猪繁殖与呼吸综合征病毒感染对猪肺泡巨噬细胞外源性抗原加工递呈相关分子和共刺激分子的影响

采用定量竞争PCR技术对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染后不同时相猪肺泡巨噬细胞(PAM)中外源性抗原加工递呈相关分子SLA-DRI、i链和SLA-DM分子及共刺激分子CD40、CD80、CD86的mRNA转录动态进行了定量检测。结果表明,PRRSV感染后PAM的SLA-DR mRNA转录水平在3、7和14 d下调,低于对照组;感染后3 d,Ii链、SLA-DM和CD40的mRNA转录水平极显著下调(P<0.01);CD80和CD86mRNA转录水平也在感染后3 d明显下调(P<0.05)。用流式细胞术检测PAM表面的SLA-DR抗原的结果表明,在感染后3 d短暂上升,7 d之后一直低于对照组。由此说明,PRRSV感染早期对猪肺泡巨噬细胞的外源性抗原加工和递呈功能产生显著影响,导致其外源性抗原递呈功能下降,进而影响机体的体液免疫应答。

类猪圆环病毒因子P1感染对猪肺泡巨噬细胞外源性抗原加工递呈相关分子和共刺激分子的影响

采用实时定量PCR技术对类猪圆环病毒因子P1感染猪不同时相猪肺泡巨噬细胞中外源性抗原加工递呈相关分子SLA-DR、SLA-DM和CD74及共刺激分子CD40、CD80和CD86 mRNA的表达进行了检测。结果表明,病毒感染后3 d,上述分子的mRNA表达皆低于对照组相应分子的mRNA表达。其中,CD80 mRNA的表达呈下调趋势(P<0.1),CD40、CD74和SLA-DR的mRNA的表达显著下调(P<0.05);感染后8 d的SLA-DR和SLA-DM以及感染后17 d SLA-DM的mRNA的表达有下调趋势(P<0.1);感染后24 d的CD86 mRNA的表达呈上调趋势(P<0.1);感染后40 d的CD74 mRNA的表达显著下调(P<0.05)。结果揭示,类猪圆环病毒因子P1感染对猪肺泡巨噬细胞的外源性抗原加工和递呈功能有显著影响,导致其外源性抗原递呈功能下降及紊乱,进而使机体的体液免疫应答功能受到影响。

MHC Ⅰ类分子限制性抗原的加工与递呈

MHC分子限制性抗原的加工与递呈是近年基础免疫学研究热点之一。MHCⅠ类分子将加工后的抗原递呈给CD8T淋巴细胞，此路径的抗原加工与递呈由于其重要性而受到广泛重视，本文就近年来这一领域的研究成果作一综述。

B细胞免疫突触在抗原捕获、加工和递呈过程中的作用

B细胞具有捕获外部抗原的能力，B细胞将其捕获的外部抗原在抗原加工区室中降解成肽段，然后抗原肽与进入区室的MHCⅡ类分子结合，表达于B细胞表面并提呈给CD4＋T细胞，这是适应性免疫反应过程的一个关键性步骤。 B细胞与T细胞之间的这种联系被称为T、B细胞的合作［1］，这个过程B细胞形成生发中心，并且分化为能够产生亲和力更高的的浆细胞，同时发展成为记忆性B 细胞亚群。B细胞通过MHCⅡ类分子对抗原进行递呈的过程是十分复杂的，主要涉及以下几个阶段：第一，B细胞可通过B细胞抗原受体（ BCR）识别并捕获外部抗原；第二，捕获后的抗原在B细胞的抗原加工室中被降解为肽段，然后被降解的肽段与MHCⅡ类分子结合；第三， MHCⅡ类分子与肽段的复合物将表达于B细胞表面并提呈给CD4＋T细胞，见图1。

发热样温度对朗格汉斯细胞表面抗原递呈相关分子及Toll-like受体表达的影响

目的探讨发热样温度对朗格汉斯细胞(Langerhans cells,LCs)表面抗原递呈相关分子CD40、CD80、CD86、HLA-DR以及Toll-like受体(Toll-like receptor,TLR)-3、TLR-4表达的影响。方法采用Ficoll淋巴细胞分离液分离PBMCs,CD14免疫磁珠分离CD14+细胞。应用含细胞因子(rhGM-CSF 1 000IU/ml,rhIL-4 1 000IU/ml,TGF-β10ng/ml)的RPMI-1640培养基诱导培养CD14+细胞,第3d补加细胞因子,培养7d后的细胞采用流式细胞术检测表面Langerin,鉴定细胞为LCs。将LCs分别置于37℃、39.5℃、41℃、43℃5%CO2细胞培养箱中处理30min,37℃过夜恢复培养后台盼蓝染色法检测LCs的存活率,流式细胞术检测LCs表面抗原递呈相关分子CD40、CD80、CD86、HLADR以及TLR-3和TLR-4的表达情况。结果细胞因子诱导培养7d后细胞出现典型的树枝状突起,表达Langerin,表明LCs诱导成功。发热样温度处理后LCs存活率从37℃时的96.86%分别降至39.5℃时的90.09%、41℃时的86.11%和43℃时的76.78%。检测两份样品的LCs表面分子的变化。结果显示39.5℃处理的LCs表面CD86、HLADR、TLR-4的表达较37℃对照组显著增加(P<0.05),其阳性细胞百分率均值较对照组均值分别增加1.38、1.3和1.78倍;CD40、CD80、TLR-3的表达差异无统计学意义(P>0.05)。41℃处理的LCs表面TLR-3及TLR-4的表达显著增加(P<0.05),其阳性细胞百分率均值较对照组均值分别增加18.96和15.75倍;CD40、CD80、CD86、HLA-DR的表达差异无统计学意义(P>0.05)。43℃处理的LCs表面CD40、CD80、CD86的表达显著增加(P<0.05),其阳性细胞百分率均值较对照组均值分别增加5.32、1.36和1.63倍;HLA-DR、TLR-3、TLR-4表达显著变化(P>0.05)。结论发热样温度处理能增强LCs部分表面抗原递呈相关分子CD40、CD80、CD86、HLA-DR以及TLR-3、TLR-4的表达。其中43℃处理能显著增加CD40的表达,41℃处理能显著增加TLR-3及TLR-4的表达。

杂色曲霉素对人外周血单个核细胞TAP1及LMP2基因表达的影响

目的:探讨杂色曲霉素(ST)对体外培养的人外周血单个核细胞(HPBMc)抗原加工递呈相关基因TAP1、LMP2表达的影响。方法:采用RT-PCR和FCM方法,分析5种浓度ST处理对体外培养的HPBMcTAP1、LMP2基因在mRNA和蛋白水平表达的影响。结果:RT-PCR检测结果表明,ST处理24h后,低浓度ST组(0.125mg/L、0.25mg/L)HPBMcTAP1mRNA相对表达量明显高于对照组,而较高浓度组(0.5mg/L、1mg/L和2mg/L)TAP1mRNA则明显低于对照组,尤以1mg/L和2mg/L组为著。FCM定量分析表明,低浓度ST组HPBMcTAP1蛋白平均表达量略低于对照组,但无统计学意义,而较高浓度组TAP1表达则明显低于对照组(P<0.05)。在0.125mg/L到1mg/L浓度范围内,各ST处理组HPBMcLMP2蛋白表达量和mRNA的相对表达量均高于对照组。结论:ST对体外培养的HPBMcTAP1mRNA表达和蛋白表达的影响按ST剂量不同而变化,在0.125～1mg/L浓度范围内ST在mRNA及蛋白水平均可剂量依赖地提高体外培养的HPBMcLMP2的表达。

CD1a与肿瘤相关性研究进展

CD1分子是不同于主要组织相容性复合体（MHC）-Ⅰ类分子与MHC-Ⅱ类分子的第三类抗原递呈分子,主要在抗原递呈细胞（APC）表面表达,它在脂质和糖脂抗原的递呈中起重要作用[1].CD1分子的抗原结合沟含有3个特异性片段[2],并可区分T细胞和NKT细胞群[2-3].因此,CD1分子通过递呈自身和外来抗原来调节免疫耐受和自身免疫反应之间的平衡.以氨基酸序列的相似性为基础,CD1蛋白被分为三组：第一组包括CD1a,CD1b和CD1c;第二组包括CD1d;第三组包括CD1e.人们普遍认为第一组CD1分子可以将脂质抗原递呈给αβT细胞群和γ δ T细胞群[2],第二组CD1分子则将抗原递呈给NKT细胞[1-4];前者在未成熟树突状细胞（DC）表面表达,后者则在APC和一些上皮细胞表面表达[5].目前,已经有一些研究提出CD1a可能介导肿瘤源性的脂质和糖脂抗原向肿瘤特异性的T细胞递呈,从而促进这些溶细胞性细胞的抗瘤免疫反应的进行[3,6].