伏马菌素B1对人外周血单个核细胞抗原加工相关转运子表达的影响

探讨伏马菌素B1(FB1)对体外培养的人外周血单个核细胞(hPBMC)抗原加工相关转运子(TAP-1)表达的影响。采用流式细胞定量检测(FCM)、免疫印迹(Western印迹)及半定量RT-PCR方法,研究不同浓度FB1(0,10和50μmol/L)处理后人外周血单个核细胞TAP-1在mRNA和蛋白质水平表达的影响。RT-PCR检测结果表明,10和50μmol/L FB1处理24h后,处理组细胞TAP-1mRNA明显低于对照组。在蛋白质水平,FCM定量分析表明,两个处理组细胞表面TAP1的平均荧光强度均较对照组降低,以50μmol/LFB1处理组降低显著(P<0.05)。免疫印迹结果亦表明,FB1处理组TAP-1的表达均较对照组降低。10和50μmol/LFB1可抑制体外培养的hPBMCTAP-1mRNA和蛋白质表达。

喉鳞状细胞癌中HPV与TAP、CD8、HLA表达的相关性及临床意义

目的检测抑制基因蛋白16(P16)与抗原加工相关转运体(TAP)1、TAP2、人类白细胞抗原(HLA)、CD8在喉鳞状细胞癌中的表达,探讨喉鳞状细胞癌中TAP1、TAP2、HLA、CD8的表达及其与人乳头瘤病毒(HPV)感染的相关性及临床意义。方法选取滨州医学院附属医院2013年1月至2018年12月行手术切除的84例喉鳞状细胞癌患者的组织蜡块进行临床研究,其中男性68例,女性16例,年龄45~78岁,中位年龄63岁,采用免疫组化EnVision法检测84例喉鳞状细胞癌组织中P16和TAP1、TAP2、HLA、CD8的表达情况,分析其与临床病理特征的关系。进一步采用χ^(2)检验或Fisher精确检验、Spearman秩相关检验分析HPV感染与上述蛋白表达的相关性,采用Kaplan-Meier进行生存分析,Cox比例风险回归模型进行多因素生存分析。结果P16在喉鳞状细胞癌中的阳性表达率为11.9%(10/84),在癌旁正常组织中为阴性表达;CD8在喉鳞状细胞癌组织中的阳性率为38.1%(32/84),低于癌旁正常组织[56.0%(47/84)],TAP1、TAP2、HLA在喉鳞状细胞癌组织中的阳性率均低于癌旁正常组织[41.7%(35/84)比69.0%(58/84)、29.8%(25/84)比56.0%(47/84)、42.8%(36/84)比57.1%(48/84)],其中,TAP2在癌和癌旁正常组织中的表达差异有统计学意义(χ^(2)=5.80,P<0.05)。喉鳞状细胞癌组织中CD8的表达与临床分期有关,差异有统计学意义(χ^(2)=6.57,P<0.05);而TAP1、TAP2、HLA、P16的表达与临床病理因素无关。Spearman关联性分析结果提示TAP1表达与TAP2、CD8呈正相关(r=0.295、0.232,均P<0.05),HLA的表达与CD8的表达呈正相关(r=0.232,P<0.05)。结论TAP1、TAP2、HLA、CD8在喉鳞状细胞癌组织中低表达,提示肿瘤可能通过下调TAP1、TAP2导致HLA表达异常,从而抑制CD8免疫应答过程,进而抑制机体免疫反应,为肿瘤免疫逃逸机制提供理论支持。

人类抗原加工相关转运体结构和功能的研究进展

在人类获得性免疫中，为了有效的激活细胞毒T淋巴细胞，MHC-Ⅰ抗原肽复合体在细胞表面的表达甚为关健。这一过程涉及到多种蛋白的共同参与，如MHC-Ⅰ、抗原加工相关转运体（TAP）、蛋白酶体和各种分子伴侣如Tapasin，ERp57，钙网蛋白等等。而负责运输抗原肽，并把它负载到MHC-Ⅰ分子上的是TAP，这一步受阻，将导致细胞表面MHC-Ⅰ类分子的低表达或不表达，严重影响免疫监视。

抗原加工相关转运体1在前列腺癌组织中的表达差异

目的观察不同临床分期前列腺癌的抗原提呈路径的表达差异，探讨抗原加工相关转运体1（TAPl）与肿瘤发生及恶性程度相关性。方法收集前列腺癌、正常前列腺组织以及前列腺增生症（BPH）标本，进行Westernblot和免疫组织化学染色，并根据蛋白条带的灰度值和免疫组织化学结果进行定量评分。结果Westernblot显示前列腺癌标本中TAP1表达灰度为0．210±0．093，比较正常前列腺组（0．310±0．021）和BPH组（0．250±0．067），差异有统计学意义（P〈0．05）。免疫组织化学显示前列腺癌中TAP1阳性染色评分为（1．200±0．316）分，比较正常前列腺组的（2．600±0．244）分和BPH组的（2．000±0．235）分，差异有统计学意义（P〈0．05），且TAP1表达与前列腺痛的分期和Gleason评分相关。结论检测TAPl的表达有助于判断前列腺癌的预后。

抗原加工相关的转运蛋白1在胶质瘤中的表达及临床意义

目的探讨抗原加工相关的转运蛋白1(TAP1)是主要组织相容性复合体-Ⅰ(MHC-Ⅰ)类抗原呈递途径所必需,在肿瘤免疫学监测重要标志性作用。方法通过慢病毒转导3种胶质瘤细胞株(U87、U251和GL261)中过表达和敲低TAP1的表达水平,实验分为正常对照组、慢病毒过表达空载体对照组、慢病毒敲除空载体对照组、TAP1过表达组和敲除组;蛋白质印迹法(Western blot)和定量聚合酶链反应(qPCR)检测TAP1和MHC-Ⅰ的表达和相互关系;使用Transwell系统检测细胞增殖和侵袭功能;流式细胞检测MHC-Ⅰ在TAP1过表达和敲低的GL261细胞表面的表达;免疫组织化学检测TAP1对肿瘤免疫应答的作用。采用方差分析做多组比较、独立样本t检验做两两比较。结果 TAP1过表达和敲低3种细胞系成功,细胞计数试剂盒(CCK-8)吸光度中G261细胞的增殖每组无变化和侵袭功能通过t检验,差异无统计学意义(t=1.265,df=4,P>0.05);TAP1的过表达和胶质瘤细胞的敲低表明TAP1和MHC-Ⅰ表达t检验,差异有统计学意义(t=4.560,df=4,P<0.05);TAP1过表达和敲低G261细胞与体内存活和CD8+的免疫化学染色相关(t=5.806,df=4,P<0.05);MHC-Ⅰ类在TAP1过表达和敲低GL261细胞表面表达。结论 TAP1可能通过调节CD8+T细胞而成为胶质瘤的关键抑癌基因。

杂色曲霉素对人外周血单个核细胞TAP1及LMP2基因表达的影响

目的:探讨杂色曲霉素(ST)对体外培养的人外周血单个核细胞(HPBMc)抗原加工递呈相关基因TAP1、LMP2表达的影响。方法:采用RT-PCR和FCM方法,分析5种浓度ST处理对体外培养的HPBMcTAP1、LMP2基因在mRNA和蛋白水平表达的影响。结果:RT-PCR检测结果表明,ST处理24h后,低浓度ST组(0.125mg/L、0.25mg/L)HPBMcTAP1mRNA相对表达量明显高于对照组,而较高浓度组(0.5mg/L、1mg/L和2mg/L)TAP1mRNA则明显低于对照组,尤以1mg/L和2mg/L组为著。FCM定量分析表明,低浓度ST组HPBMcTAP1蛋白平均表达量略低于对照组,但无统计学意义,而较高浓度组TAP1表达则明显低于对照组(P<0.05)。在0.125mg/L到1mg/L浓度范围内,各ST处理组HPBMcLMP2蛋白表达量和mRNA的相对表达量均高于对照组。结论:ST对体外培养的HPBMcTAP1mRNA表达和蛋白表达的影响按ST剂量不同而变化,在0.125～1mg/L浓度范围内ST在mRNA及蛋白水平均可剂量依赖地提高体外培养的HPBMcLMP2的表达。

HPV16E6、TAP2与新疆哈萨克族食管癌交互作用的1∶2病例对照

目的:探讨HPV16E6感染、Tap2379、Tap2665、Tap2687基因多态性对新疆哈萨克族(简称哈族)食管癌产生的影响及相互关系.方法:采用1∶2配比的病例对照研究,收集哈族食管癌90例,对照180例,运用序列特异性聚合酶链反应(PCR-SSP)检测HPV16E6的感染率,运用序列特异性引物聚合酶链反应-限制片段长度多态技术(PCR-RFLP)检测Tap2379、Tap2665、Tap2687基因多态性,统计分析采用χ2检验,交互作用采用分层分析.结果:食管癌组与对照组间比较:HPV16E6、Tap2379、Tap2665基因型差异均有统计学意义(χ2=11.617,P=0.001;χ2=11.604,P=0.001;χ2=4.451,P=0.035),Tap2687基因型差异无统计学意义(χ2=0.586,P=0.444).HPV16E6感染与Tap2379、Tap2665基因多态性间不存在交互作用;Tap2379与Tap2665基因多态性存在交互作用.结论:HPV16E6感染,Tap2379、Tap2665多态性是哈族食管癌的危险因素,Tap2379位多态性与Tap2665位多态性对哈族食管癌的发生存在效应修饰作用.