抗凋亡蛋白survivin研究与癌治疗新策略的进展

survivin是凋亡抑制蛋白家族中的一个新成员,在近乎所有的人类肿瘤中都显示高表达,而在终末分化的正常组织中未能检测出表达。survivin表达的另一个独特性质是,其表达受细胞周期调控,在G2/M期有异常高的特异性表达。survivin的功能意义在于参与细胞凋亡调控和细胞分裂调控。引人兴趣的是,新近癌生物学基础与应用研究则更关注它是一个枢纽癌基因。本文将重点讨论与survivin在细胞死亡和细胞分裂功能相联系的、当前一些新的癌治疗策略的进展。

抗凋亡蛋白Survivin与消化系肿瘤关系的研究进展

生存素(Survivin)是凋亡抑制蛋白家族的一个新成员,在正常成人组织中不表达,但选择性地表达于包括消化系肿瘤在内的多种肿瘤组织中,具有抑制细胞凋亡和调节细胞有丝分裂的双重作用。Survivin参与消化系恶性肿瘤的发生与发展,与肿瘤的预后密切相关,已成为恶性肿瘤的一个重要分子标志和治疗靶点。

抗凋亡蛋白survivin在急性白血病细胞中的表达及临床意义

目的 :观察 survivin在急性白血病患者骨髓细胞中的表达 ,并分析其与预后的关系。方法 :SABC免疫组化法检测survivin在初发急性白血病患者和非肿瘤患者骨髓细胞中的表达 ,分析急性白血病患者阳性表达和阴性表达者间完全缓解率(CR)的差别。结果 :survivin在急性白血病患者骨髓细胞中的表达明显高于正常对照者 (P <0 .0 1) ,且阳性表达患者的完全缓解率低于阴性表达者 (P <0 .0 5 )。结论 :survivin的阳性表达可能是白血病细胞对药物不敏感的原因之一 。

乳腺癌组织中抗凋亡基因survivin、p53和PCNA蛋白的表达及其相关性的探讨

目的 检测乳腺癌组织中生存素 (survivin)、p5 3和PCNA蛋白的表达 ,探讨它们对肿瘤凋亡通路调节的机制 ,进一步了解与凋亡相关的两个蛋白的内在联系。方法 用免疫组织化学法检测 4 0例乳腺癌和 15例乳腺良性肿瘤survivin、p5 3和PCNA蛋白的表达。 结果 乳腺癌组织中survivin、p5 3和PCNA的阳性率分别为90 %、37.5 %和 10 0 %。Survivin的表达在良、恶性乳腺肿瘤间有显著差别 (P =0 .0 0 1)。Survivin基因阳性表达与患者年龄、p5 3蛋白的表达无相关性 (P >0 .0 5 ) ;与肿瘤组织学类型有关 ,预后好的髓样癌和粘液腺癌阳性程度较低 ,而预后差的浸润性小叶癌和浸润性导管癌阳性程度较高 ,两者差异有显著性差别 (P <0 .0 5 )。Survivin的表达与PCNA密切相关 ,表明乳腺癌细胞增殖大于凋亡。结论 抗凋亡基因survivin和增殖细胞核抗原PCNA的高表达、p5 3蛋白的失活抑制了肿瘤的凋亡 ,也预示着肿瘤的预后不佳。

抗凋亡蛋白Survivin表达水平与吲哚美辛诱导胃黏膜损伤关系探讨

目的探讨抗凋亡蛋白Survivin表达水平与吲哚美辛诱导胃黏膜损伤的关系。方法采用免疫印迹法检测吲哚美辛处理后的C57BL/6小鼠胃黏膜组织和大鼠胃黏膜细胞株RGM-1中Survivin蛋白表达水平的变化。结果吲哚美辛处理后的小鼠胃黏膜组织呈现典型的胃溃疡病理形态变化;和对照组相比,经吲哚美辛处理后的小鼠小鼠胃黏膜组织和大鼠胃黏膜细胞株RGM-1中Survivin蛋白表达水平均明显降低。结论抗凋亡蛋白Survivin表达水平降低可能是吲哚美辛诱导的胃黏膜损伤的一种新的机制。

抗凋亡蛋白BCL-XL作为胃癌治疗靶点的可行性研究

我国是胃癌的高发大国,其中进展期胃癌具有治疗效果差、治疗方案少且复发率高的特点。因此寻找新的治疗靶点有助于改善进展期胃癌患者的预后。凋亡逃逸是肿瘤细胞的主要标志之一,通过靶向促存活BCL2家族蛋白直接诱导细胞凋亡是一种很有前途的癌症治疗策略。因此,了解支持癌细胞存活的分子机制可以为潜在的靶向治疗提供分子基础。

乳腺癌患者凋亡抑制蛋白Survivin表达与血清糖类抗原153检测的临床意义

目的探讨乳腺癌患者凋亡抑制蛋白Survivin表达与血清糖类抗原153(CA153)检测的临床意义及二者的关系。方法分别应用免疫组织化学法和化学发光免疫法检测65例乳腺癌中Survivin表达情况与血清CA153的水平,采用SPSS13.0统计软件,Survivin表达与临床病理学指标的关系用χ2检验,Survivin和CA153的关系采用Sperman等级相关性分析。结果乳腺癌患者治疗前血清CA153浓度为(35.6±11.3)U/ml,治疗后为(11.8±3.6)U/ml,差异有统计学意义(t=2.915,P<0.05);乳腺癌Survivin阳性率在不同肿瘤大小、组织学分级和临床分期中差异无统计学意义(P>0.05);Survivin阳性表达患者中腋窝淋巴结转移率为68.0%(24/50),Survivin阴性表达患者腋窝淋巴结转移率为6.7%(1/15),差异有统计学意义(χ2=17.465,P<0.001);乳腺癌患者CA153浓度越高,Survivin表达阳性强度越大,二者呈正相关(r=0.425,P<0.05);Survivin表达阳性强度越大,腋窝淋巴结转移率越高。结论乳腺癌中Survivin、CA153的联合检测可以判断预后,二者升高明显提示患者可能有腋窝淋巴结转移,预示患者预后不良。

Mcl-1基因在阵发性睡眠性血红蛋白尿症异常克隆抗凋亡机制中的作用研究

目的探讨Mcl-1基因异常表达在阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)异常克隆中的抗凋亡作用。方法选取2020年2月至2022年2月在宁德师范学院附属宁德市医院血液科就诊的13例PNH患者为病例组(男7例,女6例,中位年龄27岁),15例健康体检者为对照组(男8例,女7例,中位年龄38岁)。实时荧光定量多聚核苷酸链式反应(RT-PCR)检测PNH异常克隆细胞与正常细胞中Mcl-1基因mRNA的表达水平,然后敲除PNH患者CD59^(-)细胞中Mcl-1基因后检测siRNA-Mcl-1转染前后PNH异常克隆细胞的增殖、凋亡及细胞周期分布等生物学变化。统计学方法采用Fisher确切概率法、独立样本t检验、秩和检验。结果PNH患者CD59^(-)细胞组、CD59^(+)细胞组、对照组的Mcl-1基因mRNA的表达量分别为(2.48±0.25)、(1.61±0.19)、(1.21±0.08),CD59^(-)细胞组高于CD59^(+)细胞组及对照组(P=0.031、0.022),而CD59^(+)细胞组和对照组间比较差异无统计学意义(P=0.126)。同时PNH患者Mcl-1基因mRNA的相对表达量与CD59^(-)克隆细胞数呈正相关(r^(2)=0.523,P=0.012)。PNH患者CD59^(-)细胞转染靶向siRNA-Mcl-1后,Mcl-1 mRNA表达水平明显下降。siRNA-Mcl-1转染组细胞凋亡率高于转染无义序列组(siRNA-scr转染组)和空白对照组[(43.12±16.33)%比(24.07±15.42)%、(21.56±14.85)%],差异均有统计学意义(均P<0.05)。siRNA-Mcl-1转染组G_(0)/G_(1)期细胞比例高于siRNA-scr转染组和空白对照组[(93.16±3.06)%比(91.52±4.01)%、(90.78±3.62)%],而S期细胞比例低于siRNA-scr转染组和空白对照组[(4.96±3.21)%比(6.86±3.87)%、(7.05±3.59)%],差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论siRNA-Mcl-1转染能减弱PNH患者CD59^(-)细胞的增殖,促进凋亡。Mcl-1基因的过表达可能在PNH克隆抗凋亡中起作用。

抗凋亡蛋白Mcl-1、Survivin和Bag-1在肠化、不典型增生和胃癌中的表达及意义

目的研究Mcl-1、Survivin和Bag-1在正常胃粘膜、肠化、不典型增生和胃癌中的表达,为寻找胃癌进展过程中的关键环节及靶向治疗提供方向。方法应用免疫组织化学法(SP法)检测Mcl-1、Survivin、Bag-1在49例胃癌组织(GC)、24例癌旁不典型增生组织(DYS)、19例癌旁肠化组织(IM)、10例正常胃粘膜组织(NGM)中的表达。结果 Mcl-1在NGM、IM、DYS、GC中的阳性率分别为20.0%,21.1%,20.8%,46.9%;Survivin在NGM、IM、DYS、GC中的阳性率分别为10.0%,63.2%,66.7%,69.4%;Bag-1在NGM、IM、DYS、GC中的阳性率分别为10.0%,26.3%,33.3%,53.1%。胃癌中Mcl-1、Survivin的阳性率在有淋巴结转移组明显高于无淋巴结转移组,TNM分期为Ⅲ-Ⅳ期明显高于Ⅰ-Ⅱ期(P<0.05);Survivin、Bag-1的阳性率在低分化组明显高于高分化组(P<0.05)。汇总49例胃癌中Mcl-1、Survivin和Bag-1蛋白的表达情况,其中28例有2种或3种蛋白表达,有淋巴结转移、TNM分期为Ⅲ-Ⅳ期的患者其有2种或3种蛋白共表达的比率(分别为70.0%,72.7%),明显高于无淋巴结转移、TNM分期为Ⅰ-Ⅱ期的患者(分别为36.8%,44.4%),P<0.05。结论 Mcl-1、Survivin可能与胃癌的发展有关,可能是胃癌预后不良的预测因子;Bag-1可能参与胃癌的发生,可能成为胃癌早期诊断的标志物之一。

凋亡抑制蛋白livin在人胃癌中的表达以及和survivin表达的关系

目的:探讨胃癌组织中凋亡抑制蛋白livin表达情况及其与各临床病理因素的关系,以及和凋亡抑制蛋白survivin表达的相关性。方法:采用逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)检测胃癌组织中livinα、livinβ和survivin的mRNA的表达,并用westernblot分析livin和survivin蛋白的表达。结果:40例胃癌组织中livin表达阳性率为47.5%、survivin为60%,而在正常和癌旁组未检出阳性结果;livin的表达与组织分化和淋巴结转移有关,组织分化差,淋巴结转移者livin表达率高(P<0.05);24例survivin阳性样本中有14例livin呈阳性。结论:livin在胃癌组织中表达增高,可作为胃癌的分子标志物,可能成为胃癌治疗的新分子靶点,livin表达和survivin表达在本实验中结果显示没有相关性(P>0.05)。

雌激素受体介导的柚皮苷抗Aβ_(25-35)损伤PC12细胞凋亡作用研究

目的探讨雌激素受体介导的柚皮苷(NG)抗β淀粉样蛋白25-35(Aβ_(25-35))诱导大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤(PC12)细胞的凋亡作用及其与雌激素受体(ER)信号通路的关系。方法实验分为空白组、Aβ_(25-35)组、E2+Aβ_(25-35)组、NG+Aβ_(25-35)组、ICI182780+E2+Aβ_(25-35)组、ICI182780+NG+Aβ_(25-35)组。实验采用Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率;蛋白免疫印迹法(WB)检测细胞Bax、Bcl-2和Caspase-3的表达;RT-qPCR法检测细胞凋亡因子mRNA的表达。结果Annexin V-FITC/PI双染色流式细胞术结果显示,与空白组相比,Aβ_(25-35)组细胞凋亡率升高(P<0.01);与Aβ_(25-35)组相比,NG+Aβ_(25-35)组细胞凋亡率降低(P<0.01);与NG+Aβ_(25-35)组相比,ICI182780+NG+Aβ_(25-35)组细胞凋亡率升高(P<0.01)。WB结果显示,与空白组相比,Aβ_(25-35)组细胞Bax和Caspase-3蛋白表达量升高(P<0.01),Bcl-2则相反(P<0.01);与Aβ_(25-35)组相比,E2+Aβ_(25-35)组Bax和Caspase-3蛋白表达量降低(P<0.01),Bcl-2则相反(P<0.01);雌激素受体介导的NG的作用与E2相似,而ICI182780逆转了NG的作用。RT-qPCR结果显示,NG对细胞Caspase-3、Bax和Bcl-2 mRNA表达的影响与蛋白结果一致。说明NG是通过激活ER信号通路发挥抗凋亡作用,作用与E2一致。结论雌激素受体介导的NG有明显的抗凋亡作用,通过提高Bcl-2的正常表达,降低Bax和Caspase-3的正常表达发挥抗凋亡作用,其抗凋亡作用可能经ER介导。

甘草黄酮诱导肝癌SMMC-7721细胞凋亡及其对相关蛋白survivin表达的影响

目的:探讨甘草黄酮(GF9)对肝癌SMMC-7721细胞凋亡的诱导作用及其机制。方法:采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测GF9对人肝癌细胞SMMC-7721细胞生长的影响,Hoechst染色法和电镜观察GF9诱导细胞凋亡的形态变化,流式细胞仪检测GF9诱导的细胞凋亡率,并通过免疫印迹法检测凋亡相关蛋白survivin和pro-caspase-3表达水平的变化。结果:GF9可抑制SMMC-7721细胞增殖,并呈时间剂量效应;400!mol/LGF9可诱导细胞凋亡,呈时间依赖性;随着GF9作用时间的延长,survivin和pro-caspase-3表达下调。结论:GF9能诱导SMMC-7721细胞凋亡,这可能与GF9能够引起抑制凋亡蛋白survivin的下调有关。

家蝇幼虫抗菌蛋白诱导黑色素瘤A_(375)细胞凋亡的探讨

目的观察家蝇幼虫抗菌蛋白对黑色素瘤A375细胞凋亡的诱导,探讨其抗肿瘤作用机制。方法流式细胞仪测定家蝇幼虫抗菌蛋白对细胞周期和细胞凋亡的影响;HE染色法观察细胞凋亡形态,并测定细胞凋亡指数(AI)。结果在0.10%组A375的G2/M期升高,S期降低。0.50%组G0/G1期、G2/M期和AI/PI(增殖指数)显著增加,S期及PI明显减少。2.50%组S期、PI、AI/PI及细胞凋亡率(Ap)显著增高,G0/G1期大大减少。12.50%组G2/M期、PI、AI/PI及Ap显著增高,G0/G1期和S期明显下降。结论家蝇幼虫抗菌蛋白对黑色素瘤A375细胞有明显的抑杀作用;家蝇幼虫抗菌物质可能系通过细胞周期阻滞以及诱导细胞凋亡而抑制黑色素瘤A375细胞生长。

凋亡抑制蛋白survivin在乳腺癌中的表达及意义

目的:检测凋亡抑制蛋白survivin在人乳腺癌中的表达,进一步探讨其在乳腺癌发生发展中的作用。方法:采用免疫组织化学和蛋白印迹技术,研究5 4例乳腺癌组织(其中有腋窝淋巴结转移的33例)及15例乳腺纤维腺瘤组织中survivin蛋白的表达。结果:5 4例乳腺癌组织中survivin蛋白的阳性表达率为72 .5 % ,明显高于癌旁正常组织及乳腺纤腺瘤组织,(P<0 .0 5 ) ;有腋窝淋巴结转移组的乳腺癌中其表达率明显高于无腋窝淋巴结转移组(P<0 .0 5 ) ;乳腺癌组织中survivin蛋白的表达与组织学分级、临床病理分期及淋巴结转移密切相关(P<0 .0 5 )。在癌旁组织及乳腺纤维腺瘤中未检测到survivin蛋白。结论:乳腺癌组织中survivin表达上调,并参与乳腺癌的发生发展,是诊断乳腺癌和判断其预后的重要参考指标。

组蛋白去乙酰化酶抑制剂MS-275诱导骨髓瘤细胞株U266凋亡过程中Survivin的表达

背景与目的:组蛋白去乙酰化酶抑制剂(histone deacetylase inhibitors,HDACi)是一类具有抗肿瘤活性的新型药物,主要通过诱导细胞凋亡发挥作用。本实验研究HDACi(MS-275)对人骨髓瘤细胞系U266细胞增殖和凋亡的影响及其与Survivin表达的关系。方法:将不同浓度的MS-275作用于U266细胞不同时间后,用台盼蓝拒染法观察药物对细胞活力的影响;通过瑞氏-姬姆萨染色观察药物作用后细胞形态学的变化;用流式细胞仪分析细胞周期;用Western blot检测Survivin、P21和Cdk4等的蛋白表达,以及凋亡信号通路中Caspase-3活化及蛋白聚ADP核糖聚合酶[poly(ADP-ribose)polymerase,PARP]的裂解情况。结果:MS-275呈时间和剂量依赖性抑制U266细胞增殖,阻断细胞周期于G0/G1期。MS-275作用U266细胞48h时的IC50为1.39μmol/L;2μmol/L的MS-275作用U266细胞24h后,G0/G1期细胞占66.39%,36h后G0/G1期细胞占89.80%。瑞氏-姬姆萨染色显示细胞形态发生明显变化。Western blot检测结果显示,MS-275作用U266细胞后,Survivin和Cdk4表达下降,P21表达增加,Caspase3被裂解活化,其底物蛋白PARP发生剪切。结论:MS-275抑制人多发性骨髓瘤细胞系U266增殖并诱导细胞凋亡,可能与下调Survivin蛋白的表达有关。

凋亡抑制蛋白Survivin及Bcl-2在中耳胆脂瘤上皮中的表达及意义

目的研究凋亡抑制蛋白Survivin及Bcl-2在中耳胆脂瘤上皮中的表达及相互关系,探讨其表达对胆脂瘤增殖能力的影响。方法运用免疫组织化学SP法检测21例胆脂瘤标本及11例外耳道骨部正常皮肤组织中Survivin、Bcl-2的表达。结果Survivin、Bcl-2在胆脂瘤上皮的表达与正常外耳道皮肤上皮比较,不仅范围广,基底上层也有表达,而且表达水平显著增高,两者比较有统计学意义(P<0.01)。胆脂瘤上皮中Survivin表达指数与Bcl-2表达指数呈正相关(r=0.553,P<0.01)。结论凋亡抑制蛋白Survivin,Bcl-2在中耳胆脂瘤的异常表达可能在胆脂瘤的发生、发展过程中起重要作用,它们可能参与胆脂瘤上皮的凋亡调控过程,因此适当控制Survivin,Bcl-2的表达可能会更有效地控制中耳胆脂瘤的发展。

凋亡抑制蛋白Survivin在原发性肝细胞癌中的表达及其意义

目的:通过研究凋亡抑制蛋白Survivin在原发性肝细胞癌(HCC)中的表达情况及其与临床病理特征之间的关系,探讨Survivin在HCC发生、发展中的作用。方法:采用流式细胞术(FCM)及免疫组化(SP)法对30例肝癌组织、20例癌旁组织及10例正常肝组织中的Survivin蛋白进行定量检测,并结合临床资料进行分析。结果:①Survivin在HCC组织中的表达率显著高于癌旁组织及正常肝组织(P<0.05);②Survivin蛋白在癌旁正常组织中无表达;③Survivin蛋白的表达与肿瘤的大小、部位、包膜、AFP无关联(P>0.05),而与镜下门静脉癌栓形成有关联(P<0.05)。结论:Survivin基因蛋白在HCC组织中过表达是反应HCC生物学行为的有效指标,Survivin基因蛋白表达的特异性有望成为HCC基因诊断与治疗的靶点。

凋亡抑制蛋白Survivin、bcl-2在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的:探讨凋亡抑制蛋白Survivin、bcl-2蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达与不同临床病理特征的关系及二者在肺癌发生过程中可能存在的相关性。方法:采用免疫组化法的链霉菌抗生物素过氧化酶(S-P)法检测80例NSCLC组织和20例正常肺组织中Survivin、bcl-2蛋白表达情况。结果:非小细胞肺癌组织中Survivin、bcl-2蛋白阳性表达率分别为61.3%、50%,而在肺良性病变组织中阳性表达率分别为0%、10%,两者在两组中的表达均有显著性差异(P<0.05);Survivin蛋白在～期肺癌组织中阳性表达率72.0%显著高于I～II期肺癌组织的43.3%(P<0.05),bcl-2蛋白在鳞癌组的阳性表达率62.2%高于腺癌组的34.3%(P<0.05);Survivin、bcl-2蛋白在肺癌组织中的表达呈正相关关系。结论:Survivin蛋白表达与肺癌的TNM分期密切相关,Survivin、bcl-2可以作为判断病情和评价预后的指标。

EGCG诱导前列腺癌细胞PC-3凋亡及对Survivin蛋白表达的影响

目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocat-echin-3-gallate,EGCG)对人前列腺癌细胞PC-3凋亡及对其Survivin蛋白表达的影响。方法使用不同浓度的EGCG(0、20、40、80μg/mL)处理前列腺癌细胞株PC-3,通过细胞增殖曲线实验检测EGCG对PC-3细胞增殖的影响;流式细胞仪检测不同浓度EGCG处理PC-3细胞48h后对细胞周期及凋亡的影响;用RT-PCR法检测各浓度EGCG作用48h后PC-3细胞中Survivin基因的表达差异,使用Western blot进行确认。结果 EGCG可以抑制PC-3细胞的增殖并诱导其凋亡,其作用随EGCG浓度的增加而增强(P<0.05);Sur-vivin在PC-3细胞中高表达,EGCG促使PC-3细胞的Survivin表达下调,其表达水平随EGCG浓度的增加而减少(P<0.01)。结论 EGCG能下调PC-3细胞中Survivin蛋白的表达,这可能是EGCG抑制PC-3细胞增殖、诱导其凋亡的关键机制。

大肠癌发生过程中Survivin蛋白的表达及其与凋亡、增殖的关系

目的 探讨凋亡抑制蛋白Survivin在大肠癌发生过程中的作用及其与凋亡、增殖的关系。方法 应用免疫组化技术检测了 15例息肉、12例管状腺瘤、16例绒毛状或混合型腺瘤和 5 2例大肠癌组织中Survivin蛋白的表达以及凋亡指数、增殖指数的变化。结果 Survivin蛋白表达与大肠癌临床病理参数无明显的相关关系 ,Survivin蛋白、增殖指数在大肠腺瘤—癌演变中表达均逐渐增高 ,凋亡指数从管状腺瘤至腺癌表达逐渐降低 ,统计学处理差异均有意义。Survivin蛋白表达与增殖指数呈正相关 (P <0 0 0 1) ,与凋亡指数呈负相关 (P <0 0 0 1)。结论 Survivin在大肠癌发生早期过程中表达上调 ,在大肠癌变过程中起重要作用 ,有望成为大肠癌新的早期诊断标志物。