拮抗凋亡转录因子与乳腺癌遗传易感性的关系

目的通过突变分析,探讨拮抗凋亡转录因子(AATF)与乳腺癌遗传易感性之间可能存在的关联。方法使用构象敏感凝胶电泳(CSGE)和直接测序技术对89例收治的家族性乳腺癌患者完整的AATF基因编码区进行分析。以210例匿名的非癌症患者血样作为对照,对突变频率进行评估。结果共发现7个变异位点,其中6个位于内含子,另外1个为位于外显子的错义突变,对它们在患者和健康对照个体中出现的频率进行比较,未发现致病性倾向。结论本研究89例家族性乳腺癌患者AATF基因的突变分析结果未能提供充分证据表明它们与乳腺癌遗传易感性之间存在关联。

拮抗凋亡转录因子与肿瘤增殖及凋亡

肿瘤是目前临床常见的疾病之一。肿瘤的经典治疗方式主要包括手术切除、放疗和化疗。近年来肿瘤治疗的手段不断发展,但许多进展期的肿瘤仍然未见较有效的治疗方式,因此亟需新的治疗手段。肿瘤细胞的特点是具有无限增殖和抵抗凋亡的能力。因此,鉴定参与肿瘤细胞增殖和凋亡的基因将为肿瘤治疗提供潜在的靶点。拮抗凋亡转录因子(apoptosis-antagonizing transcription factor,AATF),又称Che-1,最早发现能与RNA聚合酶Ⅱ(RNA polymeraseⅡ,polⅡ)的核心亚基hRPB11(human RNA polymeraseⅡ(polⅡ)subunit)和视网膜母细胞瘤易感基因(retinoblastoma susceptibility gene,Rb)相互作用,并抑制Rb的生长抑制功能。现又发现,Che-1能与RNA聚合酶I(RNA polymeraseⅠ,polⅠ)结合,进而促进RNA聚合酶I依赖的转录,影响核糖体合成。在细胞应激下,Che-1的定位、稳定性受到翻译后修饰(post-translational modification,PTM)的调控。在肿瘤细胞应对DNA损伤、凋亡刺激及其他应激时,Che-1通过调控增殖和凋亡相关基因,进而调节肿瘤的发生发展。此外,Che-1的表达存在一个负反馈机制调节。本文拟对Che-1在肿瘤中作用的最新进展作一简要综述。

抗凋亡转录因子在肝细胞肝癌中的表达及预后作用

目的分析抗凋亡转录因子(AATF)在肝细胞肝癌(LIHC)中的表达及意义。方法分别利用基因表达谱交互式分析(GEPIA)和人类蛋白质图谱(HPA)分析AATF mRNA与蛋白在肝细胞肝癌(LIHC)组织及对照组织的差异表达及定位;通过c BioPortal分析AATF在LIHC基因组改变及与AATF相互作用的蛋白质网络;通过Kaplan-M eier Plotter分析AATF对肝癌患者5年生存期及总生存期的影响;通过Tumor Immune Estimation Resource分析AATF与LIHC患者生存期的相关性。结果与对照组织相比,AATF的mRNA(P<0.05)及蛋白表达水平在LIHC组织中显著上调,其蛋白在两种组织的细胞膜及细胞质中均有定位。AATF的基因组改变在LIHC中发生率很低。与AATF相互作用的蛋白有ATM丝氨酸/苏氨酸激酶、检查点激酶2(CHEK2)等,主要参与调控细胞周期、细胞凋亡及转录调控等过程。AATF mRNA表达水平与LIHC患者的预后呈负相关(log-rank P=0.003)。结论 AATF在LIHC组织中高表达,且与患者不良预后相关。

抗凋亡转录因子在机体损伤及肿瘤中的研究进展

抗凋亡转录因子（AATF）作为一种RNA聚合酶Ⅱ结合蛋白,在真核生物进化过程中均高度保守.在机体遭受应激或慢性损伤时,其通过激活监测点激酶对基因转录及细胞周期进行调控,以维持内环境的稳态.同时,AATF通过发挥抗凋亡或抑制细胞增殖作用,在肿瘤发生发展过程中有重要意义.笔者拟就在机体损伤过程中AATF与相关因子或蛋白间的作用机制,以及AATF在肿瘤中的研究进展进行综述如下.

pRP[Exp]-AATF重组质粒构建及其在系膜细胞中的表达

目的构建抗凋亡转录因子(AATF)真核表达质粒,检测其在系膜细胞中的表达,为进一步研究奠定实验基础。方法采用PCR技术,从大鼠的肾小球系膜细胞总RNA中扩增AATF基因编码序列片段,并克隆到pRP[Exp]质粒载体中,之后对重组质粒进行酶切和测序,通过脂质转染法将细胞转染到大鼠系膜细胞中,以未转染的系膜细胞为空白对照组,转染后的为实验组,Western blot检测AATF所编码蛋白的表达水平。结果 PCR扩增产物AATF片段约1 600 bp,与理论相符;构建所得pRP[Exp]-AATF重组质粒,经双酶切琼脂糖凝胶电泳后得到约1 600 bp的条带,与预期结果相符;测序结果与Gen Bank中的大鼠AATF基因序列比对,同源性相符。经RT-qPCR证明,以未转染的系膜细胞中AATF表达水平为标准(1.00±0.00),转染后的实验组中AATF的相对表达量达(12.03±1.87),显著提高,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论成功构建pRP[Exp]-AATF重组质粒,并能在肾小球系膜细胞中正常表达,为后续研究AATF基因的生物学功能、疾病治疗和临床应用奠定了实验基础。