IgM、anti-MCV、α-fodrin阳性的URSA患者,羟氯喹联合低剂量阿司匹林及低分子肝素治疗可明显改善妊娠结局。

抗磷脂酰丝氨酸-凝血酶原复合物抗体在抗磷脂综合征患者中的诊断价值

目的研究抗磷脂酰丝氨酸-凝血酶原复合物抗体(aPS/PT)在血清阴性抗磷脂综合征(SN-APS)患者中的诊断价值。方法入选2023年4月至2023年9月来河南省人民医院就诊患者,将研究对象分为健康对照组、抗磷脂综合征(APS)组和SN-APS组,采用磁微粒化学发光法检测标准抗磷脂抗体和aPS/PT,计算各抗磷脂抗体百分位值并评估aPS/PT诊断价值。结果aCL和aβ2GP I-IgA/IgM/IgG的P99分别为5.52、19.81、20.22 IU/mL和21.16、25.38、19.30 IU/mL,P97.5分别为4.77、18.89、16.35 IU/mL和20.20、16.90、18.18 IU/mL,P95分别为3.22、14.99、8.61 IU/mL和7.49、5.04、6.95 IU/mL。aPS/PT-IgM/IgG的P99分别为19.72、20.96 IU/mL,aPS/PT-IgM/IgG的P97.5分别为18.84、20.7 IU/mL,aPS/PT-IgM/IgG的P95分别为18.36、17.24 IU/mL。SN-APS组的aPS/PT-IgM水平高于健康对照组,以17.26 IU/mL为截断值时,诊断敏感性为29.73%,特异性为93.33%。结论本研究建立了实验室内部标准抗磷脂抗体和aPS/PT的参考区间,并发现aPS/PT-IgM对SN-APS患者有一定的诊断价值。

重组人骨形态发生蛋白-2抗体的制备及纯化

骨形态发生蛋白-2是骨科研究领域的重要生物蛋白。用重组人骨形态发生蛋白-2(rhBMP2)与BSA连接成复合物作为免疫原,免疫家兔制备出多克隆抗血清。分别用免疫沉淀法和Sepharose4B-BSA反向免疫亲和吸附法去除抗血清中载体BSA抗体。用盐析法和蛋白层析法纯化出抗rhBMP2抗体。研究发现,家兔产生高效价抗体的最佳时间为14-16周,从rhBMP2抗体的特异性、相对纯度及回收率综合分析,免疫沉淀法去除BSA抗体优于反相亲和吸附法。

HBV特异性免疫复合物和乙型肝炎发病的关系

乙型肝炎病毒(HBV)特异性免疫复合物在乙型肝炎的发病机制中起了一定的作用。免疫复合物的形成与抗原、抗体的数量、比例、种类、大小及抗体亲和力等因素有关,并通过激活宿主的体液和细胞免疫发挥作用,对机体既有有利的一面,又有有害的一面。本文就HBV特异性免疫复合物和乙型肝炎发病的关系作了综述。

抗亲和素鼠单克隆抗体增强亲和素-生物素免疫技术和免疫组织学染色的敏感性

亲和素、生物素已应用于增加传统免疫酶方法的敏感性。但有时发现在检测微量抗原时，敏感性依然不够。为此，作者建立了几株抗卵清和素糖蛋白的鼠单抗，通过选择性扩大ABC复合物，增加底物信号，增强亲和素一生物素免疫测定法的敏感性。

基于核酸分子杂交的免疫芯片抗体固定新方法

基于核酸分子杂交原理构建了一种新型抗体固定方法。先将抗体与寡核苷酸单链交联,再将两者的复合物与固相载体表面上的互补寡核苷酸链结合,从而将抗体固定到载体的表面。在磁珠表面对该固定方法进行实验,证明了方法的可行性。以本方法构建了针对转基因Bt Cry1Ac蛋白的免疫芯片,用Cy3标记二抗对其探针固定效果进行分析,并且在芯片上对Bt Cry1Ac蛋白进行梯度浓度检测试验。结果表明,以本方法构建的抗体芯片,探针分布具有良好的特异性;探针层分布均匀,非特异吸附小;检测灵敏度达到0.01～0.05!g/L;此外,通过杂交核酸双链的解离成功实现了芯片的再生,有助于解决传统抗体固定方法中芯片不可再生的问题。

胶乳微球与抗体蛋白相互作用机理的荧光光谱法分析

利用共价偶联的方法制备了胶乳-抗体蛋白复合物,并采用荧光光谱法对复合物的性质进行了研究,以揭示胶乳微球与抗体蛋白之间的相互作用机理。内源荧光光谱分析结果表明,共价偶联后,抗体蛋白的最大发射峰发生显著蓝移,最大发射峰强度显著降低,抗体蛋白的三级结构发生了一定的变化,胶乳微球与抗体蛋白之间的相互作用对抗体蛋白的内源荧光有显著的猝灭作用,猝灭效果随着偶联体系pH值以及胶乳浓度的增加而增强,猝灭机制为静态猝灭。外源荧光光谱分析结果表明,共价偶联后抗体蛋白的最大发射峰强度显著增强,且随着偶联体系pH值的升高,抗体蛋白的疏水性显著降低,随着胶乳浓度的增加,疏水性逐渐升高。