鼠疫耶尔森菌低钙应答V抗原人源单克隆抗体筛选与鉴定

目的筛选抗低钙应答V抗原(LcrV)的人源单克隆抗体,分析抗体基因特点,检测抗体与抗原结合的特异性、亲和力及功能。方法使用PCR方法从鼠疫疫苗临床试验志愿者外周血细胞cDNA扩增抗体轻、重链可变区基因片段,构建ScFv噬菌体抗体文库。用LcrV对文库进行富集筛选,将获得的抗体基因表达成人IgG1后,测定抗体与LcrV抗原结合的特异性、亲和力、免疫调节功能以及保护能力。结果成功构建了鼠疫耶尔森菌人源ScFv抗体文库,库容量为7.54×10^(8)。抗体文库经LcrV筛选后获得了3株抗LcrV抗体,命名为RV-B4、RV-D1和RV-E8。3株抗体重链为VH1-46和VH3-30,轻链分别为VL1-51、VK3-20和VK1-39。3株抗体经ELISA及Western blot验证均与LcrV特异性结合,其与V抗原结合的解离常数(KD)分别为2.1 nmol/L、1.24 nmol/L和42 nmol/L。RV-D1体外降低人THP-1分泌TNF-α,动物攻毒试验中未发现抗LcrV抗体的保护效果。结论从鼠疫疫苗免疫人群获得了靶向低钙应答V抗原的人源抗体,以结合抗体为主,不能有效阻断病菌感染。所获得的单抗为鼠疫免疫基础研究、鼠疫诊断应用提供了候选材料。

Flt3L及CCL5对prime/boost免疫策略中抗原特异性免疫应答的增强及抗肿瘤作用

目的:研究Flt3L与CCL5作为联合佐剂在prime/boost免疫策略中对HBc抗原特异性免疫应答的增强及抗肿瘤作用。方法:将两种细胞因子质粒与携带HBc抗原的DNA疫苗经肌内注射法共免疫小鼠,免疫3次后再用原核表达的HBc颗粒蛋白或HBcDNA疫苗加强,观察对稳定表达HBcAg的小鼠黑色素瘤细胞(B16-HBc)的生长抑制作用;并分别采用MTT法检测荷瘤小鼠脾淋巴细胞增殖、流式细胞术检测脾CD8+T淋巴细胞中IFN-γ表达、ELISA法检测脾淋巴细胞培养上清IL-2、IL-4含量及乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测特异性CTL杀伤活性。结果:与对照组相比,佐剂联合DNA疫苗免疫经蛋白加强组(DDP/Adj)显著抑制肿瘤生长;佐剂联合DNA疫苗免疫组(DDD/Adj)及DDP/Adj组均可促进特异性淋巴细胞增殖反应(P<0.05),且DDP/Adj高于DDD/Adj组(P<0.05);DDD/Adj及DDP/Adj组小鼠脾脏CD8+T淋巴细胞中IFN-γ表达、IL-2表达水平及CTL杀靶活性均高于对照组(P<0.01或P<0.05),IL-4表达水平在各组无显著区别(P>0.05)。结论:在prime/boost免疫策略中,采用Flt3L与CCL5两种细胞因子联合应用可显著促进荷瘤小鼠产生抗原特异性免疫应答及抗肿瘤作用。

阿帕他胺治疗转移性激素敏感前列腺癌的应用研究

目的探究阿帕他胺治疗转移性激素敏感前列腺癌的应用。方法选取2019年6月至2022年6月在九江市第一人民医院诊断为转移性激素敏感前列腺癌(mHSPC)的患者80例,按照抽签法分为观察组和对照组,每组各40例。对照组采用比卡鲁胺联合雄激素剥夺治疗(ADT),观察组采用阿帕他胺联合ADT治疗。评估两组临床疗效、前列腺特异性抗原(PSA)应答时间、至PSA进展时间、至去势抵抗性前列腺癌(CRPC)时间以及药物相关不良反应。结果观察组患者临床总有效率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组患者PSA应答时间短于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组患者至PSA进展时间长于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组患者至CRPC时间长于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组的药物不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论阿帕他胺联合ADT治疗mHSPC患者效果较好,能更快速实现PSA应答,延缓PSA进展及至CRPC时间,安全性相对较高,药物相关不良反应较低。

青光眼视神经保护的免疫学途径

导致青光眼视功能损害的病理基础是视网膜神经节细胞进行性凋亡和丧失。目前对视网膜神经节细胞损伤和保护的治疗研究已取得一些进展,如:采用可溶性抗原诱导免疫耐受以避免对破坏性自身抗原应答的诱导;在避免自身免疫性疾病基础上,发挥T细胞神经保护性免疫反应的治疗作用;利用谷氨酸受体拮抗剂、钙离子通道阻滞剂、免疫抑制剂等非特异性治疗,减轻和预防视网膜神经节细胞的不可逆性损伤。本文就视网膜神经节细胞的凋亡、青光眼视神经损害的免疫学机制及视神经保护的免疫学途径进行综述,并从自身抗原、抗原多肽、免疫抑制剂等方面探讨视神经保护在免疫学的可能途径。

阿帕他胺治疗前列腺癌发生皮疹7例报告及文献回顾

目的探讨使用阿帕他胺后出现不同程度皮疹的处理方法。方法回顾性分析在本中心接受阿帕他胺治疗前列腺癌出现皮疹患者的临床资料,包括皮疹的性质、发生时间、持续时间、治疗方案及转归。结果2020年4月-2021年12月在本中心接受阿帕他胺治疗的前列腺癌患者共32例,出现皮疹7例,其中1级皮疹4例,2级皮疹2例,3级皮疹1例,皮疹发生中位时间为51 d。7例患者经系统性治疗后皮疹均缓解,其中5例已完全消退。所有皮疹患者均有良好的前列腺特异性抗原(PSA)应答。结论阿帕他胺虽然有一定概率伴发皮疹的出现,但只要早发现、早治疗,并不影响阿帕他胺长期的使用。

免疫学中的共刺激现象

免疫学中的共刺激现象李连奋（卫生部成都生物制品研究所，成都６１００６３）１９８７年，Ｒ．Ｈ．Ｓｃｈｗａｒｔｚ等人在Ｔ细胞的无反应性研究中发现，用某种方法处理Ｔ细胞后，其ＭＨＣ分子结合的抗原就不再诱导Ｔ细胞分裂。几天后，当它遇到活的，未经处理的Ｔ细胞提...

基于思维导图促进免疫学教学的实践应用研究

思维导图是利用简单图像、色彩、节奏或文字将思路梳理成系统模块，以放射性思维和发散联想为基础的图式工具。免疫学主要研究机体对抗原免疫应答理论及方法论的综合性学科，它涉及多个学科，包括药理、临床等。由于免疫学的抽象性和庞大性，在教学中，必须有一种系统且明了的教学方法来帮助学生理解这些枯燥、难以理解的学术问题。基于思维导图来促进免疫学教学的实践应用问题俨然成了当下重要教学模式。不同于基于问题学习（PBL ）教学和以病例为引导的教学法（CBS ），思维导图更循循善诱，利于学生形成学科整体认识并打开学习思路，对传授教学与激励创新的协调把握更精准。

Flt3L与CCL5细胞因子佐剂对HBc抗原DNA疫苗特异性免疫应答的促进作用

观察真核重组表达质粒pFlt3L及pCCL5对携带HBc抗原的DNA疫苗诱导的抗原特异性免疫应答的促进作用。将pFlt3L及pCCL5分别用脂质体的方法转染Hep G2细胞,然后采用骨髓细胞增殖及趋化小室实验检测细胞上清Flt3L及CCL5两种细胞因子的生物学活性。将pFlt3L和pCCL5两种重组质粒单独或联合使用与携带HBc抗原的DNA疫苗经肌内注射法免疫小鼠,采用MTT法检测脾淋巴细胞增殖、流式细胞仪检测脾CD8+T淋巴细胞中IFN-γ表达、ELISA法检测脾淋巴细胞培养上清IL-4含量及乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测特异性CTL杀伤活性。结果:骨髓细胞增殖及趋化实验证实了Flt3L及CCL5均有生物学活性。pFlt3L和pCCL5单独或联合使用均可促进特异性淋巴细胞增殖反应(P<0.05),提高小鼠脾脏CD8+T淋巴细胞中IFN-γ表达量(P<0.05或P<0.01),IL-4表达水平在各组无显著区别(P>0.05),Flt3L+CCL5组小鼠脾细胞特异性CTL活性显著高于其他各组(P<0.05)。pFlt3L和pCCL5表达质粒联用可显著促进小鼠Th1型细胞因子的表达,并对带HBc抗原的DNA疫苗的免疫应答具有促进作用。

HSP70L1介导的细胞内致敏DC疫苗高效诱导抗肿瘤CTL

在细胞内作为分子“伴侣”的热激蛋白（HSP）在细胞外具有免疫佐剂的活性，能够辅助其所“伴侣”的抗原分子激发抗原特异性免疫应答。此特性依赖于抗原提呈细胞的存在，尤其是树突状细胞（DC）：其机制在于，

HSP70L1介导的细胞内致敏DC疫苗高效诱导抗肿瘤CTL

在细胞内作为分子“伴侣”的热激蛋白（HSP）在细胞外具有免疫佐剂的活性，能够辅助其所“伴侣”的抗原分子激发抗原特异性免疫应答。此特性依赖于抗原提呈细胞的存在，尤其是树突状细胞（DC）：其机制在于，HSP通过与TLR2／4、CD91等受体相互作用，激发抗原提呈细胞的炎性信号和抗原的交叉递呈。基于此特性，利用各种形式的HSP和抗原分子的复合抗原致敏DC是肿瘤免疫治疗的一个重要策略，已在大量基础和临床研究中得到了良好的验证。然而，合有HSP的复合抗原致敏的DC，具有制备成本高、质控和检定复杂以及安全性风险增加等对临床应用不利的阻碍。以基因修饰手段在抗原提呈细胞内表达HSP和抗原的复合蛋白，在上述环节比细胞外致敏途径更具有优势，但细胞内的HSP从机制上来讲将失去“佐剂”效应，达不到抗肿瘤的终极目的，然而细胞内致敏途径的基因修饰手段是否对所有的HSP成员都不适用，目前的研究有限。

树突状细胞与特异性肿瘤免疫治疗

树突状细胞 (DC)是体内功能最强的抗原提呈细胞 (APC) ,也是抗原特异性免疫应答的始动者 ,由DC激活的T细胞介导的免疫应答在机体抗肿瘤过程中起着主导作用。本文主要对DC参与抗肿瘤的机制、DC与肿瘤免疫逃逸的关系及近年来DC在肿瘤生物治疗方面的研究进展作一综述。以DC为基础的肿瘤治疗主要有两种方式 :①免疫治疗 :肿瘤抗原体外冲击致敏DC后回输体内 ;②基因治疗

Cellular immunity augmentation in mainstream oncologic therapy

Anticancer immunotherapy has undergone a long evolving journey for decades, and has been dramatically applied to mainstream treatments in oncology in recent 5 years. This progress represents an advanced milestone following cytotoxic medicine and targeted therapy. Cellular immunity plays a pivotal role in the immune responses of hosts to tumor antigens. Such immunity is notably suppressed during neoplastic progression due to immuno-editing processes. Cellular immunity can also be selectively reactivated to combat malignancies while exploiting the advantages of contemporary scientific breakthroughs in molecular immunology and genetic engineering. The rapid advancement of cellular immunity-based therapeutic approaches has achieved high efficacy in certain cancer patients. Consequently, the landscape of oncologic medicine and pharmaceutical innovation has transformed recently. In this regard, we present a comprehensive update on clinically established anti-cancer treatments with cell immunity augmentation as the major mechanism of action.

什么是免疫佐剂？它具有哪些免疫生物学作用？

答：免疫佐剂是指那些与抗原一起或预先注入机体后，能非特异性增强或改变机体对抗原免疫应答的物质。免疫佐剂的免疫生物学作用为：（1）增强免疫原性，使无或微弱免疫原性物质变成有效的免疫原。如多种合成多肽，单独注射无免疫原性，若与弗氏佐剂混用，则免疫原性大大增强；（2）增加抗体滴度，呵提高机体初次和再次免疫应答的抗体滴度；（3）改变产生抗体类型，可由产生IgM。转变为产生IgE；（4）产生或增强迟发型变态反应。

用抗-MICA单抗调理的肿瘤细胞负载树突状细胞能有效激发肿瘤抗原特异性T细胞应答

树突状细胞（DC）能激发肿瘤抗原特异性免疫应答。DC疫苗开发中的两个关键问题是肿瘤抗原的来源和负载方式。Groh等以MHC—I链相关蛋白A（MICA）这一几乎稳定表达于所有肿瘤细胞的表面分子，作为体外抗体调理肿瘤细胞的靶分子，观察用经抗-MICA单抗调理的肿瘤细胞负载DC是否能有效促进肿瘤抗原的递呈与特异性T细胞应答。

人T细胞对猪白细胞抗原的直接识别

猪已被认为是异种移植的最理想供体。有关人 猪器官间超急性排斥研究已有所突破 ,而细胞性排斥报道尚少。本文用混合淋巴细胞反应体系研究异种移植细胞性排斥机制 ,发现异种反应明显弱于同种反应 ,而且以直接识别为主 ,这和同种移植细胞性排斥机制一致。抗人CD4单抗和抗猪白细胞抗原SLA DR、DQ单抗都能明显地抑制 (XMLR) ,而抗人CD8单抗无抑制功能 。

丝裂霉素诱导凋亡癌细胞致敏树突状细胞后的免疫应答

目的 观察树突状细胞(DC)从丝裂霉素诱导的凋亡胆管癌细胞获取抗原后,抗肿瘤免疫应答及对胆管癌细胞的特异性免疫杀伤效果。 方法 用粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)加IL-4从人外周血分化、诱导DC,丝裂霉素在体外诱导培养的人胆管癌细胞凋亡,将DC、T淋巴细胞和凋亡胆管癌细胞共培养,同时设计不同类型肿瘤细胞(坏死胆管癌细胞及培养胆管癌细胞)作对照,7d后,分离、富集DC、T淋巴细胞进行免疫应答及肿瘤细胞杀伤试验。 结果 与凋亡胆管癌细胞共培养的DC可以有效提呈胆管癌细胞抗原,有强烈的免疫应答,刺激的细胞毒T淋巴细胞特异性地杀伤胆管癌细胞。 结论 丝裂霉素诱导凋亡癌细胞可以致敏rhGM-CSF加rhIL-4从人外周血单个核细胞诱导、扩增出的DC,并产生显著的杀伤胆管癌细胞的免疫反应,可望成为特异性免疫治疗肿瘤的一条新途径。