一种新型H5N1禽流感病毒血凝素抗原快速检测试剂的建立

利用5株广谱特异性抗H5亚型血凝素单克隆抗体和酶联免疫渗滤技术成功地建立了一种适于现场检测H5亚型禽流感病毒血凝素蛋白的抗原快速检测试剂H5-HA(Ag)Dot-ELISA。该试剂对41株代表当前亚洲地区流行的各种遗传变异亚系H5N1禽流感病毒检测均为阳性,对多数毒株的分析灵敏度优于0.1个血凝滴度(HA titer),其中部分优于0.01个血凝滴度;比较该试剂与早期开发的同类ELISA试剂,发现前者对后者未能检出的H5N1新变异株检测均为阳性;利用该试剂和商品化Directigen Flu A(BD)试剂检测两株H5N1病毒株,提示前者灵敏度高于后者;该试剂对一株H5N1病毒的检测灵敏度与标准RT-PCR相当;该试剂对24株非H5亚型病毒检测均为阴性,显示出良好特异性。以上结果提示,此研究建立的H5N1病毒抗原快速检测试剂在H5禽流感现场检测上具有较好的应用前景。

胶体金免疫层析试剂盒对甲型H1N1流感病毒(2009)抗原快速检测的敏感性分析

目的了解胶体金免疫层析试剂盒对甲型H1N1流感病毒(2009)抗原快速检测的敏感性。方法分别用甲型流感病毒抗原检测试剂盒(胶体金免疫层析法)和甲型/乙型流感病毒抗原检测试剂盒(胶体金免疫层析法)对171例疑似甲型H1N1流感(2009)患者鼻咽拭子标本进行检测,以实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)核酸检测结果为参考,比较胶体金免疫层析试剂盒对不同病程以及不同病毒核酸载量标本检测的敏感性。结果 2种试剂盒的检测敏感性与标本的病毒核酸载量呈正相关(P<0.01),病毒载量≥108拷贝/mL时均可达73.3%。同时,2种试剂盒的阳性检出率与标本的病程呈负相关(P<0.01),发病1～2 d时分别为66.7%和62.5%,推测其在实际应用中的理论敏感性分别可达77.3%和74.6%。结论胶体金免疫层析试剂盒检测甲型H1N1流感病毒(2009)在发病初期及病毒载量较高时有较好的检测效果,可帮助临床早期诊断和海关口岸等机构的现场筛查。但鉴于胶体金免疫层析法自身的局限性,其结果只能作为初步参考,最终的确认结果应以PCR结果为准。

H5N1禽流感病毒血凝素抗原快速检测试剂对不同现场标本的检测比较

利用H5亚型禽流感病毒血凝素抗原快速检测试剂“H5-HA（Ag）Dot-ELISA（H5-Dot）”对来自陆禽、水禽的484份气管拭子、泄殖腔拭子和粪便拭子标本进行检测，结果：①不同采集方式的H5N1阳性标本的检出率高低有别，气管拭子的检出率最高，泄殖腔拭子次之，粪便拭子最低（P〈0．05），因此建议现场采样时应尽可能采集气管拭子标本；②陆禽标本检出率显著高于水禽标本（P〈0．05），对病毒培养阳性的陆禽气管拭子检出率达80％（95％CI：70．6％～87．8％），对水禽气管拭子标本的检出率为38％（95％CI：26．9％～49．4％），可能与标本中病毒滴度高低有关；③有症状与无症状陆禽标本的检出率无显著差异。另外，H5-Dot试剂对333份非H5病毒气管拭子标本的特异性为99．4％（95％CI：97．9％～99．9％）。这些结果表明，H5-Dot是一种较为可靠的H5亚型禽流感病毒早期快速检测方法，在缺乏仪器设施和高素质专业技术人员的H5N1禽流感病毒防控第一线具有重要推广价值。

新型冠状病毒抗原快速检测专家共识(2022)

新型冠状病毒肺炎疫情持续时间长、流行范围广,给全球公共卫生带来了巨大负担。作为感染早期诊断和疫情防控的主要检测手段之一,新型冠状病毒抗原快速检测已在国内逐步开展临床应用。就目前医务人员和社会公众所关注的新型冠状病毒抗原检测相关问题,中国医院协会临床微生物实验室专业委员会组织医学检验、临床医学、感染控制、公共卫生及体外诊断产品研发等多领域专家,依据国内外最新研究进展和应用实践,共同制定了《新型冠状病毒抗原快速检测专家共识(2022)》。本共识介绍了目前新型冠状病毒抗原快速检测方法的技术原理、性能特点、结果解读及处置建议,并就不同场景下新型冠状病毒抗原快速检测应用策略和注意事项进行了解析,以期为临床诊疗和疫情防控中正确理解和应用这一检测技术提供参考建议。

胶体金免疫层析法对呼吸道合胞病毒抗原快速检测结果分析

目的分析胶体金免疫层析法对呼吸道合胞病毒(RSV)抗原快速检测的灵敏度和特异度。方法用RSV抗原检测试剂盒(胶体金免疫层析法)对197例疑似RSV感染患者的鼻咽抽吸物或鼻咽拭子标本进行检测,以反转录聚合酶链反应(RT-PCR)核酸检测结果为参考,比较胶体金免疫层析法对不同类型标本和不同年龄组患者的灵敏度。结果 197例患者标本中经RT-PCR检测,95例(48.2%)为阳性。以RT-PCR核酸检测结果为标准,胶体金免疫层析法的灵敏度和特异度分别是34.7%和100%。该方法对鼻咽抽吸物的阳性检出率较鼻咽拭子高(36.2%对8.6%,P<0.01),鼻咽抽吸物标本的灵敏度明显高于鼻咽拭子(22.1%对12.6%)。RSV检出率与年龄呈负相关(P<0.01),1岁以下患儿的阳性检出率最高(29.5%),而在>5岁患儿中阳性检出率为0。结论胶体金免疫层析法对1岁以下幼儿的鼻咽抽吸物中的RSV有较好检测效果,可辅助临床进行早期筛查。但鉴于该方法灵敏度较低,且适用于5岁以下儿童,临床上还需用RT-PCR对RSV进行确认和补充检测,以免漏诊。

细小病毒抗原快速检测卡临床使用效果评价

本试验以PCR方法为标准,以临床收集的213份粪便样本为检测对象,对3家商品化犬细小病毒抗原快速检测卡的临床应用效果进行了评价:与PCR方法相比较,3家产品各自的敏感性分别为71.7%,66.4%和72.2%;相对应的特异性分别为96%,97%和96%。3家检测卡彼此之间的符合率分别为96.7%、99.5%和95.8%。以PCR方法和其中两种检测卡对同一窝5只感染犬细小病毒的幼犬的临床病征与CPV检测结果进行相关性评估,结果显示,犬细小病毒抗原快速检测卡的阴性检测结果与病犬临床症状的缓解或消失时间呈正相关,而PCR方法在动物临床病征消失后仍可检出病毒。

咽拭子A群链球菌抗原快速检测在过敏性紫癜儿童及肾损伤检测诊断中的价值分析

目的对过敏性紫癜儿童咽拭子A群链球菌抗原快速检测结果与肾功能损害检测结果之间的关系进行探讨分析。方法选取2018年3月至2019年3月在本院皮肤科及风湿免疫科就诊的过敏性紫癜患儿89例,采用免疫散射比浊法检测尿特定蛋白:微量白蛋白(mAlb)、尿转铁蛋白(TRF)、α1-微球蛋白(α1-MG)、尿免疫球蛋白(UIgG)四项;用胶体金法检测咽拭子A群链球菌抗原。结果通过对89例过敏性紫癜特定蛋白四项结果分析得出:有肾功能损害指标的38例(42.70%),学龄前(3~6岁)组有16例(38.10%)感染了A群链球菌,学龄(7~12岁)组中有19例(40.43%)感染了A群链球菌,两组之间A群链球菌感染率年龄差异无统计学意义(χ2=4.348,P>0.05),在A群链球菌感染35例阳性组中,存在肾损害的患儿共有26例(74.29%),其明显高于链球菌感染阴性组中的12例(22.22%)肾损害病例(χ2=30.775,P<0.05)。结论过敏性紫癜儿童合并A群链球菌感染后增加了肾功能损害风险,咽拭子A群链球菌抗原快速检测,有利于快速鉴别诊断过敏性紫癜儿童是否存在A群链球菌感染。

镜检和疟原虫抗原快速检测(RDT)胶体金法及巢式PCR法在疟疾诊断中的价值

目的探究镜检、疟原虫抗原快速检测(RDT)胶体金法、巢式PCR法在疟疾诊断中的价值。方法选取2019年2月至2020年2月本中心收治的疑似疟疾患者50例作为研究对象,所有患者均接受镜检、RDT胶体金法、巢式PCR法,以实验室检测结合临床特征结果为金标准,比较3种方式检测结果。结果实验室检测结合临床特征结果显示,50例疑似疟疾患者中,阳性36例,阴性14例。经镜检法检出疟疾28例,检出率为46.67%;经RDT胶体金法检出疟疾35例,检出率为58.33%;经巢式PCR法检出疟疾30例,检出率为50.00%;RDT胶体金法准确度及灵敏度均高于镜检法、巢式PCR法,差异有统计学意义(P<0.05);3种诊断方法特异度、阳性预测值、阴性预测值比较差异无统计学意义。结论在疟疾临床诊断中,RDT胶体金法具有较高的灵敏度及检出率,且与镜检、巢式PCR法联合诊断,可进一步提高检出率,为临床治疗提供依据。

流感病毒抗原快速检测试剂灵敏度及特异性评价

目的评价流感病毒抗原快速检测试剂在儿童应用中的灵敏度及特异性.方法选取2021年12月至2022年2月于苏州大学附属儿童医院就诊的361例流感样病例入组,采集双份鼻拭子,分别采用抗原快速法和荧光PCR法检测流感病毒,以荧光PCR法为金标方法,分析抗原快速法的灵敏度及特异性.结果抗原快速法和荧光PCR法的患儿总检出率、不同性别患儿检出率和不同年龄段患儿检出率均无统计学差异(P>0.05).但是,抗原快速法的灵敏度和特异性明显低于荧光PCR法,差异有统计学意义(P<0.05).另外,根据患儿不同年龄段分析其灵敏度和特异性,结果发现,在<3岁的婴幼儿中,抗原快速法的特异性较高,灵敏度较低,其阳性结果更有意义,而在>6岁的学龄儿童中,其灵敏度较高,特异性较低,其阴性结果更有意义.结论由于抗原快速法在不同年龄段患儿中灵敏度和特异性的差异,其在婴幼儿和学龄前儿童中的阳性结果更为可靠,阴性有漏检的可能,而在学龄儿童中的阴性结果更为可靠,阳性有误诊的可能,有助于临床医生结合患儿年龄解读抗原快速法的检测结果.

SARS-CoV-2抗原快速检测卡对不同病毒株的灵敏度评价

目的比较国内外严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory symptom coronavirus 2,SARS-CoV-2)抗原快速检测卡检测不同病毒株的灵敏度(稀释度)。方法以武汉生物制品研究所有限责任公司(以下简称武汉所)提供的4种SARS-CoV-2病毒株[原始株、贝塔(Beta)变异株、德尔塔(Delta)变异株和奥米克戎(Omicron)变异株]疫苗原液作为灵敏度评估用样品盘,用国内外17个厂家的21批次SARS-CoV-2抗原快速检测卡及上海捷诺生物科技有限公司生产的SARS-CoV-2核酸检测卡分别检测4种疫苗原液的系列稀释样本,根据稀释度评价抗原快速检测卡和核酸检测试剂的灵敏度。并将抗原快速检测卡与核酸检测卡检测结果进行比较,判断稀释度最大即灵敏度最高1组抗原快速检测卡对应的核酸检测Ct值。结果检测原始株、Beta株、Delta株和Omicron株疫苗原液,抗原检测卡的灵敏度分别为1∶10~1∶8×10^(4)、1∶10^(3)~1∶2×10^(5)、1∶10^(2)~1∶4×10^(4)和1∶10~1∶4×10^(5);核酸检测试剂的灵敏度分别为10^(-6)、10^(-5)、10^(-4)和10^(-7)。高灵敏度的抗原快速检测卡能达到核酸检测的N基因的Ct值分别为原始株(10^(-4))>31、Beta株(10^(-5))>36、Delta株(10^(-4))>34、Omicron株(10^(-5))>33,达到国内与欧盟对SARS-CoV-2抗原快速检测试剂的要求。结论所有抗原快速检测卡均能检出4种病毒株,但不同试剂检测不同病毒株的灵敏度存在一定差异,其中对Omicron株的灵敏度相对差异最大。

A群链球菌抗原快速检测法在儿童A群链球菌感染性疾病诊断中的应用

目的探讨A群链球菌(GAS)抗原快速检测法在儿童GAS感染中的临床应用价值。方法收集2015年1月至2019年12月在深圳市儿童医院门诊和住院部就诊的疑为GAS感染的患儿44733例。采集所有患儿的咽拭子标本,用BinaxNOW Strep A Test试剂进行GAS抗原快速检测,其中有346例患儿的咽拭子先接种血培养基进行传统的细菌培养,再行GAS抗原快速检测,比较2种方法的灵敏度和特异度,并根据GAS抗原快速检测结果,分析其年龄、性别及季节变化趋势。应用SPSS 19.0软件对数据进行统计分析。结果346例同时用2种方法检测的患儿中,以细菌培养法结果作为参考方法,GAS抗原快速检测法敏感度为89.41%(152/170例),特异度为94.32%(166/176例)。共检测GAS抗原44733例,其中阳性10024例,阳性检出率为22.41%。GAS抗原快速检测法阳性率5年的曲线趋势一致,均以3~8岁阳性率较高,其中4~6岁阳性率最高。2个季节性高峰明显,分别出现于每年的4-6月,11月-次年1月。男女检出率比例为1.74∶1,性别差异有统计学意义(χ2=27.93,P<0.0001)。GAS抗原快速检测在不同病区阳性检出率由高到低依次为皮肤科门诊(52.34%)、急诊科门诊(47.74%)、内科门诊(37.36%)、感染病区(19.71%)、五官科病区(10.27%)、内科病区(8.63%)、外科病区(7.34%)、新生儿病区(0)。结论GAS抗原快速检测法和细菌培养法结果符合率高,且具有较高的敏感度和特异度,可在儿童GAS感染性疾病诊断中推广使用。GAS检出率在急诊科门诊和皮肤科就诊患儿较高。GAS抗原阳性检出率存在明显的季节性和人群(年龄和性别)差异,未发现新生儿感染者。

流感病毒抗原快速检测试剂灵敏度评价

目的对9种流感病毒抗原快速检测试剂盒(rapid influenza virus diagnostic tests,RIDTs)的灵敏度进行评价。方法季节性流感毒株收集后,通过TCID50(组织细胞半数感染量)和病毒核酸序列测定分别确定病毒滴度及型别;流感毒株进行系列稀释后,使用流感病毒抗原快速检测试剂盒进行检测,以评价不同试剂的灵敏度。结果不同试剂对同一株病毒的检出灵敏度差异最大为32倍稀释度(>10^1 TCID50/ml);同一种试剂对不同型别、亚型/系流感病毒的检出灵敏度不同。结论市场上的RIDTs灵敏度存在差别;使用多株不同流感型别、不同亚型/系的流感病毒将有助于对RIDTs产品质量进行全面评价和控制。

新型冠状病毒抗原快速检测研发现状及展望

新型冠状病毒肺炎疫情的全球大流行,对全球公共健康、社会和经济运转造成了重大影响。在药物研发迟滞及疫苗有效性未得到充分验证的情况下,对人群进行大规模的快速筛查,寻找潜在的感染者(尤其是轻症和无症状患者),并进行集中隔离,切断传播途径和保护易感人群是首要的任务。因此对于SARS-CoV-2感染,早期诊断尤为重要。总结现有市场上的新冠病毒抗原快速检测产品,对全球抗原快速检测市场进行分析,概述其研发的动向并展望了我国在新冠抗原检测新方法、新技术方面的自主创新能力。

流感病毒两种快速抗原检测方法的对比分析

目的分析比较两种流感病毒抗原检测试剂盒(胶体金免疫层析法)检测的一致性,评价新型的基于银盐扩增技术的流感病毒抗原检测试剂盒在临床中的应用。方法选择2015年1月1日-2月28日在复旦大学附属华山医院就诊的体温>37.5℃,且具有流感样症状的患者,同时采集双份鼻拭子标本。采用IMMUNO AG Cartridge Flu AB试剂盒(简称AG1法)与甲型/乙型流感病毒抗原检测试剂盒(简称CV法)同时检测,并作PCR检测以确证。结果共检测患者91例,AG1法测定甲型流感病毒阳性7例,乙型流感病毒阳性53例;CV法测定甲型流感病毒阳性7例,其中弱阳性3例,乙型流感病毒阳性50例,其中弱阳性4例;PCR法检测甲型流感病毒阳性8例,乙型流感病毒阳性60例。AG1法检测甲型流感病毒灵敏度87.5%,特异度100%,乙型流感病毒灵敏度88.3%,特异度100%。CV法检测甲型流感病毒灵敏度87.5%,特异度100%,乙型流感病毒灵敏度83.3%,特异度100%。AG1法与CV法两种抗原快速检测甲型流感病毒检测的阳性符合率100%,乙型流感病毒的阳性符合率94.3%。结论两种流感病毒快速抗原检测方法一致性较好,AG1检测法可以减少针对弱阳性标本的人为判读误差,可应用于流感早期诊断。

实时RT-PCR方法和快速抗原检测方法(Dot-Elisa)检测甲型流感的比较

目的探讨实时逆转录聚合酶链扩增反应(real-time RT-PCR)和快速抗原检测方法(Dot-Elisa)在检测甲型流感中的应用。方法随机选择2009年5～10月在我院门诊就诊的318例流感样症状病例,采集咽拭子标本。采用real-time RT-PCR和Dot-Elisa同时检测咽拭子标本的甲型流感病毒核酸或甲型流感病毒抗原。结果在318例流感样病例中,real-time RT-PCR方法检测152例(47.8%)为甲型流感患者,其中118例(37.1%)为甲型H1N1流感(2009),34例(10.7%)为普通甲型流感。快速抗原检测方法检测113例患者为甲型流感患者。与real-time RT-PCR方法比较,快速抗原检测方法检测甲型流感的敏感性为61.8%,特异性为88.5%,阳性预测值PPV为83.2%,阴性预测值为71.7%,总符合率为75.8%,一致性KAPPA检验κ=0.509(P<0.01)。采用两种不同方法检测甲型流感阳性率的差异不受患者病程、年龄的影响(P均﹥0.05)。Ct值≤35的标本其抗原阳性检测率大于Ct值在35～37之间的抗原阳性率(U=0.00,P<0.01)。结论快速抗原检测方法检测甲型流感的敏感性低于real-timeRT-PCR方法,其敏感性可能受标本的病毒量影响。

腹泻患儿粪便中轮状病毒抗原快速检测在临床诊断中的意义

研究腹泻患儿粪便中轮状病毒抗原快速检测在临床诊断中的意义。方法:抽取2019年10月~2020年2月于我院接受腹泻治疗的患儿130例作为研究对象,把他们按照年龄的不同阶段分为A、B、C三组,A组为小于6个月的婴儿,B组为6个月~2岁之间的婴儿,C组为2岁~6岁的幼儿,使用轮状病毒单克隆抗体检测抗原的方法,测定各组患儿大便中轮状病毒的抗原。结果:此次研究共检测出轮状病毒抗原阳性患儿81例,阳性率为62.3%,A、B、C三组患儿的阳性率存在较大的差异(p<0.05),三组之间的对比差异均具有统计学意义,结果表明年龄在6个月~2岁之间的B组患者使轮状病毒感染的高发期。同一年龄组之间的男女患儿之间的比较差异无统计学意义(p>0.05)。结论:通过婴幼儿的粪便来进行轮状病毒抗原检测是一种较为可靠的检测方试,检测结果比较准确,对于腹泻患儿的临床诊断提供了比较有价值的依据,有利于及时对患儿进行对症治疗,防止轮状病毒对患儿身体造成较大损害。

B族链球菌快速抗原检测在产前筛查中的应用价值

目的探讨B族链球菌(GBS)快速抗原检测在产前筛查中的应用价值。方法将云浮市中医院2017年12月至2018年5月期间收治的68例孕晚期孕妇根据GBS快速抗原检测结果分为阴性组与阳性组,比较两组产妇妊娠结局和新生儿结局。结果 68例孕妇GBS快速抗原检测阴性率为88.2%(60/68)、阳性率为11.8%(8/68);阳性组妊娠不良结局发生率为62.5%,高于阴性组的18.3%,差异具有统计学意义(P<0.05);阳性组新生儿不良结局发生率为50.0%,高于阴性组的10.0%,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论妊娠晚期感染GBS与妊娠结局及新生儿不良结局密切相关,GBS快速抗原检测快捷简便,准确率高,早期诊断可有效预防妊娠不良结局的发生。

妊娠晚期B族链球菌快速抗原检测及妊娠结局分析

目的分析妊娠晚期B族链球菌快速抗原检测的结果及妊娠结局关系。方法 500例进行常规检验及分娩的产妇,采用乳胶法于妊娠35~37周进行B族链球菌快速抗原检测筛查B族链球菌感染情况,比较检测阴性、阳性产妇妊娠结局、新生儿结局。结果 500例产妇B族链球菌快速抗原检测阴性457例,占比91.4%;阳性43例,占比8.6%。B族链球菌快速抗原检测阳性(妊娠晚期B族链球菌感染)产妇妊娠不良结局发生率为55.81%,高于B族链球菌快速抗原检测阴性产妇的2.19%,差异有统计学意义(P<0.05)。B族链球菌快速抗原检测阳性产妇所产新生儿不良结局发生率高于B族链球菌快速抗原检测阴性产妇所产新生儿,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 B族链球菌感染与产妇妊娠及新生儿各种不良结局的发生有关,而快速抗原检测快速简便、准确率高,应用于早期诊断效果良好,具有一定的临床推广价值。

快速抗原检测对A族链球菌急性咽峡炎的临床诊断价值

目的评价RADT在GAS急性咽部感染诊断中的临床应用价值。方法记录126例疑似猩红热患者的临床表现,并进行评分。使用QuickVue StrepA快速抗原诊断检测盒对所有患者进行检测,并同时进行细菌培养,记录结果。对确诊患者正规使用静脉抗生素治疗1天后,再次进行评分和RADT检测。结果疑似猩红热患者的检测结果中,以细菌培养为金标准,RADT检测的灵敏度为92.5%,特异度为93.5%,一致性检验统计量Kappa=0.848,具有显著统计学意义(P=0.000)。随着患者临床评分的升高,RADT灵敏度由81.8%逐步增加到100%。临床评分与RADT灵敏度具有显著线性相关关系,相关系数r=0.962(P=0.009)。确诊患者使用静脉抗生素治疗1天后再次进行检测,RADT灵敏度明显降低为30.0%。且相同临床评分组治疗前后比较,RADT灵敏度也显著降低(P<0.01)。结论 RADT诊断GAS咽部感染的正确性较高,具有简单、快捷的优势,但对于症状较轻或使用过抗生素治疗患者的诊断效能有所下降。

A族溶血性链球菌抗原检测的应用及药敏分析

目的评价A族溶血性链球菌(group A streptococcus, GAS)抗原快速检测方法的敏感性和特异性,分析其药物敏感性。方法选取2017年1~12月首都儿科研究所附属儿童医院门诊考虑存在链球菌感染的患儿324例,采集咽拭子标本送检,同时以GAS抗原快速检测方法(胶体金法)和传统培养方法检测链球菌,进行药物敏感性试验。结果 324例咽拭子标本中,传统培养法链球菌阳性95例,阴性229例;胶体金法检测链球菌阳性98例,阴性226例,敏感性为90.5%,特异性为94.8%。药敏结果显示,所有菌株均对青霉素类及头孢类抗菌药物敏感,而对四环素及大环内酯类药物的耐药率已超过90%。结论胶体金法进行GAS抗原检测能满足临床急诊和门诊样本随时检测的需求,可用于儿童GAS感染的辅助诊断。青霉素类仍是首选治疗链球菌感染的药物。