抗冻型人造土冻融适应性及其在边坡植被修复中的应用

[目的]探究抗冻型人造土冻融适应性及其在高寒地区边坡植被修复中的实践效果,为高寒地区边坡植被修复工程应用提供理论依据和应用支撑。[方法]采用室内冻融循环试验剖判人造土在冻融循环60次期间的理化性质变化特征,结合主成分分析确定室外试验监测指标的选取,现场取样监测了近4 a人造土在西藏高寒地区岩质边坡的工程应用及其植被修复效果,并与当地天然土作对照分析。[结果]与天然土相比,抗冻型人造土的抗冻稳定性和肥力均有显著提升(p<0.05),具体表现在其冻融前后的相对动弹性模量、>0.25 mm水稳性大团聚体含量、平均重量直径(MWD)、团聚度及有机质、铵态氮、硝态氮、速效磷和速效钾含量显著提升,而质量损失率和结构破坏率显著降低(p<0.05)。主成分分析显示,室内试验指标中的相对动弹性模量、结构破坏率、pH值和有机质含量与主成分因子的相关性较高,因此在室外试验中监测这4个指标和植被修复情况。室外监测中发现抗冻型人造土4 a内在不同时间段上的结构破坏率均更低,相对动弹性模量和有机质含量更高;其边坡植被修复后的植被覆盖率、物种多样性、地上和地下生物量均更佳。[结论]抗冻型人造土在高寒地区应用时的植被修复效果更佳,特别是其抗冻耐久性、团聚体稳定性和肥力表现突出,均优于天然土,因此其更适宜于边坡植被修复应用。

抗冻型JYC降失水剂的室内研究与应用

为了解决高寒地区冬季固井施工中液体降失水剂易结冰的问题,在聚乙烯醇交联反应中通过引入冰点降低剂并控制交联反应的交联度,合成了在低温下具有适度流动性和良好降失水性能的JYC降失水剂。通过室内试验对JYC降失水剂的抗冻性能、JYC降失水剂加量对水泥浆性能的影响及海水对JYC水泥浆性能的影响进行了评价,结果表明:JYC降失水剂可以在-20℃的环境下使用;随着JYC降失水剂加量的增加,水泥浆的失水量逐渐降低,但其加量超过8%时,失水量的降低幅度很小;随着JYC降失水剂加量的增加,水泥浆的稠度略微增大,稠化时间稍有延长,但对其抗压强度无不良影响;采用海水和部分海水配浆,JYC水泥浆的失水量会增大,但仍小于50mL,水泥浆会增稠,其抗压强度有一定提高。在吉林松南区块的应用表明,JYC降失水剂不但解决了高寒地区冬季固井施工中液体降失水剂易结冰的问题,而且固井质量也得到了提高。

抗冻型“石膏板脱膜剂”的制备

本文通过实行对比 ,进一步探索了用棕榈油制备抗冻型石膏板脱膜剂的配比和工艺条件 。

抗冻型无碱液体速凝剂的制备及性能评价

采用1,5-戊基磺酸内酯、戊基丙烯酰氧乙基二甲基胺、聚乙二醇醚、对苯二酚、丙烯酰胺、过硫酸铵和乙二醛,通过聚合、共聚和交联反应制备具有抗冻功能的稳定剂,再将上述稳定剂与硫酸铝、氟硅酸镁、二乙醇胺和磷酸混合,通过有机-无机化合反应,合成一种稳定性良好的抗冻型无碱液体速凝剂(KDSNJ-1),并对其性能进行测试。结果表明,当KDSNJ-1折固掺量为3.9%时,基准水泥净浆的凝结时间和砂浆强度均符合GB/T 35159—2017《喷射混凝土用速凝剂》要求,并且与水泥的适应性较好;低温下KDSNJ-1具有较好的抗冻性,且储存稳定期较长。

抗冻型茶树短穗扦插育苗技术

介绍抗冻型茶树短穗扦插育苗技术,包括苗床地选择和整理、剪穗母树选择与处理、插穗剪取与处理、扦插时间与方法、茶园苗圃管理等方面内容,以期为抗冻型茶树短穗扦插育苗提供参考。

抗冻型商品砼在水工建物中的应用情况

近年来,水工建筑物的质量标准要求越来越高,商品砼成为建筑施工强制要求的施工原材料,因而其质量会对水工建筑物的质量产生直接影响。下文结合界圩河闸案例,对抗冻型商品砼的施工及质量管理措施进行探究,以供参考。

新型抗冻太阳能冷管的试验研究

根据固体吸附制冷原理,利用太阳光作为热源,采用活性炭-甲醇作为工质对,首次研制成了抗冻型太阳能冷管,该冷管制冷温度可以达到-5℃以下,单支抗冻型太阳能冷管制冷量可以达到100 kJ,制冷系数COP达到0.11.

大黄鱼类Ⅳ型抗冻蛋白基因的克隆、表达及功能研究

目的研究大黄鱼类Ⅳ型抗冻蛋白基因编码产物的功能。方法从大黄鱼肝脏SSHcDNA文库筛选到的类似极地鱼类Ⅳ型抗冻蛋白的EST序列出发,用RACE方法克隆Ⅳ型抗冻蛋白基因全长cDNA,RT-PCR分析此基因在大黄鱼不同组织内的表达。构建原核表达载体pGEX-4T-Lycafp并表达蛋白质,亲和层析纯化GST融合蛋白,分析它的体外细菌抗冻保护作用。结果大黄鱼类Ⅳ型抗冻蛋白基因cDNA全长664bp,包含372bp开放阅读框,编码124个氨基酸,经SignalP3.0软件预测其N端前20位氨基酸为信号肽,氨基酸序列与长角杜夫鱼Ⅳ型抗冻蛋白同源性高达52%;RT-PCR分析表明其mRNA仅在肝脏表达;重组蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达,初步纯化后分析体外细菌抗冻保护作用表明,融合蛋白抗冻活性并不明显。结论大黄鱼类Ⅳ型抗冻蛋白不具有显著的抗冻活性,这与大黄鱼不能在低温下生存吻合。

冬蝶鱼皮肤型抗冻蛋白的克隆及表达

冬蝶鱼皮肤型抗冻蛋白（ｗ ｆｓ Ａ Ｆ Ｐ）的克隆和表达，是研究抗冻蛋白抗冻机制的重要步骤之一，有助于揭示抗冻蛋白分子结构与活力的关系．用 Ｐ Ｃ Ｒ 法获得 ｗ ｆｓ Ａ Ｆ Ｐ 基因片段，构建了分泌型表达载体 Ｐｌａｃ Ｉ Ｑｐａｒ８ｗ ｆｓ Ａ Ｆ Ｐ．用 Ｗ ｅｓｔｅｒｎ Ｂｌｏｔ 法测其表达水平，氨基酸组成分析及质谱分析证明表达的蛋白与天然蛋白完全一致，并具有天然蛋白相同的活力．

鱼类Ⅱ型抗冻蛋白-冰-水复合体系的理论模拟研究

对鱼类Ⅱ型抗冻蛋白冰晶组成的复合体系在真空条件下进行理论模拟计算的基础上,构建出鱼类Ⅱ型抗冻蛋白冰溶剂(水)的三元复合体系.经过350 ps的动态模拟,研究了溶剂化效应对蛋白冰相互作用体系的影响.通过分子力学及半经验量子力学的计算,进一步研究蛋白与冰晶的相互作用性质,结果表明溶剂化效应具有不容被忽视的重要作用.

南极鱼Ⅲ型抗冻基因真核表达质粒的构建及其细胞表达

为了探讨多聚AFPⅢ的作用机制,从南极鱼Lycodichthys dearborni的多聚三型抗冻蛋白基因LD12 c DNA中克隆得到AFPⅢ的四聚体,命名为LD4,并构建真核表达质粒Tol2-actin-LD4-2A-EGFP。将表达质粒转染到斑马鱼细胞系ZF4中,发现LD4可以在ZF4中大量表达并且能够减少斑马鱼细胞在低温胁迫下的死亡率。通过对不同处理温度(28、18、10℃)下的WT、EGFP和LD4细胞进行转录组测序分析,找出26个表达差异转录因子,其中I3MB13、ZNF687b等表达上调,JUN、Cremb等表达下调,并且通过荧光定量PCR的验证。通过KEGG pathway分析发现,这些差异性基因主要参与细胞凋亡、细胞周期、增殖等调节通路。采用Annexin V-PE/7-AAD双染色法对3种不同温度下的WT、EGFP和LD4细胞进行细胞凋亡检测,结果显示,LD4在低温下与对照组相比凋亡率没有显著差异,说明LD4可能是通过其他通路而不是通过抑制细胞凋亡来抵御低温胁迫,这为LD4作用机制的进一步研究提供了理论基础。

南极eelpout(Lycodichthys dearborni)多聚体Ⅲ型抗冻蛋白基因的克隆及进化分析

冰冻海洋中生存的南极eelpout(Lycodichthysdearborni)体内能合成高浓度的Ⅲ型抗冻蛋白(AFPⅢ)。为了寻找新的AFPⅢ基因,构建了L.dearborni肝脏cDNA文库。通过斑点杂交筛选此文库,发现一个2.87kb 的cDNA克隆,LD12。序列分析采用DNAssist2.0和ClustalX1.8软件。结果显示,LD12分子由12个串联重复的片段构成,每一个片段编码一个61个氨基酸(aa)的Ⅲ型抗冻蛋白分子和一个9aa的连接子。这是第一次在合成AFPⅢ的极地鱼类中发现这样的多聚蛋白结构基因。有趣的是,组成、结构和起源都不相同的抗冻糖蛋白AF GP,其基因也呈现类似的多聚蛋白结构的现象。因此,这种独特的多聚基因结构可能是鱼类基因组在适应极端寒冷的环境中采取的一种普遍方式。

中国喀斯特高原山地区抗冻耐旱型植被退化现状及恢复对策

文中提出抗冻耐旱型植被退化特征为次生林比例大、林分结构缺失及缺陷、种间竞争激烈且优势树种功能未充分发挥、树种选育缺乏适应性评价,恢复策略包括恢复生态经济型植被、调整林分树种组成与密度、修复水平与垂直层次的结构缺陷、合理划分功能区以实行分区保护和改变农村能源结构。喀斯特高原山地区抗冻耐旱型植被恢复的基础研究工作尚处于起步阶段。为提高抗冻耐旱型植被的适应与恢复能力,未来需要加强植被适应性修复、树种选择与配置以及水肥管理与土壤培肥改良3个科学问题与关键技术的研究。

大西洋鲑鱼Ⅳ型抗冻蛋白的表达与纯化

[目的]构建Ⅳ型抗冻蛋白(AFPⅣ)大肠杆菌表达系统,纯化诱导表达的可溶性AFPⅣ,并进行质谱鉴定。[方法]构建pET22b-His6-AFPⅣ重组质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3),并优化IPTG诱导条件,通过亲和层析进行分离纯化,收集样品并冻干保存,对Ⅳ型抗冻蛋白样品进行质谱(MALDI-TOF-TOF)鉴定。[结果]构建了pET22b-His6-AFPⅣ重组质粒,IPTG诱导表达产生可溶性AFPⅣ,且最佳诱导浓度为0.2 mmol/L,诱导时间4h,纯化后AFPⅣ浓度为136μg/ml。[结论]成功构建了AFPⅣ原核表达系统,优化了IPTG诱导条件,重组AFPⅣ得到纯化,并获得冻干样品5 mg,经质谱鉴定确认为AFPⅣ。

投喂人工配合饲料对大口黑鲈ISP-Ⅱ基因表达的影响

为了深入分析抗冻蛋白基因ISP-Ⅱ在鱼类抗逆生理过程中的作用,探究人工配合饲料对大口黑鲈生理变化和基因表达水平的影响,本研究克隆并分析了大口黑鲈ISP-ⅡcDNA序列,同时分别用冰鲜鱼和人工配合饲料投喂大口黑鲈,利用荧光定量PCR(qRT-PCR)的方法分析两组鱼ISP-ⅡmRNA在组织中的表达量。结果获得大口黑鲈ISP-Ⅱc DNA序列838 bp,其中开放阅读框为522 bp,编码的蛋白共173个氨基酸;氨基酸序列分析结果表明,ISP蛋白具有保守的C型凝集素结构域,四对二硫键,推测为C型凝集素进化而来的Ca2+依赖亚型抗冻蛋白。其氨基酸序列与其它物种ISP-Ⅱ序列同源性较低,其中与深裂眶锯雀鲷(Stegastes partitus)同源性最高,仅为65.50%。qRT-PCR结果表明,在对照组大口黑鲈(喂食冰鲜鱼组)组织中ISP-ⅡmRNA在脾中表达最高,并在肝、肠、幽门垂、胃、脑、性腺、心脏、肾脏、肌肉、眼和鳃组织中均有表达。在检测实验组大口黑鲈(喂人工配合饲料组)组织中检测到ISP-ⅡmRNA在肝、肠、胃和肌肉的表达量显著较冰鲜鱼组高。上述结果表明,人工配合饲料能让肉食性的大口黑鲈产生类似冰冻的条件下的应激反应,上调了ISP-Ⅱ的表达,以应对不利环境、保护生物体,使机体适应不利因素。本研究为进一步研究大口黑鲈的食性驯化机制与ISP-Ⅱ在体内的功能提供了科学依据。