以间接碘标记法制备瘦素标记抗原的研究

目的:以间接碘标记法制备瘦素(leptin)的标记抗原(125I-leptin),建立瘦素的放射免疫分析(RIA)并用于临床。方法:先以氯胺T(ch-T)法标记对羟基苯丙酸琥珀酰亚胺脂(Bolton-hunter试剂,BH试剂)制备125I-BH,然后于冰浴中与leptin进行联结制备125I-leptin。结果:125I-leptin的放射性比活度为1 43MBq/μg,125I的总标记率为37 8%,用以建立的RIA各项技术指标均满足临床要求。结论:由于以间接法制备125I-leptin,减少了leptin与氧化剂、还原剂和放射性碘的接触,避免了对其抗原性的损伤,从而制备出具较高标记率和较高放射性比活度的125I-leptin。

腺样囊性癌组织中增殖细胞核抗原标志物的表达及其意义

目的:探讨增殖细胞核抗原标记物(Ki-67)在腺样囊性癌(ACC)组织中的表达情况及其意义。方法:采用免疫组织化学S-P法测定Ki-67在54例ACC组织中的表达情况,t检验统计分析其临床及病理学意义。结果:Ki-67在ACC组织中的表达与临床分期及病理类型有关,Ki-67的高表达预示着ACC的预后较差。结论:Ki-67可作为判断ACC恶性程度及预后的有效指标。

Eu^3＋标抗原盐酸克伦特罗的时间分辨荧光免疫检测

采用时间分辨荧光免疫分析(time-resolved fluoroimmunoassay,TRFIA)建立简便、快速、灵敏的盐酸克伦特罗(clenbuterol hydrochloride,CBL)检测方法。以自制盐酸克伦特罗单克隆抗体包被96孔微孔板作为固相抗体,Eu3+标记抗原与样品中的CBL竞争结合抗体,建立直接竞争荧光免疫分析体系。猪尿、组织样品添加回收率实验表明:方法灵敏度为0.02μg/L,样品回收率为91%～101%,与沙丁胺醇、莱克多巴胺等结构类似物的交叉反应率均小于1%。建立盐酸克伦特罗铕标抗原直接竞争时间分辨免疫检测方法,方法灵敏度高、特异性强,且操作简单,完全可以满足现有实际检测需求。

酶标抗原Dot－ELISA检测鸭肝炎病毒抗体

酶标抗原Dot－ELISA检测鸭肝炎病毒抗体@杨奎@陈溥言...

猪肺脏气道上皮干细胞的特异抗体筛选与抗原表达研究

猪肺脏气道上皮主要由基底细胞,克拉拉细胞,纤毛细胞,杯状细胞等上皮细胞类型组成,筛选猪气道上皮干细胞的相关特异性抗体,观察其特异抗原的表达,将有助于对猪气道上皮干细胞的分离、鉴定和生物学特性的研究。试验中,制备远端气道上皮细胞的冰冻切片与细胞爬片,利用免疫荧光染色法,分析不同物种来源的抗体对猪气道上皮细胞的免疫染色反应;同时利用Oct3/4、Sox2、CD133和SSEA-1等10种上皮干细胞相关抗体分析猪气道上皮干细胞表面抗原表达情况。通过试验,筛选出在猪气道上皮干细胞相关抗体,并发现气道组织冰冻切片未检测到这10种抗体相关的阳性细胞,而在细胞爬片中观察到CD49f和CD117阳性细胞数量较多。免疫荧光共染发现这些CD49f和CD117阳性细胞同时也表达基底细胞表面标记Keratin 14。这可能是正常情况下猪气道上皮干细胞数量极为稀少,表面抗原表达量低而不易检测到,在肺脏气道上皮受到外环境刺激时(如消化),上皮干细胞开始增殖以完成损伤修复作用发生数量上的增殖。综上所述,利用Keratin 14和CD49f或CD117(c-kit)双标染色法可以鉴定猪肺脏气道上皮干细胞的候选亚群来用于其生物学特性与功能的研究。

^(177)Lu-PSMA放射性配体疗法治疗前列腺癌的临床实践专家共识(2024年版)

镥-177标记前列腺特异性膜抗原放射性配体疗法(^(177)Lu-labeled prostate-specific membrane antigen radioligand therapy,^(177)Lu-PSMA-RLT)是一种通过精准地向前列腺癌细胞递送^(177)Lu释放的β射线,引发肿瘤细胞DNA的辐射损伤从而杀灭肿瘤的创新治疗方法。现阶段国内外多个前列腺癌领域权威指南与共识推荐其用于治疗转移性去势抵抗性前列腺癌(metastatic castrate-resistant prostate cancer,mCRPC),国内尚未见关于^(177)Lu-PSMA-RLT治疗前列腺癌的临床实践路径和用药规范的报道。本共识由中国抗癌协会肿瘤核医学专业委员会和中国医师协会核医学医师分会共同发起,结合现有的^(177)Lu-PSMA-RLT注册研究结果、真实世界数据及国内外放射性核素临床治疗经验,根据牛津循证医学中心临床证据推荐等级和证据级别来评价不同级别的证据,在适应证、患者筛选、用药不良反应、随访和辐射安全等方面给出推荐意见。本共识旨在为临床医师提供^(177)Lu-PSMA-RLT治疗前列腺癌的临床参考,为进一步制订行业相关指南奠定基础。

微型球状光学免疫传感器的构建及其在CA125检测中的应用

金纳米粒子(AuNP)和银纳米粒子(AgNP)受到光子作用发出强烈的散射光,在暗场显微镜中可观察到清晰的单纳米粒子图像。以金纳米粒子耦合抗体分子作为球状传感器核心,银纳米粒子作为抗原标记物,构建微型球状光学免疫传感器。研究结果显示,在暗场显微镜中观察到抗体耦合的金纳米粒子为金黄色光点,银纳米粒子为绿色光点。当溶液中癌抗原CA125浓度为35 U/mL时,银纳米粒子耦合到金纳米粒子表面,金黄色的暗场图像转变成绿色,散射光强度增强至68720,表明通过暗场显微镜观察传感器的颜色变化可定量检测生物分子。该光学免疫传感器体积小、灵敏度高,可进一步应用于临床疾病诊断。

HIV-1感染的儿童CD_8细胞群表面激活标记的增加

该项研究的目的是分析儿科 HIV-1感染对我国血淋巴细胞的影响,测定 CD8细胞上激活标记抗原的表达及寻找儿科 HIV-1感染的愈后指标。这项研究工作包括了71名有 HIV-1感染相关综合症的儿童。其中29位小于2岁,42位在2—12岁之间。测定的结果均与年龄相仿的正常儿童对照组相比较。HIV-1感染的儿童 CD4的 CD8/

中国结直肠肿瘤筛查、早诊早治和综合预防共识意见(二)

四、结直肠肿瘤的早期诊断1.实验室诊断目前结直肠肿瘤的血清学诊断仍缺乏灵敏、特异的方法。CEA和CA125、CA19-9等传统肿瘤抗原标记物血清学检测的操作简便,但敏感性和特异性有待提高。

增殖期血管瘤和卡波西样血管内皮瘤的病理比较研究

目的正确鉴别体表软组织深部的增殖期婴幼儿血管瘤(Infantile hemangioma,IH)和卡波西样血管内皮瘤(Kaporsiform Hemangioendothelioma,KHE)是选择合适治疗方案的重要条件。从多方面比较增殖期IH和KHE的病理特征,为更准确地鉴别诊断这两种疾病提供依据。方法在2001年1月至2009年6月期间,收集21例增殖期IH和12例KHE标本。采用HE染色、透射电镜和免疫组化染色等方法,比较增殖期IH和KHE的病理结构和抗原标记(D2-40和Glut1)的表达。结果 HE染色显示,增殖期IH有众多毛细血管丛,新生毛细血管壁内可见扁平状周细胞;KHE由肿瘤结节组成,结节中心是大量狭缝状管腔,结节边缘可见毛细血管。在电镜下观察,增殖期IH的毛细血管壁基底膜呈多层板状结构,基底膜内有周细胞;KHE的狭缝状管腔和毛细血管壁基底膜仅有数层,且不连续,基底膜内也可见周细胞。增殖期IH肿瘤内皮细胞不表达D2-40,强烈表达Glut1;而KHE仅表达D2-40,不表达Glut1。结论增殖期IH的病理结构与KHE有明显差别。D2-40和Glut1可以作为鉴别增殖期IH和KHE的可靠抗原标记。

Ki-67在涎腺腺样囊性癌组织中的表达及其与预后相关性的探讨

目的探讨增殖细胞核抗原标记物(Ki-67)在涎腺腺样囊性癌(SACC)组织中的表达情况及其与预后的相关性。方法采用免疫组织化学S-P法测定Ki-67在54例SACC组织中的表达,其中术后复发组19例,未复发组35例;死亡组16例,生存组38例。采用Cox比例风险回归模型对影响SACC患者术后生存的多项因素进行分析。结果死亡组Ki-67的表达明显高于生存组(P=0.004);在术后复发组的表达高于未复发组(P=0.017)。Cox模型多因素分析结果显示,Ki-67、TNM分期、病理类型和术后复发是影响SACC预后的独立指标,危险度分别为3.236、1.382、0.213、2.316。结论Ki-67在SACC组织中的表达与其临床预后有关,Ki-67的高表达预示着SACC的预后较差,探讨Ki-67的表达情况有助于SACC临床治疗方案的制定。

有丝分裂核碎裂指数在节细胞神经母细胞瘤预后评价中的意义及其与Ki67表达的相关性

目的探讨有丝分裂核碎裂指数(MKI)在节细胞神经母细胞瘤(GNB)预后评价中的意义及其与细胞增殖抗原标记物Ki67的相关性。方法收集28例GNB的标本和临床资料。显微镜下计数每例标本的MKI,应用免疫组织化学方法检测每例标本中Ki67蛋白的表达。根据2003年国际神经母细胞瘤病理分类标准进行病理分型和统计学分析。结果 28例GNB预后良好型15例,预后不良型13例。随访28例,失访1例。预后良好型GNB患者组生存时间明显高于预后不良组(P<0.05),生存时间与病理分型显著相关(P<0.05)。MKI与临床分期、病理分型以及生存时间相关(P<0.05)。高MKI组与低MKI组相比,Ki67表达无显著差异。结论在GNB的病理分型和预后评价中,MKI是一个显著的预后评价指标,单独检测Ki67对预后评价意义不大。

血管内皮细胞生长因子在非小细胞肺癌中的表达

目的探讨血管内皮细胞生长因子(VEGF)、肿瘤微血管密度(MVD)2项指标与非小细胞肺癌各临床病理因素之间的关系以及两者之间的联系。方法采用免疫组织化学SABC法检测经病理检查确诊的68例非小细胞肺癌、13例癌旁和13例正常肺上皮组织VEGF、FVⅢ因子相关抗原的表达,对FVⅢ因子相关抗原标记的血管计数MVD。结果肺癌组织VEGF阳性表达率和MVD值明显高于正常肺上皮组织和癌旁组织;肿瘤直径≥5.0cm者MVD值明显高于直径<5.0cm者;腺癌MVD值明显高于鳞癌;有远处器官转移的肺癌MVD值明显高于无远处器官转移者;Ⅳ期肺癌MVD值明显高于Ⅰ期和Ⅱ期者,Ⅲ期MVD明显高于Ⅰ期,MVD值随TNM分期增加有逐渐增高的趋势;VEGF表达阳性的肺癌MVD值明显高于表达阴性者,并且随着VEGF表达程度的加强,MVD值增加。结论血管生成与肺癌的生长、浸润、转移及疾病进展密切相关;肺癌组织VEGF阳性表达率明显增加,是肺癌血管形成和维持的重要因子之一;MVD可作为判断非小细胞肺癌生物学行为,预测其发生发展的1项指标。

bcl-2、ki-67和p53在喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的探讨bcl-2、ki-67和p53在喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义。方法利用免疫组织化学法测定20例喉鳞状细胞癌石蜡切片中和10例声带息肉中bcl-2、ki-67和p53蛋白的表达。结果bcl-2、ki-67和p53在声带息肉中的阳性率为20%、30%和10%;在喉鳞状细胞癌中的表达为50%、60%和50%。bcl-2的表达与喉癌的临床分期正相关(P<0.05),与其他参数无关。ki-67的表达与各临床病理参数无关;p53的表达与声带息肉、喉癌相关(P<0.05),与其他参数无关。bcl-2、ki-67和p53在喉鳞癌中的表达无相关性。结论bcl-2、ki-67和p53可作为反映喉鳞状细胞癌生物学行为的客观参考指标。

恩诺沙星ELISA快速检测方法的建立

采用活酯法合成酶标记半抗原（ENR-HRP），紫外扫描分析和ELISA方法鉴定，结合比为1．6：1。选择ENR-HRP与游离ENR相竞争的模式建立检测ENR残留的ELISA检测方法，其最佳工作条件为：二抗的包被浓度为2μg／mL，抗体工作浓度1：1000，酶标半抗原工作浓度1：500。标准曲线在0．423～1000ng／mL之间线性关系良好，其IC50为33．76ng／mL，回归方程为Y=-0．07769lnx＋0．770801，相关系数r=0．99153，最低检测限0．423ng／mL。单抗对达氟沙星、培氟沙星、麻保沙星有少许交叉，特异性较好。ELISA检测方法批内平均变异系数为5．75％，批间平均变异系数为10．69％，重复性较好。

达那唑治疗子宫内膜异位症患者血中雌二醇、血管内皮生长因子及癌标记抗原的变化

目的观察达那唑治疗子宫内膜异位症 (EM)的疗效及治疗后 3个月血清血管内皮生长因子 (VEGF)、癌标记抗原 12 5 (CA1 2 5)及雌二醇的水平变化 ,以探讨达那唑治疗 EM的作用机制。方法达那唑 40 0～ 60 0 mg/d,疗程 3个月 ,观察临床症状改善情况。采用ELISA法检测用药前及治疗后 3个月血清 VEGF、CA1 2 5及雌二醇水平。结果治疗后雌二醇较治疗前下降 ,处于绝经后水平 (2 6.74±7.5 0 pg/ml)。VEGF、CA1 2 5均显著下降 (P<0 .0 1)。结论达那唑治疗后雌二醇处于绝经后水平。达那唑可通过降低 VEGF。