两种不同噬菌体筛选方法所获的卫氏并殖吸虫抗原模拟表位抗原性比较

目的比较从兔抗蚯蚓血清免疫球蛋白(E-Ig)结合后的噬菌体12肽库中和从噬菌体肽库中筛选出的两种卫氏并殖吸虫抗原模拟表位的抗原性。方法以肺吸虫病患者血清免疫球蛋白(Pw-Ig)作为靶分子,分别对噬菌体12肽库(PwA)和经过 E-Ig 筛选一轮后的肽库(PwB)进行3轮吸附-洗脱-扩增的淘筛,随机挑取 PwA 和 PwB 蓝色噬菌斑各24个扩增,用 ELISA 方法检测并比较两者的抗原性。结果24个 PwA 克隆中有12个可以与肺吸虫病患者血清发生免疫反应,其中 A_(491)nm 值较高的2个克隆具有较好的特异性和敏感性;24个 PwB 克隆中有10个可以被卫氏并殖吸虫病患者血清所识别,其中 A_(491)nm 值较高的2个克隆具有较好的抗原性。结论从 PwA 和 PwB 中均筛选到了对肺吸虫具有潜在诊断价值的抗原模拟表位,提示以异源性抗体结合后的肽库作为源肽库来筛选寄生虫抗原模拟表位是可行的,为研制新型诊断试剂提供了一条新的着眼点。

麻疹病毒中国株与日本株的H蛋白及抗原性比较

198 4年以来日本分离的本土麻疹野病毒为C1、D3、D5基因型 ,中国自 1993年以来流行的绝大多数麻疹野病毒为H1基因型。 2 0 0 0年在日本东京检测到 1株由中国输入的H1基因型麻疹野病毒。对该中国株H1基因型与日本株C1、D3、D5基因型的H蛋白及抗原性进行了比较 ,结果表明 :H1基因型H蛋白的分子量为 78kD ,与A、C1基因型相似 ;D3、D5基因型的H蛋白的分子量为 80～ 82kD ,一些D3基因型在 39℃与在 33℃、37℃生长一样好 ,但其它基因型在 39℃生长却减少到 33℃、37℃的 1/ 10 0或 1/ 10 0 0。实验证实 ,一些D3、H1基因型能从较低的中和抗体水平逃逸 ,证明最近流行的麻疹病毒有轻微的抗原改变。

H5亚型AIVHA和HA1的Sf-9昆虫细胞表达及其作为检测抗原的初步比较分析

利用杆状病毒表达系统,在昆虫细胞Sf-9中分别表达了H5亚型禽流感病毒的HA、HA1。相同表达条件下,Western Blot分析比较表明,HA、HA1均与H5亚型AIV抗血清反应,且不与H7、H9亚型AIV抗血清发生交叉反应,具有良好的特异性;以Western Blot检测鸡、鸭AIV抗血清,初步表明,重组杆状病毒表达的HA、HA1均可作为H5亚型AIV血清检测的抗原,HA优于HA1。