目的检测安徽省1型糖尿病患者的抗原肽相关运载蛋白体(transporter associated with antigen processing,TAP)基因位点多态性。方法采用聚合酶反应-限制片断长度多态性技术,检测16名1型糖尿病患者和50名健康对照TAP位点的多态性。TAP1和...目的检测安徽省1型糖尿病患者的抗原肽相关运载蛋白体(transporter associated with antigen processing,TAP)基因位点多态性。方法采用聚合酶反应-限制片断长度多态性技术,检测16名1型糖尿病患者和50名健康对照TAP位点的多态性。TAP1和TAP2基因分别有2和4个多态性位点,其限制性内切酶分别是TAP1等位基因333位点(TAP1-1,Ile-Val)的Sau3Al内切酶,637位点(TAP1-2,Asp-Gly)的AccI酶;TAP2等位基因379位点(TAP2-1,Val-Ile)的BstuI酶;665位点(TAP2-2,Ala-Thr)的MspI酶;565位点(TAP2-3,Thr-Ala)的RsaI酶以及687位点(TAP2-2,Stop-Gln)的BfaI酶。结果病例组和对照组的TAP1等位基因型分别以637 Gly和637Asp为主;TAP2等位基因分别以379Ile和379Val为主,两组间差异均有统计学意义(P<0.01)。其余等位基因型差异均无统计学意义(P>0.05)。结论在1型糖尿病患者与正常对照人群间的某些TAP基因位点有差异,提示TAP基因可能与该病有密切关联。展开更多
目的利用P ich ia p astoris酵母表达系统表达糖基化的肿瘤相关抗原17-1A,为进一步设计肿瘤蛋白疫苗提供研究基础。方法通过RT-PCR从小鼠肾组织中扩增17-1A的cDNA,将其定向克隆到pP ICZαA质粒上,获得重组质粒pP ICZαA-17-1A,测序正确...目的利用P ich ia p astoris酵母表达系统表达糖基化的肿瘤相关抗原17-1A,为进一步设计肿瘤蛋白疫苗提供研究基础。方法通过RT-PCR从小鼠肾组织中扩增17-1A的cDNA,将其定向克隆到pP ICZαA质粒上,获得重组质粒pP ICZαA-17-1A,测序正确后,重组质粒电转化到P ich ia p astoris酵母菌株G S115中,在甲醇诱导下,利用其AOXⅠ基因的α信号肽,分泌表达17-1A抗原糖蛋白,并对获得的蛋白进行SDS-PAGE及W estern b lot分析鉴定。结果构建了pP ICZαA-17-1A重组质粒,通过电转化将目的基因整合入酵母基因组中,重组毕赤酵母表达能够表达17-1A抗原并检测到抗原发生了糖基化。结论能够通过毕赤酵母表达系统稳定表达糖基化的肿瘤相关抗原17-1A。展开更多
基金the National Natural Science Foundation of China (No. 30770738)Special Foundation for Doctor Education in University from Ministry of Education of China (No. 20050089001)+1 种基金the Natural Science Foundation of Hebei Province China (No. C 200500720)
文摘目的利用P ich ia p astoris酵母表达系统表达糖基化的肿瘤相关抗原17-1A,为进一步设计肿瘤蛋白疫苗提供研究基础。方法通过RT-PCR从小鼠肾组织中扩增17-1A的cDNA,将其定向克隆到pP ICZαA质粒上,获得重组质粒pP ICZαA-17-1A,测序正确后,重组质粒电转化到P ich ia p astoris酵母菌株G S115中,在甲醇诱导下,利用其AOXⅠ基因的α信号肽,分泌表达17-1A抗原糖蛋白,并对获得的蛋白进行SDS-PAGE及W estern b lot分析鉴定。结果构建了pP ICZαA-17-1A重组质粒,通过电转化将目的基因整合入酵母基因组中,重组毕赤酵母表达能够表达17-1A抗原并检测到抗原发生了糖基化。结论能够通过毕赤酵母表达系统稳定表达糖基化的肿瘤相关抗原17-1A。