NMF308^(nmf/nmf)小鼠耳蜗毛细胞凋亡方式及z-VAD-FMK对毛细胞的保护作用

目的了解年龄相关性听力损失小鼠耳蜗毛细胞的凋亡方式,探讨半胱氨酸蛋白酶(caspase)抑制剂z-VAD-FMK[z-Val-Ala-Asp(Ome)-fluoromethylketone]防治老年性聋的效果。方法选用新生NMF308nmf/nmf小鼠14只和成年同窝NMF308nmf/nmf小鼠32只,分为新生小鼠腹腔注射组(14只)、成年小鼠腹腔注射组(14只)和成年小鼠圆窗膜注射组(18只),各组又分为治疗组(注射z-VAD-FMK)和对照组[注射二甲基亚枫(dimethylsulfoxide,DMSO)],采用圆窗膜局部和腹腔注射两种方法给药,给药前后行ABR检测,用免疫荧光染色化学技术TUNEL、caspase-3和PI(碘化丙啶)染色标记耳蜗毛细胞,观察各组耳蜗毛细胞的凋亡和存活状况。结果NMF308nmf/nmf小鼠从1月龄开始发生听力减退和毛细胞功能改变,到2月龄时,caspase-3激活表达的毛细胞凋亡现象是毛细胞凋亡出现的最早表现;TUNEL阳性标记特征稍晚出现;PI标记可见毛细胞细胞核固缩和碎片出现的时间从2月龄开始;到3月龄时该种小鼠听力基本丧失,耳蜗毛细胞严重缺失;而应用z-VAD-FMK治疗后,各治疗组小鼠ABR反应阈明显好于对照组;耳蜗毛细胞凋亡数目较对照组减少,存活数明显较对照组多,尤以圆窗膜注射组明显。结论 NMF308nmf/nmf小鼠耳蜗毛细胞的死亡方式以caspase-3凋亡途径为主,应用caspase-3抑制剂zVAD-FMK定向内耳给药,可以阻断caspase-3信号途径激活所导致的毛细胞凋亡,从而有效防治老年性聋。

BCL-2家族凋亡调控作用及其介导的抗肿瘤药物治疗后耐药的研究进展

细胞凋亡是调节细胞增殖繁衍、维持机体稳态的重要手段。近年研究表明B细胞淋巴瘤-2(B-cell lymphoma-2,BCL-2)家族不仅是正常细胞凋亡程序调控的主导者,也是由凋亡逃逸方式介导的肿瘤发生、进展及后续药物治疗耐药性形成的主要参与者。BCL-2家族拮抗肿瘤药物诱导的细胞凋亡效应进而产生耐药性的现象已经在血液淋巴系统肿瘤、乳腺癌、肺癌、胃癌等疾病的临床治疗中被报道。随着研究的深入,针对BCL-2家族中发挥抗凋亡功能成员的特异性抑制剂也应运而生。本文系统地阐述了BCL-2家族介导的凋亡调控作用及其引起的肿瘤药物治疗耐药现象,同时总结BCL-2家族抑制剂最新研究进展,为解决未来肿瘤治疗抵抗、寻找治疗新靶点提供新思路。