抗原提呈细胞亚群预测肝癌患者的免疫治疗疗效研究

背景原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)患者中免疫治疗应用广泛,但需寻找有效的疗效预测标志物,以此提供个体化和精准化的治疗。目的探讨抗原提呈细胞(antigen presenting cell,APC)亚群与HCC患者免疫治疗的疗效关系。方法前瞻性纳入2022年5月—2023年9月在解放军总医院第五医学中心初次接受免疫治疗的中晚期HCC患者,通过流式细胞仪检测免疫治疗前的B细胞/淋巴细胞(B/LYM)、巨噬细胞/所有核细胞(MA/TNC)和树突细胞/所有核细胞(DC/TNC)的比值。根据均值将患者分为高水平组和低水平组,并比较两组间无进展生存期(progression free survival,PFS),并通过Cox分析影响PFS的因素。最后利用ROC曲线预测疾病控制的效能。结果共纳入84例患者,中位年龄为57岁;男性58例,女性26例。APC亚群基线数据:B/LYM均值为16.54%±6.27%,MA/TNC均值为9.14%±2.87%,DC/TNC均值为0.051%±0.021%。Kaplan-Meier生存分析和Cox回归分析显示B/LYM高值组的mPFS显著高于低值组(5.90个月vs 5.50个月,P=0.019;HR=0.588,95%CI:0.358~0.966),MA/TNC低值组的mPFS显著高于高值组(7.20个月vs 5.40个月,P=0.034;HR=0.617,95%CI:0.374~1.019),DC/TNC高值组的mPFS显著高于低值组(6.30个月vs 5.50个月,P=0.026;HR=0.615,95%CI:0.378~0.955)。且高水平的MA/TNC是疾病进展的独立危险因素,高水平的DC/TNC、B/LYM是疾病进展的保护因素。基线B/LYM、MA/TNC、DC/TNC对HCC患者接受2周期治疗后的疾病控制情况而言,具有较好的预测效能,且联合应用时效能进一步提高,AUC分别为0.685、0.723、0.745、0.865。结论高DC/TNC、B/LYM水平和低MA/TNC水平的HCC患者,可能更容易从免疫治疗中获益。

肠道粘膜免疫系统抗原提呈细胞研究进展

肠道粘膜免疫系统持续暴露于大量种类繁多的抗原,是病原体入侵的最大门户,因此抗原识别以及产生迅速有效的免疫反应对机体来说至关重要。免疫反应产生的一个限制性步骤是抗原识别、处理与呈递。参与肠道粘膜抗原提呈的细胞及分子数量多、种类多,相互作用复杂,并且有其特有的性质。

γδT细胞在移植排斥反应中具有专职抗原提呈细胞的特性

背景:最新研究表明,γδT淋巴细胞与微生物产物接触后,可表达树突状细胞的特征性标志同时表现出专职抗原提呈细胞的功能,引发CD4+CD8+αβT细胞强烈的免疫应答。目的:初步验证γδT细胞在移植排斥反应中具有专职抗原提呈细胞的特性,摸索一种体外大量扩增γδT细胞的简便方法,并利用基因修饰方法转染FasL至γδT细胞。设计、时间及地点:动物观察实验,于2007-08/2008-08在解放军第四军医大学第一附属医院中心实验室完成。材料:节段性异位小肠移植模型供、受体大鼠分别为清洁级成年健康封闭群雄性Wistar大鼠及SD大鼠,共60只,体质量200～320g。方法:采用三袖套血管吻合法建立大鼠节段性异位小肠移植模型。利用流式细胞仪获取受体大鼠血液中γδT细胞,并初步验证其功能。常规分离获取SD大鼠单个核细胞,以Mtb-Ag进行体外诱导扩增。主要观察指标:观察细胞增殖情况,以TCRγδ磁珠分选试剂盒进行阳性分选,并进行淋巴细胞中γδT细胞所占比例的检测。建立pLXSNFasL反转录病毒转移体系,检测转染后的γδT细胞。结果:活化γδT细胞表现出与树突状细胞相似的细胞黏附功能,在移植排斥反应中γδT细胞具有专职抗原递呈细胞的特性。新鲜分离的单个核细胞中γδT细胞仅占4.5%,Mtb-Ag刺激培养10d后,γδT细胞所占比例可高达72.2%。经免疫磁珠阳性分选,γδT细胞比例高达99.1%。获得的285bpFasL片段,证明PA317细胞中有FasL基因整合。以pLXSNFasL反转录病毒转移体系转染的γδT细胞FasL+细胞占97.3%。结论:实验验证了γδT细胞在移植排斥反应中发挥专职抗原提呈细胞的功能,实现了γδT细胞的体外大量扩增;成功构建了PA317/pLXSN2FasL+病毒上清转染体系,并以Fas配体基因修饰γδT细胞。

抗原提呈细胞与肿瘤生物治疗

一、抗原提呈细胞的种类与特点 机体的抗原提呈细胞(Antigen presenting cells,APC)主要包括树突状细胞(Dendritic cells,DC)、巨噬细胞(Macrophage,MΦ)和B淋巴细胞等,最近的研究表明成纤维细胞和内皮细胞也具有一定的抗原提呈功能.DC是抗原提呈功能最强的一类抗原提呈细胞,其最显著的特点是能有效刺激静息的T淋巴细胞,诱发初次免疫应答,而机体的其他抗原提呈细胞则不具备这特性.DC来源于骨髓细胞,在正常组织中的含量极微,高度表达MHC Ⅱ、MHC Ⅰ等免疫刺激分子.用GM-CSF和TNF-α可从CD34^+的造血干细胞中成功扩增出DC,GM-CSF联合IL-4也能从CD14^+的单核细胞培养出DC,此外Flt3L能显著增强DC的扩增效果.细胞因子对DC的分化成熟和抗原提呈功能具有重要的调节作用.巨噬细胞和B细胞均需激活后才能进行有效的抗原提呈.巨噬细胞同时还是一种重要的免疫效应细胞,能通过ADCC效应,释放细胞毒介质(TNF-α、NO等)或膜接触效应(Fas/FasL途径)等机制杀伤肿瘤细胞.

抗原提呈细胞在银屑病发病机制中的作用

目的:观察银屑病皮损组织内郎格罕氏细胞(LC)、真皮树突细胞(DDC)、巨噬细胞的变化及角阮细胞HPV感染情况,探讨LC、DDC、巨噬细胞及HPV与银屑病发病的关系。方法:选用我院病理科2003-2008年期间确诊为银屑病的病理切片,采用免疫组织化学方法观察银屑病皮损组织表皮CD1a、真皮CD1a、真皮CD68+的表达。用Image-Pro Plus 6.0图像处理软件测定每个高倍视野表皮中CD1α+的LC的数目,真皮内CD1α+的DDC的数目、CD68+的巨噬细胞的数目。采用原位杂交方法,检测银屑病表皮组织内HPV13、HPV16、HPV32 DNA。结果:银屑病组皮损组织郎格罕氏细胞数目明显增多,急性进行期为(15.82±1.48)个,慢性静止期为(14.96±1.74)个,正常对照组为(4.23±1.42)个,与正常组比较,差异均有显著性(P<0.05)。银屑病DDC、巨噬细胞数目明显增多,分别为(9.08±2.48)个、(27.19±4.3)个,正常对照组分别为(2.45±1.04)个、(6.7±1.43)个,两组比较差异有显著性(P<0.05)。银屑病表皮组织内未检测HPV13、HPV16、HPV32 DNA。结论:LC、DDC、巨噬细胞与银屑病的发病密切相关,而与HPV的感染可能无关。

人工免疫系统中人工抗原提呈细胞的设计

反向选择模型是人工免疫系统中的经典模型,但存在训练代价高、覆盖率低的问题.危险理论模型是人工免疫系统中新引进的模型,在降低训练代价,提高覆盖率上具有优势.建立人工免疫危险理论模型必须解决的关键问题之一是:在保持人工免疫系统自适应特征的前提下,设计人工抗原提呈细胞.本文从抗原提呈细胞的生物学原理出发,设计了人工免疫系统中的人工抗原提呈细胞,给出单个人工抗原提呈细胞的结构、细胞上Toll样受体的结构,以及人工抗原提呈细胞群体的结构;设计了人工抗原提呈细胞群体的生命周期.初步的实验结果证明所设计的人工抗原提呈细胞具有自适应发现恶意软件的能力.

禽流感病毒感染食蟹猴肺组织内抗原提呈细胞亚型分析

目的分析禽流感病毒感染的食蟹猴肺组织内抗原提呈细胞的不同亚型。方法收集中国医学科学院实验动物研究所病理室禽流感病毒H5N1亚型感染的食蟹猴肺组织蜡块标本,观察其病理学变化及运用免疫组织化学的方法进一步分析CD68、CD14及S-100在感染禽流感病毒食蟹猴肺组织中的表达。结果禽流感病毒感染的肺组织内肺间隔增宽伴巨噬细胞为主的炎细胞浸润,肺泡腔内可见血浆蛋白及纤维素渗出。部分肺泡间隔断裂,巨噬细胞及淋巴细胞浸润。肺组织内H5N1病毒抗原染色呈阳性。肺间隔及肺泡内可见大量CD68阳性细胞,局部可见散在CD14和S-100阳性细胞。结论禽流感病毒感染的食蟹猴肺组织内抗原提呈细胞主要以巨噬细胞为主。

人工抗原提呈细胞研究进展

人工抗原提呈细胞(AAPC)多采用人工载体或异种动物细胞,化学交联或基因重组表达MHC:抗原肽复合物及共刺激分子,模拟T淋巴细胞活化信号在体外或体内活化T淋巴细胞。并通过人为控制AAPC上MHC:抗原肽复合物及共刺激分子的种类和数量,来实现对T淋巴细胞活化的调控,可用于对肿瘤或病毒感染性疾病的过继性细胞治疗、抗原提呈和T淋巴细胞活化信号的研究等。

D-半乳糖所致衰老小鼠抗原提呈细胞的改变及其意义

目的:研究D-半乳糖所致衰老小鼠专职性抗原提呈细胞的改变及其意义。方法:取健康昆明雌性小鼠,2月龄,运用D-半乳糖建立衰老小鼠模型并进行生物学鉴定后,采用免疫荧光和流式细胞术测定脾脏中巨噬细胞CD11b、树突状细胞CD11c、B淋巴细胞CD40的表达;采用免疫组化法测定脾脏组织Fas表达的改变。结果:模型组小鼠巨噬细胞CD11b+/MHC-Ⅱ+CD11b+的百分率为9.78±1.42,与对照组10.76±1.93相比下降(P<0.05);模型组小鼠树突状细胞CD11c+/MHC-Ⅱ+CD11c+、B淋巴细胞CD40+的百分率分别为5.34±0.74、43.60±8.06,与对照组7.88±1.73、56.70±10.97相比明显下降(P<0.01)。模型组小鼠脾脏组织Fas表达增加。结论:D-半乳糖所致衰老小鼠脾脏各种专职性抗原提呈细胞减少,脾脏组织Fas的表达出现渐进性增加。

瘦素基因佐剂对小鼠抗原提呈细胞表型的影响

目的:研究瘦素(Leptin)基因佐剂在体内对抗原提呈细胞的影响。方法:根据小鼠瘦素基因设计引物,采用RT-PCR方法获得瘦素cDNA,与pVAX1连接构建瘦素真核表达载体作为基因佐剂,制备无内毒素重组质粒,转染B16细胞鉴定瘦素的表达,并采用肌注方式分析瘦素基因佐剂在体内对小鼠抗原提呈细胞表型的影响。结果:克隆得到的瘦素编码区全长序列,经DNA测序后证明与已报道序列相同,成功构建小鼠瘦素的真核表达载体,可在B16细胞表达;瘦素基因佐剂在体内对CD3-CD19-CD11c+细胞的MHC II和CD83的表达无明显影响,但能显著上调CD3-CD19-CD11c-免疫细胞表面MHC II类分子的表达。结论:成功构建小鼠瘦素基因佐剂,体内试验可促进免疫细胞上调MHC II类分子,提示瘦素基因佐剂有可能通过增强免疫细胞尤其是抗原提呈细胞的活化而促进免疫应答。

B7-CD28机制在嗜酸性粒细胞呈递抗原过程中的作用

目的 :探讨 B7- CD2 8协同刺激信号通路对嗜酸性粒细胞 (EOS)在体内和体外呈递抗原能力的影响。方法 :以鸡卵清蛋白 (OVA)致敏和雾化吸入刺激 BAL B/ c小鼠以诱发 EOS在气道聚集。将分离纯化的气道 EOS和致敏 T细胞在体外共同培养 ,观察在有 (无 )抗 B7- 1单克隆抗体 (单抗 )或 (和 )抗 B7- 2单抗存在条件下 T细胞增殖反应的变化 ;同时 ,将 EOS注入致敏小鼠的气道 ,然后收集气管旁淋巴结细胞 ,观察 EOS在体内呈递抗原和 T细胞增殖反应之间的关系。在部分实验中 ,小鼠接受抗 B7- 1单克隆抗体 (单抗 )或 (和 )抗 B7- 2单抗静脉注射。结果 :EOS无论在体内还是在体外均具有将所摄取的抗原呈递给致敏 T细胞的能力 ,抗 B7- 1和抗 B7- 2单抗明显抑制由于 EOS抗原呈递所引发的 T细胞增殖反应。结论 :EOS必须提供协同刺激信号才可作为抗原呈递细胞将抗原信息传递给 T细胞 ,B7- CD2 8是主要的协同刺激信号通路。

抗原提呈细胞与天然免疫应答

抗原提呈细胞(APC)和自然杀伤细胞(NK)被激活后产生多种致炎细胞因子,如IL12、IFNγ和NO,它们在抗胞内病原体感染的天然免疫应答中起着极其重要的作用。本文阐述APC产生的细胞因子在天然免疫应答中的作用和天然免疫细胞因子对APC功能的调节作用。

活化抗原提呈细胞对人骨肉瘤PL-11细胞凋亡后体外免疫原性的影响

目的 研究人骨肉瘤细胞 PL- 11被诱发凋亡后 ,体外活化的抗原提呈细胞 (APC)对其免疫原性的影响 .方法 1H2 O2 诱发 PL- 11凋亡的浓度和时间筛选 ,流式细胞仪分析 .2正常献血者粗分白细胞悬液离心沉降法得人外周血单个核细胞 ,粘附法分离单核细胞并预激活 ,同时分离得混合淋巴细胞并预培养 .激活单核细胞分别与凋亡细胞多次冻溶物(PL- 11a)和未发生凋亡之 PL- 11的多次冻溶物 (PL- 11u)和淋巴细胞孵育 7d(pl- 11a组及 pl- 11u组 ) ,另设单纯淋巴细胞与凋亡 PL- 11多次冻溶物培养组 (对照组 )和激活单核细胞与淋巴细胞共培养 (MON组 )组 ,计数法测量增殖 .3各组培养的淋巴细胞进行体外杀伤实验 (效靶比 10 0∶ 1) ,改良 MTT(thiazolyl blue)法测量杀伤及抑制率 .结果 1低于 10 0nmol·L- 1 H2 O2 在 7h之内均无明显诱导凋亡作用 ,于 14h后均诱导凋亡 ,且存在量效差别 ,10 0 nmol· L- 1处理 36 h最明显 .2 PL - 11a组淋巴细胞体外增殖显著 ,PL - 11u组仅有较弱的增殖作用 ,对照组和 MON组均无明显增殖作用 .3pl- 11u组仅有较弱的淋巴细胞杀伤作用 ,pl- 11a组则有明显的增强 ,而对照组及 MON组均无作用 .结论 人骨肉瘤细胞在 H2 O2 诱发凋亡后 ,如经活化 APC吞噬 ,可显著提高其体外免疫原性而引出肿?

肝脏固有抗原提呈细胞在诱导肝移植免疫耐受中的作用

长期以来,肝脏被认为是人体的＂免疫特惠器官＂。与心脏移植和皮肤移植不同,肝移植的免疫排斥反应较弱,而且肝脏移植物可以不受主要组织相容性复合体（MHC）的限制,在不使用免疫抑制剂的情况下诱导受体对供体特异性免疫耐受。肝移植先天免疫耐受已经在猪、大鼠、小鼠、狗及猩猩身上得到验证。

结核分枝杆菌诱导抗原提呈细胞Toll样受体表达差异性研究进展

该文就结核分枝杆菌感染后,抗原提呈细胞表面Toll样受体(toll-like receptors,TLR)表达差异、抗原提呈细胞的增殖、分化以及相关信号通路作一阐述.

树突状细胞与其它 APC 抗原提呈功能及其作用机制比较

本文对 DC 与其它 APC(MφB细胞、成纤维细胞等)在抗原提呈功能及其作用机制、影响因素等方面进行了比较,以进一步明确 DC 的独特免疫功能。

光免疫学研究进展——紫外线照射对抗原提呈细胞的作用及其临床应用

光免疫学主要研究非离子辐射对机体正常或异常免疫功能的影响。人们已发现非离子辐射与某些免疫性疾病的发生有关,例如光过敏、红斑狼疮、天疱疮等受到紫外线(UV)照射后症状加重。而其他一些免疫性疾病,例如日光性荨麻疹、变应性湿疹、白癜风、银屑病等可以成功地用 UV 治疗。光免疫学无论在光医学应用方面及对疾病认识方面均有待进一步的认识。近年来随着对抗原提呈细胞(APC)的深入研究,确认了 APC 在免疫反应中的重要作用,也发现 UV 照射对这群细胞的特殊效应。

黄芩素作为佐剂对抗原提呈细胞的免疫增强作用

目的从体外和体内2个方面检测黄芩素对抗原提呈细胞的免疫增强活性,为促进临床肿瘤免疫治疗的发展提供实验基础。方法在体外实验中,以LPS作为阳性对照,不同浓度的黄芩素分别刺激DC2.4细胞系和RAW264.7细胞系,应用流式细胞仪检测2种细胞表面CD80、CD86、MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ表达量变化;在体内试验中,以弗式完全佐剂与灭活的肿瘤抗原作为阳性对照,黄芩素与灭活的肿瘤抗原作为实验组对小鼠进行免疫,免疫3 d后对其免疫效果进行评价。结果在体外实验中,不同浓度的黄芩素分别刺激DC2.4和RAW264.7细胞后,细胞表面CD80、CD86、MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ都有不同程度表达上调,在体内实验中,不同浓度的黄芩素可使抗原提呈细胞表面CD80、CD86、MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ都有不同程度表达上调,同时使细胞因子IL-12和TNF-α有不同程度表达上调,而使IL-10表达下调。结论黄芩素在体外和体内具有较强的激活抗原提呈细胞的作用,并且使抗原提呈细胞表面标志和细胞因子上调,黄芩素有可能成为具有潜在应用价值的肿瘤细胞疫苗佐剂。

活动性肺结核患者外周血CD11c^+抗原提呈细胞增多且功能增强

目的检测活动性肺结核(APT)患者外周血CD11c+抗原提呈细胞(CD11c+APC)的比例及其表达HLA-DR和CD86的情况。方法采用流式细胞术对52例APT患者外周血CD11c+APC的比例及其HLA-DR和CD86的表达进行检测,并以15例健康志愿者作为对照。结果 APT患者外周血CD11c+APC的比例显著高于对照组,治疗后组显著高于治疗前组;患者CD11c+APC中表达HLA-DR的细胞数以及HLA-DR表达的平均荧光强度均显著高于对照组,而且CD11c+APC中表达CD86的细胞数也显著高于对照组。结论 APT患者外周血CD11c+APC增加,CD11c+APC中HLA-DR和CD86表达增强。