尖吻蝮蛇毒抗凝血因子Ⅱ与活化凝血因子Ⅹ的结合性质

皖南尖吻蝮蛇毒抗凝血因子Ⅱ (ACFⅡ )与活化凝血因子Ⅹ (FⅩa)在钙离子作用下形成了 1∶1的复合物 ,从而延长凝血时间 .这个复合反应是依赖于钙离子的 ,ACFⅡ在没有钙离子存在条件下不能与FⅩa形成复合物 .ACFⅡ是凝血因子Ⅸ或凝血因子Ⅹ结合蛋白家族中一个新发现的成员 ,其相对分子质量为 2 946 8 1.ACFⅡ分子中含有 2 5 1个氨基酸残基 ,其氨基酸组成与这一家族中其他成员十分相似 .ACFⅡ在抗凝血反应中存在一临界浓度 (12nmol/L) ,只有在高于其临界浓度时 。

尖吻蝮蛇毒抗凝血因子Ⅱ的稀土离子荧光探针研究

尖吻蝮蛇毒抗凝血因子 ( ACF )分子中有两个钙离子结合位点 ,钙离子对 ACF 的内源荧光有增强作用 ,稀土离子 ( Nd3 +,Sm3 +,Eu3 +,Gd3 +和 Tb3 +)能取代 ACF 分子中的钙离子 ,并对 ACF 的内源荧光有不同程度的猝灭作用 ,其中 Tb3 +接受 ACF 分子中 Trp残基传递的能量后 ,特征荧光增强 .稀土离子与 ACF 荧光滴定表明 ,ACF 分子中有两个稀土离子结合位点 ,稀土离子和钙离子在 ACF 分子中两个结合部位是共同的竞争结合部位 .ACF 与不同稀土离子之间有相近的表观结合常数 K1 或 K2 .Tb3 +与 RE3 +( RE=Nd,Sm,Eu或 Gd)间线性自由能关系表明 ,稀土离子与 ACF 结合时 ,没有明显的空间效应 .ACF 分子中的两个结合位点在结构上都有较大的柔性 ,这种结构柔性为钙离子在 ACF 与活化凝血因子

钙（Ⅱ）对抗凝血因子Ⅱ与活化凝血因子X结合反应的影响

皖南尖吻蝮蛇毒抗凝血因子Ⅱ（ACFⅡ）不具有酶的活性，通过与活化凝血因子X（FXa）的合成1：1复合物来延长凝血时间。用高效液相色谱方法，发现ACFⅡ与FXa的结合反应依赖于Ca（Ⅱ）浓度，ACFⅡ与FXa的最大结合反应所需要的Ca(Ⅱ)浓度约为1×10^-3mol/L，平衡透析的结果表明，ACFⅡ分子中有两个不同亲和性的Ca（Ⅱ）结合位点，表观结合常数分别为（1．1±0．3）×10^5L/mol和（1．7±0．4）×10^4L/mol,ACFⅡ与2个Ca(Ⅱ）结合所需要的Ca(Ⅱ)浓度也约为1×10^-3mol/L,Ca(Ⅱ)对ACFⅡ的荧光有增强效应，其最大荧光增强所需要的Ca(Ⅱ)浓度也约为1×10^-3mol/L。由此推测ACFⅡ结合上2个Ca(Ⅱ)可能是其与FXa结合的前提条件。

pH值和金属离子对尖吻蝮蛇抗凝血因子Ⅱ二级结构的影响

圆二色谱(CD谱)测量表明,尖吻蝮蛇抗凝血因子Ⅱ(ACFⅡ)与抗凝血因子Ⅰ(ACFⅠ)的二级结构十分相似,它们的主要骨架构象都为反平行β-折叠和α-螺旋结构。pH值对天然ACFⅡ的构象有一定的影响,pH值从3到10增大时,α-螺旋含量逐渐减少,反平行β-折叠含量逐渐增大。钙和其他二价金属离子对ACFⅡ的骨架结构没有明显影响。三价稀土离子使ACFⅡ的α-螺旋含量升高,同时降低其β-转角和β-折叠的含量。

蛇毒中的降压成分研究进展

目前世界上已知的蛇类有3000余种,其中有毒蛇约占20%。蛇毒是一种由蛋白质、多肽等有机和无机小分子组成的复杂混合物,因其具有多种生化和药理活性,能广泛应用于各个领域。研究表明蛇毒对血压有一定影响,其降压机制主要有蛇毒抗凝血因子Ⅱ通过介导NO的释放降低血压,缓激肽增强肽主要通过抑制血管紧张素转换酶和增加内源性缓激肽的作用而发挥作用,利钠肽通过抑制肾素-血管紧张素和醛固酮系统调控血压,而磷脂酶A2主要是促进游离脂肪酸(其中最重要的是花生四烯酸)和溶血磷脂的释放起到降低血压的作用。因此,明确蛇毒的降压成分以及作用机制与效果,对降压药物的开发以及高血压的治疗至关重要。