兔源抗凋亡蛋白Bcl-2的表达、抗体的制备及初步应用

为了原核表达兔源抗凋亡蛋白Bcl-2,并诱导表达纯化该蛋白后制备多抗,采用RT-PCR扩增Bcl-2编码序列,并将该序列克隆至pET-32a(+)载体,获得重组pET-32a-Bcl-2质粒转化BL21(DE3),筛选最佳表达条件,通过亲和层析纯化目的蛋白质,最后经Western blot鉴定后免疫小鼠。结果显示,成功扩增Bcl-2编码序列并构建了pET-32a-Bcl-2表达载体;SDS-PAGE结果显示,在16℃,5 h,0.5 mmol/L IPTG的表达条件下,重组蛋白Bcl-2能够高效可溶性表达;Western blot结果表明纯化后的表达产物为高纯度的Bcl-2重组蛋白,将该蛋白质免疫小鼠后获得了特异性抗体,该抗体能够特异性识别重组Bcl-2蛋白,并应用该抗体鉴定RK13-B细胞中Bcl-2蛋白的过表达。

胎膜早破与抗凋亡蛋白Bcl-2表达的研究

目的探讨胎膜早破与抗凋亡蛋白Bcl-2表达之间的关系。方法选择2003年6月～2004年5月在该院住院分娩的足月妊娠胎膜早破孕妇24例(胎膜早破组),另选择同期妊娠足月无胎膜早破的孕妇24例(非胎膜早破组)。全部病例均于自然分娩后立即取胎膜破裂处的胎膜组织5cm×5cm大小,同时胎膜早破组除在上述部位取胎膜组织外,另在距胎膜破口处10cm以上的部位再取同样大小的胎膜组织。全部胎膜组织经石蜡包埋切片后采用免疫组织化学方法进行抗凋亡蛋白Bcl-2表达的测定。结果在两组病例的胎膜组织均可见到Bcl-2的表达;在胎膜早破组的胎膜组织中Bcl-2表达的阳性单位为(9.55±0.24),而非胎膜早破组为(21.37±0.32),两者比较P<0.01,有统计学意义;而在胎膜早破组非破口部位胎膜组织中Bcl-2表达的阳性单位为(9.66±0.19),破口部位Bcl-2表达的阳性单位为(9.55±0.24),两组比较P>0.05,无统计学意义。结论胎膜早破的发生与抗凋亡蛋白Bcl-2表达的减弱相关。

抗凋亡蛋白Bcl-2在非霍奇金淋巴瘤中的表达及其临床意义

目的:通过抗凋亡蛋白Bcl-2的检测,观察其在非霍奇金淋巴瘤（NHL）中的表达及临床意义。方法:用免疫组织化学染色的方法,对34例NHL外检石蜡包埋组织切片进行Bcl-2蛋白的检测。结果:（1）低度恶性NHL中Bcl-2表达高于高度恶性组（P<0.005）;（2）B细胞性NHL中Bcl-2的表达高于T细胞性NHL（P<0.025）;（3）首次化疗缓解组中的Bcl-2表达低于未缓解组（P<0.01）;（4）高Bcl-2表达组的生存期与低表达组之间无差异。结论:抗凋亡蛋白Bcl-2的表达与NHL恶性程度及化疗缓解率相关,可能成为NHL预后的判断指标。

卷曲螺旋结构域蛋白2通过促进线粒体自噬抑制帕金森病SH-SY5Y细胞凋亡

背景:卷曲螺旋结构域蛋白2(coiled-coil-helix-coiled-coil-helix domain-containing 2,CHCHD2)能否调控PINK1/Parkin介导的线粒体自噬在帕金森病中发挥神经保护作用尚未可知。目的:探讨CHCHD2在6-羟基多巴胺诱导的帕金森病细胞模型中对PINK1/Parkin信号通路介导的线粒体自噬发挥的作用及机制。方法:利用重组质粒转染技术过表达或敲低CHCHD2,用6-羟基多巴胺构建SH-SY5Y细胞帕金森病模型后分对照组、模型组、过表达阴性对照+6-羟基多巴胺组、敲低阴性对照+6-羟基多巴胺组、过表达CHCHD2+6-羟基多巴胺组和敲低CHCHD2+6-羟基多巴胺组。Western blot及RT-qPCR检测CHCHD2的表达;Western blot检测LC3Ⅰ/Ⅱ、p62、MFN1、COXⅣ、DRP1、PINK1、Parkin、TIM23、Bax、Bcl-2及cleavedcaspase3蛋白表达;CCK-8、JC-1和活性氧试剂盒检测细胞活性、线粒体膜电位和活性氧水平,单丹磺酰尸胺染色观察细胞自噬情况,透射电镜观察自噬溶酶体。结果与结论:①与对照组相比,模型组细胞活性、线粒体膜电位及CHCHD2、PINK1、Parkin蛋白表达降低,活性氧水平、凋亡水平及LC3Ⅰ/Ⅱ、p62蛋白表达升高(P<0.05),并观察到自噬溶酶体的存在;②与模型组相比,过表达CHCHD2能降低细胞活性氧水平,升高线粒体膜电位及PINK1、Parkin和MFN1蛋白表达水平,并观察到线粒体自噬溶酶体增多,而敲低CHCHD2后有与上述相反的作用,并伴有COXⅣ、TIM23和p-DRP1蛋白表达的升高(P<0.05);③与模型组相比,过表达CHCHD2能减少细胞凋亡,上调Bcl-2并下调Bax及cleavedcaspase3蛋白的表达,而敲低CHCHD2后有与上述相反的作用(P<0.05);④结果提示,CHCHD2在6-羟基多巴胺诱导的帕金森病细胞模型中可以通过促进PINK1/Parkin介导的线粒体自噬改善线粒体功能从而减轻细胞凋亡发挥神经保护作用。

脑梗死大鼠模型急性期抗凋亡蛋白Bcl-2和热休克蛋白70的动态表达

【目的】观察SD大鼠大脑中动脉闭塞模型(middle cerebral artery occlusion,MCAO)急性期热休克蛋白70(heat shock response 70,Hsp70)和抗凋亡蛋白Bcl-2(B cell lymphoma/leukemia 2)随时间变化的动态表达,探讨其变化的规律,为临床治疗靶点提供实验依据。【方法】选用健康雄性SD大鼠36只,采用完全随机设计方法分为3组,空白对照组(n=4)、假手术组(n=16)、手术组(n=16)。手术组采用改良线栓法建立急性大脑中动脉闭塞模型,术后0.5 h、2 h、3 h、6 h、12 h、24 h、3 d、7 d共8个时相采血。用ELISA法测定Bcl-2和Hsp70的OD值,绘制标准曲线并计算对应的浓度。【结果】(1)Bcl-2的表达:手术组Bcl-2术后6 h显著升高,12 h到达高峰,3 d时下降接近空白对照组水平。手术组与假手术组在6、12、24 h时间点比较差异有统计学意义(P<0.05);手术组与空白对照组在2 h、3 h、6 h、12 h、24 h、3 d、7 d时间点比较差异有统计学意义(P<0.05);手术组内6、12、24 h与其他时间点比较差异有统计学意义(P<0.05)。(2)Hsp70的表达:手术组Hsp70在术后0.5 h就开始表达,24 h达到高峰,3 d时逐渐下降接近对照组水平。手术组内24 h与各时间点内表达水平比较差异有统计学意义(P<0.05)。【结论】Bcl-2和Hsp70在脑梗死急性期均显著升高,参与神经元缺血缺氧的病理过程,在神经细胞损伤早期发挥重要作用。二者的表达水平呈正相关性。

鼻息肉组织嗜酸粒细胞中水通道蛋白-1和抗凋亡基因Bcl-2 mRNA的表达及意义

目的 明确水通道蛋白-1(aquaporin-1,AQP-1)mRNA、抗凋亡基因Bcl-2 mRNA在鼻息肉组织中的表达、分布及其相关性,探讨AQP-1 mRNA在鼻息肉组织嗜酸粒细胞中表达的意义。方法 16例鼻息肉组织标本来源于鼻息肉切除的患者(女11例,男5例,年龄20-65岁);10例下鼻甲黏膜组织来源于有变应性鼻炎病史的鼻整形患者(女7例,男3例,平均年龄16-58岁)。上述标本取组织相邻切片,应用原位杂交方法检测AQP-1 mRNA和Bcl-2 mRNA的表达;以麦格-姬姆萨(May-Griunwald-Giemsa,MGG)染色法鉴别嗜酸粒细胞。结果 16例鼻息肉组织嗜酸粒细胞中均有AQP-1 mRNA和Bcl-2 mRNA表达,其阳性细胞表达率分别为(93.16±13.25)％;(84.74±12.10)％;而10例下鼻甲组织嗜酸粒细胞中均有Bcl-2 mRNA表达,但仅有4例表达AQP-1 mRNA;AQP-1mRNA和Bcl-2 mRNA在下鼻甲组织嗜酸粒细胞中阳性细胞表达率分别为(19.54±4.98)％和(16.45±3.12)％。AQP-1 mRNA与Bcl-2 mRNA在鼻息肉组织嗜酸粒细胞的表达呈明显正相关(r=0.875,P<0.01)。结论 AQP-1能够平衡鼻息肉组织嗜酸粒细胞内外液体渗透压,维持其存活,在嗜酸粒细胞抗凋亡中具有重要的意义。

苦参碱诱导RPMI8226细胞凋亡及其对Bcl-2、增殖细胞核抗原蛋白表达的影响

目的:研究苦参碱是否具有诱导RPMI8226细胞凋亡的生物学活性,探讨苦参碱对RPMI8226细胞Bcl-2及增殖细胞核抗原(PCNA)表达水平的影响及其作用的分子机制。方法:CCK-8法检测一定浓度的苦参碱对RPMI8226细胞的体外增殖抑制作用;AnnexinV/PI双染色法检测细胞凋亡;PI单染色法检测细胞周期改变;同时应用流式细胞术检测Bcl-2及PCNA蛋白表达的变化。结果:苦参碱对RPMI8226细胞生长具有明显的抑制作用,呈量效和时效关系;苦参碱能诱导RPMI8226细胞凋亡,呈量效关系;细胞周期分析,G0/G1期细胞相对增多、S期相对减少、G2/M期无明显变化。苦参碱处理组RPMI8226细胞中Bcl-2及PCNA蛋白的表达跟未加药组相比阳性表达率均降低。结论:苦参碱对RPMI8226细胞生长具有明显抑制作用,其作用主要通过诱导RPMI8226细胞产生细胞周期阻滞和凋亡,降低PCNA的表达。苦参碱诱导RPMI8226细胞凋亡过程中,Bcl-2蛋白表达下调对调控细胞凋亡有重要作用。

抗凋亡蛋白BAG-1在非小细胞肺癌组织中的表达及其与细胞凋亡、Bcl-2蛋白表达的关系

目的研究非小细胞肺癌组织中抗凋亡蛋白BAG-1的表达和临床意义,并探讨其与癌细胞凋亡及Bcl-2蛋白表达的关系。方法采用免疫组织化学SP法和TNUEL法分别检测54例非小细胞肺癌组织中BAG-1、Bcl-2蛋白的表达及其细胞凋亡指数,并检测20例正常支气管黏膜组织中BAG-1蛋白的表达作对照。结果非小细胞肺癌BAG-1蛋白表达阳性率为74.07%,明显高于正常支气管黏膜(阳性率为5%)。其表达与非小细胞肺癌组织分化程度、有无淋巴结转移、TNM分期密切相关,而与性别、年龄、病理类型无关。非小细胞肺癌组织中BAG-1蛋白表达与Bcl-2蛋白表达呈正相关关系(Pearson列联系数为0.406,P<0.01)。随BAG-1蛋白表达强度的增强,癌细胞凋亡指数逐渐减少,各组间有统计学意义。结论BAG-1蛋白在非小细胞肺癌组织中表达显著高于正常肺组织,其表达与非小细胞肺癌发生、发展密切相关,与Bcl-2蛋白表达呈正相关,能抑制癌细胞凋亡,可作为肺癌治疗的新靶点。

大鼠肺泡巨噬细胞Bcl-2相关抗凋亡蛋白-1表达变化及其调节糖皮质激素受体功能的研究

目的:在模拟大鼠肺泡巨噬细胞炎症合并糖皮质激素治疗的条件下,阐明Bcl-2相关抗凋亡蛋白-1(BAG-1)的表达变化及其对糖皮质激素受体(GR)功能的调节作用。方法:Western blot检测脂多糖(LPS)和地塞米松(Dex)作用大鼠肺泡巨噬细胞BAG-1表达变化;免疫共沉淀法检测核蛋白中BAG-1与GR相互结合作用;相对荧光素酶法检测GR转录激活活性。结果:LPS和Dex作用后,细胞总蛋白中BAG-1 L表达增加,BAG-1 S表达无变化;核蛋白中只能检测到BAG-1 L,表达量在LPS作用24 h内逐渐增加;细胞核内BAG-1 L与GR在LPS和Dex作用后存在着相互结合,同时GR转录激活活性逐渐降低,其变化与核蛋白中BAG-1 L表达变化呈负相关。结论:LPS和Dex作用大鼠肺泡巨噬细胞BAG-1 L表达增加,与GR结合后共同转核,并抑制GR活性。该机制可能是感染条件下糖皮质激素抵抗的重要因素。

bcl-2结合抗凋亡蛋白在食管癌中的表达及意义

细胞凋亡和肿瘤发生愈来愈受到人们的关注,认为细胞凋亡缺陷或受阻是肿瘤发生发展的一个重要因素。国内外研究表明bcl-2结合抗凋亡蛋白（BAG-1）是一多功能的抗凋亡蛋白,能够与大量的细胞靶点相互作用来实现其多功能的抗凋亡作用,如作用于Bcl-2、Raf-1和核激素受体等蛋白抑制细胞凋亡,而且通过作用于分子伴侣等多种蛋白分子调节细胞的增生、转录、迁移和运动。

凋亡相关基因产物Fas抗原及bcl-2蛋白在甲状腺肿瘤组织中的表达

目的：了解Ｆａｓ 抗原及ｂｃｌ２ 蛋白在甲状腺肿瘤组织中表达的意义。方法：用流式细胞技术对１４ 例乳头状甲状腺癌，１６例甲状腺腺瘤及３２ 例结节性甲状腺肿组织中Ｆａｓ 抗原和ｂｃｌ２ 蛋白的表达进行检测。结果：上述３ 组织中均测到Ｆａｓ 抗原和ｂｃｌ２ 蛋白。３ 种组织中Ｆａｓ 抗原和ｂｃｌ２ 蛋白表达没有统计学差异（Ｆ＝２．７８，Ｐ＞０．０５；Ｆ＝２．５６，Ｐ＞０．０５）。乳头状甲状腺癌组织Ｆａｓ 抗原表达与ｂｃｌ２ 蛋白表达有明显相关性（ｒ＝０．６４６，Ｐ＜０．０５），其他两种组织中Ｆａｓ 抗原与ｂｃｌ２ 表达均无相关性（ Ｐ＞０－０５）。结论：上述３ 种组织中均有Ｆａｓ 抗原和ｂｃｌ２ 蛋白的表达，均参与了甲状腺肿瘤组织中细胞凋亡的调节。细胞凋亡异常与乳头状甲状腺癌的发生有密切关系。

大鼠隐睾生殖细胞凋亡与总抗氧化能力、bcl-2蛋白表达的关系

目的 探讨总抗氧化能力和 bcl- 2蛋白表达对大鼠隐睾生殖细胞发育、凋亡的影响。方法 SD雄性大鼠 ,日龄2 2天时复制单侧隐睾模型。用生物素 - d UTP/酶标亲和素测定法检测睾丸生殖细胞凋亡 ;用化学比色法测定总抗氧化能力 ;用免疫组织化学 SP法检测 bcl- 2蛋白表达。结果 术后第 7天 ,与对侧正常睾丸相比 ,隐睾侧睾丸的重量显著减轻 (P<0 .0 1) ,其发生凋亡的生殖细胞显著增加 (P<0 .0 1) ,总抗氧化能力降低 (P<0 .0 1) ,bcl- 2蛋白表达降低 (P<0 .0 1)。结论 手术诱导的隐睾生殖细胞凋亡增加 ,且与睾丸组织中总抗氧化能力和 bcl- 2蛋白表达降低有关。

伤肌宁胶囊对抗阿霉素所致心肌细胞凋亡及其相关基因BCL-2 BAX蛋白表达影响

目的:观察含伤肌宁胶囊的大鼠血清(SJNXQ),对阿霉素(ADR)所致心肌细胞凋亡的抑制作用及其对相关基因BCL-2、BAX蛋白表达的影响。方法:血清药理学方法制备"伤肌宁胶囊"含药血清(SJNJN);SD乳鼠心肌细胞做原代培养,复制ADR损伤心肌细胞模型,并运用流式细胞仪检测细胞凋亡及其相关BAX和BCL-2蛋白的表达。结果:心肌细胞给予ADR后,心肌细胞凋亡指数明显升高,BAX蛋白表达升高;BCL-2蛋白表达明显降低。含伤肌宁胶囊的血清,能显著抑制心肌细胞凋亡,降低BAX蛋白表达,提高BCL-2蛋白的表达水平,其效应呈剂量依赖关系。结论:伤肌宁胶囊具有拮抗阿霉素所致心肌细胞凋亡作用,其机制可能与SJNXQ提高BCL-2/BAX比值特性有关。

乳腺癌中抗凋亡基因bcl-2蛋白产物的表达及意义

bcl—2通过抑制细胞凋亡过程，从而导致肿瘤发生。为了检测bcl—2在乳腺癌中的表达情况及与临床病理的关系，应用枸椽酸—ABC——微波免疫组化技术．对87例福尔马林固定，石蜡包埋乳腺癌组织进行bcl—2癌基因蛋白表达的测定。结果显示：bcl—2蛋白在乳腺癌原发灶中的阳性表达率63．22％，其表达与ER、PR状况关系密切（均P＜0．001）；随着肿瘤病理学级别的升高，bcl—2蛋白表达率下降。bcl—2蛋白表达在区域淋巴结无转移组比淋巴结有转移组高（P＜0．001），bcl—2阳性表达率在术后生存期≥5年组比＜5年组高，且较少发生原位复发及脏器转移，差异具有显著性意义（P＜0．001）。提示；bcl—2蛋白参与乳腺癌的发生，并与好的预后因素相联系。

Bcl-2结合抗凋亡基因沉默对缺氧状态下人神经母细胞瘤细胞凋亡及热休克蛋白70表达的影响

目的探讨Bcl-2结合抗凋亡基因（BAG-1）对缺氧／再复氧损伤后人神经母细胞瘤细胞（SH—SY5Y）的保护作用，以及对热休克蛋白70（HSP70）表达的影响。方法取对数生长期的SH—SY5Y细胞，采用慢病毒介导的RNA干扰（RNAi）技术抑制BAG-1表达。将筛选好的细胞分为细胞对照组、慢病毒对照组（仅含荧光蛋白的慢病毒感染组）、BAG-1小干扰RNA（siRNA）组（即BAG-1基因沉默组，感染含BAG-1基因干扰序列及荧光蛋白的慢病毒），根据沉默序列不同分为BAG-1 siRNA—α组、BAG-1 siRNA-β组。感染重组慢病毒后72h采用蛋白质免疫印迹试验（Western Blot）检测SH—SY5Y细胞中BAG-1和HSP70蛋白表达；缺氧处理后采用CCK-8测定各组细胞活性；用流式细胞仪检测细胞凋亡情况；用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应（RT—qPCR）检测各组细胞HSP70转录水平。结果慢病毒感染后72h，Western Blot检测结果表明BAG-1 siRNA—β组干扰效果优于BAG-1 siRNA-α组。各组细胞活性均随缺氧时间延长而呈先增强后减弱的趋势，且于8h时达峰值。经缺氧处理8h后，BAG—1 siRNA—β组细胞活性[吸光度（A）值]明显低于细胞对照组、慢病毒对照组及BAG-1 siRNA-α组（0．59±0．09比0．94±0．12、0．90±0．11、0．91±0．14，均P〈0．01）；BAG—1 siRNA-β组凋亡细胞率明显高于细胞对照组、慢病毒对照组及BAG-1 siRNA-α组[（34．63±3．46）％比（14．83±3．75）％、（19．93±6．49）％、（16．40±1．18）％，均P〈0．01]。BAG-1 siRNA—β组HSP70蛋白及mRNA转录水平与细胞对照组、慢病毒对照组及BAG-1 siRNA-α组比较差异均无统计学意义（均P〉0．05）。结论BAG-1基因在缺氧神经细胞中能够发挥保护作用，减少细胞凋亡，其保护作用可以独立于HSP70基因。

作用于Bcl-2家族抗凋亡亚族蛋白的小分子抑制剂的研究进展

细胞的凋亡是维持机体平衡的重要因素。细胞凋亡由一系列细胞因子调控。Bcl-2蛋白家族是细胞凋亡的关键性调节因子。Bcl-2家族分为抗凋亡和促凋亡两个亚族,他们的相互作用对细胞凋亡信号传导起调控作用。很多肿瘤细胞高表达Bcl-2抗凋亡亚族成员Bcl-2/Bcl-xL。近年来,随着Bcl-2家族各成员的晶体结构相继阐明,人们开始寻找作用于Bcl-2家族抗凋亡亚族蛋白的小分子抑制剂。本文从药物设计角度对该方面的进展作一综述。

胰岛素样生长因子结合蛋白2对高血糖环境诱导人足细胞凋亡的影响及机制研究

背景糖尿病肾病患者日益增加,仍有患者在现有治疗中进展为终末期肾病,因此迫切需要新型治疗靶点。目的探讨胰岛素样生长因子结合蛋白2(insulin like growth factor binding protein 2,IGFBP2)对高血糖环境诱导人足细胞凋亡的影响及机制。方法体外培养的人足细胞随机分为正常血糖(normal glucose,NG)组(5 mmol/L)以及高血糖(high glucose,HG)24 h组、HG 48 h组、HG 72 h组(30 mmol/L)。采用RT-qPCR法检测IGFBP2、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor,TNF-α)和细胞间黏附分子-1(intercellular cell adhesion molecule-1,ICAM-1)mRNA表达水平,Western blot检测IGFBP2和Cleaved Caspase 3蛋白表达水平,以此确定后续实验HG处理的最佳时间点。将IGFBP2小干扰RNA转染进入足细胞并分为NG组、阴性对照干预组(NG-NC-siRNA)、IGFBP2敲低siRNA干预组(NG-IGFBP2-siRNA1、NG-IGFBP2-siRNA2、NG-IGFBP2-siRNA3),RT-qPCR检测IGFBP2 mRNA表达水平,选择敲低效率最高的IGFBP2-siRNA用于后续实验。根据实验内容将足细胞随机分为:(1)NG组和HG组;(2)NG组和NG+125 ng/mL rhIGFBP2组;(3)HG组和HG-IGFBP2-siRNA组。(1)(2)(3)均通过RT-qPCR检测TNF-α和ICAM-1 mRNA表达水平,JC-1染色法检测线粒体膜电位,共聚焦显微镜检测线粒体超氧化物和活性氧荧光强度,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果随HG处理时间增加,RT-qPCR结果显示IGFBP2、TNF-α和ICAM-1 mRNA水平随时间升高,Western blot结果显示IGFBP2和Cleaved Caspase 3蛋白水平随时间升高。与NG组比较,RT-qPCR结果显示IGFBP2、TNF-α和ICAM-1均在HG 72 h时mRNA水平最高(P<0.05),Western blot结果显示IGFBP2在HG 72 h时和Cleaved Caspase 3在HG 48 h时蛋白水平最高(P<0.05),据此选72 h为后续实验诱导时间点。RT-qPCR检测结果显示,与NG组相比,阴性对照干预组mRNA表达无统计学差异(P>0.05),NG-IGFBP2-siRNA2组IGFBP2 mRNA表达水平最低(P<0.05),敲除效率最高,因此选择IGFBP2-siRNA2进行后续实验。与NG组相比较,HG组线粒体膜电位绿/红色荧光强度比值、线粒体超氧化物和活性氧荧光强度以及细胞凋亡率均增强(P<0.05)。与NG组相比较,NG+125 ng/mL rhIGFBP2组的TNF-α和ICAM-1 mRNA水平、线粒体膜电位绿/红色荧光强度比值、线粒体超氧化物和活性氧荧光强度以及细胞凋亡率均升高(P<0.05)。与HG组相比较,HG-IGFBP2-siRNA组的TNF-α和ICAM-1 mRNA表达水平、线粒体膜电位绿/红色荧光强度比值、线粒体超氧化物和活性氧荧光强度以及细胞凋亡率均降低(P<0.05)。结论敲除IGFBP2后通过减弱高血糖处理下的线粒体功能紊乱和氧化应激降低人足细胞凋亡,因此抑制IGFBP2的表达有望成为糖尿病肾病的潜在治疗策略。

从NF-κB/Bcl-2信号通路调控成纤维样滑膜细胞凋亡角度探讨中医药抑制类风湿关节炎滑膜炎症机制的研究进展

类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种以关节滑膜炎症为主要特征的自身免疫性疾病,成纤维样滑膜细胞(fibroblast-like synoviocytes,FLS)的抗凋亡是导致该病病情发展的主要因素。如何促进FLS凋亡并抑制炎症反应是目前RA治疗和研究的重点。核因子κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)/B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)信号通路在RA发病过程中发挥了关键作用,其与FLS炎症倾向、抗凋亡等密切相关。研究并探讨NF-κB/Bcl-2信号通路调控FLS凋亡的机制及作用,介绍中医药靶向该通路促进FLS凋亡进而抑制RA滑膜炎症的研究现状,旨在为中医药治疗RA的研究提供一定基础。

喉癌组织中抗凋亡基因Bcl-2蛋白的表达及临床相关性研究

抗凋亡基因Ｂｃｌ－２的表达可抑制细胞凋亡过程，是导致肿瘤发生的因素之一。采用免疫组化多重ＰＡＰ方法，检测了３５例喉癌及５例喉正常声带组织的Ｂｃｌ－２。Ｂｃｌ－２阳性反应主要位于喉癌细胞中，呈棕黄色细颗粒状。３５例喉癌组织中１３例Ｂｃｌ－２阳性，占３７．１％。５例喉正常声带组织中１例阳性，阳性反应位于间质中。结果提示Ｂｃｌ－２表达阳性组和阴性组术后生存曲线有明显不同，Ｂｃｌ－２表达阳性组比阴性组生存曲线明显下降，死亡危险度峰值提前１～４年出现，Ｂｃｌ－２表达与喉癌术后生存率有关。

扶正抗癌方通过调控Bcl-2家族蛋白促肺癌细胞凋亡

【目的】探讨中药复方扶正抗癌方促非小细胞肺癌(NSCLC)细胞凋亡的机制。【方法】以高效液相色谱(HPLC)法检测扶正抗癌方的稳定性。以人NSCLC细胞株H1650、A549为研究对象,采用流式细胞术检测不同剂量(0、0.5、1.0、1.5 mg/mL)扶正抗癌方处理的H1650、A549细胞的凋亡情况,蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测不同剂量(0、0.5、1.0、1.5 mg/mL)扶正抗癌方处理的H1650、A549细胞中抗凋亡基因Bcl-2、Mcl-1的蛋白表达水平。【结果】扶正抗癌方可明显增加H1650、A549细胞凋亡率,抑制Bcl-2、Mcl-1的蛋白表达水平,均呈剂量依赖性。【结论】扶正抗癌方可通过调控Bcl-2家族蛋白表达促进非小细胞肺癌细胞凋亡。