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牛传染性鼻气管炎病毒糖蛋白gC基因抗原活性区的克隆与表达
被引量:
3
1
作者
陈茹
曾彩云
+3 位作者
罗琼
谢青梅
曹永长
毕英佐
《畜牧与兽医》
北大核心
2008年第2期16-19,共4页
通过聚合酶链式反应从牛传染性鼻气管炎病毒Bartha Nu/67株中扩增得到病毒gC基因并克隆至T载体pMD20T,再以后者为模板扩增gC蛋白第15-177位氨基酸对应的抗原活性区片段gCd。将gCd插入原核表达载体pET32a构建重组表达质粒pET32a-bhv1gCd...
通过聚合酶链式反应从牛传染性鼻气管炎病毒Bartha Nu/67株中扩增得到病毒gC基因并克隆至T载体pMD20T,再以后者为模板扩增gC蛋白第15-177位氨基酸对应的抗原活性区片段gCd。将gCd插入原核表达载体pET32a构建重组表达质粒pET32a-bhv1gCd。限制性内切酶以及序列分析鉴定表明重组表达质粒克隆片段序列与阅读框正确。对重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)的培养物进行蛋白电泳,可检测到分子量约45ku的目的产物,IPTG诱导后5h表达量最高。免疫印迹试验结果证实,gCd重组蛋白与牛传染性鼻气管炎标准阳性血清发生特异性反应,表明gC抗原活性区片段在原核获得表达并具有良好的抗原性。该重组蛋白可用于建立ELISA等免疫诊断方法。
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关键词
牛传染性鼻气管炎病毒
GC基因
抗原活性区
表达
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职称材料
题名
牛传染性鼻气管炎病毒糖蛋白gC基因抗原活性区的克隆与表达
被引量:
3
1
作者
陈茹
曾彩云
罗琼
谢青梅
曹永长
毕英佐
机构
广东出入境检验检疫局技术中心
华南农业大学动物医学院
出处
《畜牧与兽医》
北大核心
2008年第2期16-19,共4页
基金
广东检验检疫科研项目(2004GDK36)
文摘
通过聚合酶链式反应从牛传染性鼻气管炎病毒Bartha Nu/67株中扩增得到病毒gC基因并克隆至T载体pMD20T,再以后者为模板扩增gC蛋白第15-177位氨基酸对应的抗原活性区片段gCd。将gCd插入原核表达载体pET32a构建重组表达质粒pET32a-bhv1gCd。限制性内切酶以及序列分析鉴定表明重组表达质粒克隆片段序列与阅读框正确。对重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)的培养物进行蛋白电泳,可检测到分子量约45ku的目的产物,IPTG诱导后5h表达量最高。免疫印迹试验结果证实,gCd重组蛋白与牛传染性鼻气管炎标准阳性血清发生特异性反应,表明gC抗原活性区片段在原核获得表达并具有良好的抗原性。该重组蛋白可用于建立ELISA等免疫诊断方法。
关键词
牛传染性鼻气管炎病毒
GC基因
抗原活性区
表达
Keywords
infectious bovine rhinotrachetis virus
gC gene
antigenic region
expression
分类号
S858.23 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
牛传染性鼻气管炎病毒糖蛋白gC基因抗原活性区的克隆与表达
陈茹
曾彩云
罗琼
谢青梅
曹永长
毕英佐
《畜牧与兽医》
北大核心
2008
3
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