制备肺炎衣原体抗原片检测血清抗体

目的:探索肺炎衣原体抗原片检测血清抗体法在诊断Cpn感染中的实际应用前景。方法:应用进口肺炎衣原体(Cpn)毒株感染Hep-2细胞,分别以瑞氏-姬母萨染色、吖啶橙染色和直接免疫荧光染色等3种方法鉴定Cpn感染细胞。纯化获取大量Cpn抗原,用于制备斑点抗原片。建立微量免疫荧光染色法(MIF)检测血清抗体,诊断Cpn感染。结果:Cpn感染Hep-2细胞的最适条件是用含1μg/mL放线菌酮的维持液,在35℃、5%CO2孵箱中培养7d,并在培养的第0、3、4、5天以2600r/min离心1h,感染成功率极高。染色反应显示,瑞氏-姬母萨染色可将Cpn包涵体染成蓝紫色或红紫色;吖啶橙染色则使Cpn感染的Hep-2细胞呈现鲜明的橘红色;免疫荧光抗体染色后,在Cpn感染细胞内可见亮苹果绿色包涵体。通过斑点抗原荧光抗体染色的方法抽样检测了100份病人血清中的Cpn抗体,其中抗Cpn-IgG抗体的阳性血清共61份,阳性率为61%。与Cpn-外周血单核细胞(Cpn-PBMC)抗原片比较,阳性检出率无明显差别。结论:用Cpn感染细胞制作的Cpn斑点抗原片可用于临床检测血清Cpn-IgG抗体,且具有特异性、敏感性高的特点,但要求检测人员有一定的经验。

抗核周因子抗原片的筛选及临床意义

目的 分析抗核周因子 (APF)对类风湿性关节炎 (RA)尤其是对早期RA诊断价值 ,并探讨制备APF抗原片的规律性。方法 从 15 2例不同供体中颊黏膜取材制备核周因子抗原片 ,分别对早期RA、典型RA、非RA的结缔组织病、正常对照共 4组对象检测APF ;同时检测抗角质蛋白抗体 (AKA)、类风湿因子 (RF)。结果 只有 5 0 %的供体颊黏膜上皮适宜做APF的抗原片。以 1∶2 0为阳性阈值 ,APF的阳性率分别为 :早期RA 73.3% ;典型RA 6 3.3% ;非RA的结缔组织病组 3.3% ;正常对照组 3.3%。RA组明显高于对照组 ;APF与AKA、RF均有相关性。结论 APF抗原的选择与性别无相关性 ;结缔组织病人和健康人之间亦无差异。

应用螨抗原片间接荧光抗体试验(IFA)诊断肺螨病的研究

本文首次应用以粉螨类为主的混合螨种制成的螨抗原片作间接荧光抗体试验(IFA),55例患者的阳性率为90.91％,阳性滴度几何均值为121.10,15例阴性对照3例显示荧光,其中最大滴度为1:8。荧光显色的螨体轮廊清晰可辨,体表呈荧光浓染。结果提示患者体内产生了针对螨抗原的特异性IgG,螨体抗原性较强的部位在体表、螫肢和足,同时表明本文创用的螨抗原片间接免疫荧光试验具有较高的敏感性和特异性,对肺螨病的辅助诊断具有一定的实用价值。

PVF抗原片环卵沉淀试验诊断日本血吸虫病敏感性和特异性的进一步观察

据80份粪检阳性的血吸虫病人血清,95份经吡喹酮治疗后3～8年的血吸虫病患者血清和90份非流行区健康人血清,按单盲法混合编号的考核实验结果:PVF—COPT使用江苏省寄研所提供的冷冻干卵抗原和热处理超声干卵抗原,对血吸虫病人血清的阳性率均为83.8％;在有血吸虫病治疗史者血清的阳性率分别为22.1％和15.8％;对正常人血清的假阳性率分别为8.9％和6.7％.此外,对肺吸虫、华枝睾吸虫病和姜片虫病人血清采用冷冻干卵抗原的交叉反应阳性率分别为8％、12％和4％。与常规法COPT的平行对比实验结果均无显著的差异.但标准化的PVF—COPT能预制定量的干卵抗原片,有利于提高COPT的稳定性.操作上较常规法COPT简便.

8种呼吸道感染病原体抗原片的研制及临床检测

呼吸道传染病是高发流行病,具有人群普遍易感,诱发原因广泛,传染性强,传播速度迅速,较难控制等特点[1],如今呼吸道感染已占儿科门诊的60%以上。而快速高效地诊断出患者感染的呼吸道病原体类型有助于尽快确定治疗方案,防止病情加重和迁延不愈。血清学检测是临床常用的呼吸道传染病初步筛查、诊断方法。间接免疫荧光法是临床检测的经典及金标准实验[2],因其方便、灵敏、特异、高效的特点常用于临床病原体的初步诊断。

自制抗原片检测抗角质蛋白抗体的结果分析及价值

目的 探讨自制抗原片检测抗角质蛋白抗体 (AKA)价值。方法 分别以自制Waster大鼠食管抗原片和德国欧蒙公司抗原片为底物 ,用间接免疫荧光法检测AKA ,并比较Even氏蓝复染与不采用Even氏蓝复染对结果的影响。结果 两种抗原片在阳性率和非特异性荧光出现率方面均无统计学差异 (P >0 .0 5 ) ,Even氏蓝复染与否也无统计学差异 (P >0 .0 5 ) ;类风湿性关节炎 (RA)组与非RA组AKA阳性率差异非常显著 ( P <0 .0 1) ;AKA对RA的诊断有较高的敏感性和特异性。结论 自制Waster大鼠食管抗原片 ,经济实用 ,适合临床应用 ;Even氏蓝复染与否对结果无影响 ;

免疫酶染色法中抗原片稳定性的研究

日本血吸虫薄膜超声干卵石蜡切片－免疫酶染色法（ＩＥＳＴ）是以ＰＶＣ薄膜代替载玻片，用热处理超声干卵作石蜡切片检测血吸虫病的一种免疫酶染色法〔１〕。作为一种血清学方法，其抗原的活性和稳定性是影响检测结果的主要因素之一。为保证检测结果的准确，本文对ＩＥＳ...

柯萨奇病毒B组IgM抗体检测抗原片的研制,优化及应用价值的研究

柯萨奇病毒B组（CoxB）是单股正链小RNA病毒,是呼吸道感染的主要病原体之一。根据血清型,该B组病毒可分为B1、B2、B3、B4、B5、B6六种类型,主要侵犯免疫力底下的围生儿,可引起脑膜炎,中枢神经系统感染等多种疾病,亦是引起病毒性心肌炎的主要病原体之一,占病毒性心肌炎诱因的20%-25%,病情严重者可导致死亡。CoxB传染源为病人及隐性感染者,可经口、呼吸道、肠道传播或胎儿宫内传染。

用自制抗原片对1266例狂犬病暴露者狂犬疫苗免疫后抗体检测结果分析

狂犬病是一种病死率高,人畜共患的传染病。狂犬病暴露者的预防措施除早期局部伤口处理外,疫苗接种是被WHO确认的唯一有效措施,免疫效果考核经典的方法是抗体中种试验及近年推广的免疫荧光灶抑制试验等。由于这些方法设备要求高、价格昂、时间长等,而大大限制了这些方法的推广。有鉴于兹,我们近十几年来,一直采用由我们试验室创用的以鼠脑抗原片进行免疫荧光测定(IFA)抗体的方法,以确定疫苗接种效果,

B病毒抗原片在猕猴B病毒抗体检测中的应用

目的 建立B病毒玻片免疫酶法 (BVEIA)。方法 与HSV 1玻片免疫酶法 (HSV 1EIA)及美国生产的B病毒DIAdot(BVDIAdot)试剂盒进行比较。结果 BVEIA法的阳性检出率比HSV 1EIA法提高 18 10 % ,比BVDIAdot法提高 7 90 % ,达到国外同类产品的水平。

流行性出血热病毒地方株细胞抗原片制备及应用的研究

本文用流行性出血热病毒(EHFV)HU、B_2地方毒株接种Vero-E_(?)细胞后,用PBS制备细胞悬液直接点片经CO_2培养法制备EHFV细胞抗原片,与国家标准株(A_(?))细胞抗原片同时检测野鼠型病毒免疫血清,家鼠型病毒免疫血清,EHF病人血清及健康人血清抗体,其结果均一致,现已推广应用于基层临床早期诊断,在健康人群隐性感染调查中也取得满意效果。

血吸虫 疟疾 丝虫三联抗原片免疫酶染试验对三病监测的研究

PVC三联抗原片免疫酶染试验(IEST)系在PVC薄膜同一个三角形的凹井内,联合包被血吸虫尾蚴、恶性疟原虫和丝虫微丝蚴断片,用同一种免疫酶染技术以一滴血清同时检测3种寄生虫病抗体的检测方法。结果:血吸虫病环卵沉淀试验阳性者的检出率为95.74％,间日疟原虫血检阳性者的检出率为89.10％,历史丝虫微丝蚴阳性者的检出率为82.61％,99例健康者出现血吸虫阳性3例(3.03％),疟疾和丝虫阳性各1例(1.01％),经X^2检验,3种抗原各自对3病检测的特异性有非常显著意义(P<0.01)。 该法与3病常用血清学方法对1380例外来人口的监测比较和对4841例不同疫区人群的3病现场监测应用结果,均能反映各组人群的实际流行概貌。

薄膜三联抗原片免疫酶染试验在血吸虫病丝虫病及疟疾监测中的应用

薄膜三联抗原片免疫酶染试验(PVC—CEP—IEST),是将血吸虫尾蚴、马来丝虫微丝蚴断片以及人工培养恶性疟原虫集于聚氯乙烯薄膜热压的同一三角井内,采用固相免疫酶染技术,1份血同时检测血吸虫、丝虫和疟疾等3种寄生虫病的监测手段。我市于1990年将该项试验,应用于现场实际工作。现将结果报告如下: 材料与方法 1 三联抗原片由上海市血吸虫病防治研究所提供,批号90601,90322,90420。 冻干酶联A蛋白 上海生物研究所出品,批号900901。

应用三联抗原片免疫酶染试验对暂住人口进行“三病”监测的报告

为了深入做好血吸虫病、疟疾和丝虫病(简称“三病”)的巩固监测工作．探讨新的简易的病情监测手段，我们在1992年7～11月应用聚氯乙烯(PVC)薄膜血吸虫疟疾丝虫三联抗原片免疫酶染试验(IEST)对常熟市的外藉暂住人口开展了“三病”病情监测管理，共检8733人。现将结果报告如下。

PVC薄膜三联抗原片免疫酶染试验对流动人口的调查

进入九十年代，常熟市境内每年流动人口５００—１０００万人次，其中暂居３个月以上外地人口已超过７万人。鉴于常熟市已分别于１９８４年、１９８８年、１９８９年经省级考核达到基本消灭丝虫病、基本消灭疟疾和消灭血吸虫病，继而经逐年监测及防治，本地居民血、丝、疟...

卡波肉瘤相关疱疹病毒细胞抗原片的制备

目的成功制备了卡波肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)的细胞抗原片,并验证其有效性,为检测KSHV血清标本提供了一种可行的办法。方法培养了能够稳定表达卡波肉瘤相关疱疹病毒核相关抗原(LANA)的BCBL-1细胞。BCBL-1细胞是感染过KSHV并且细胞基因组中包含KSHV基因的细胞。待细胞生长活力旺盛且状态良好时,收集细胞并用4%的多聚甲醛固定到预先处理好的抗原片上,完成封闭、待测血清的孵育和荧光二抗的孵育后,通过免疫荧光显微镜观察检测结果。结果通过免疫荧光技术发现,感染过KSHV的患者血清样本能观察到荧光标记的二抗激发的荧光,而未感染过KSHV的标本则没有观察到荧光标记的二抗激发的荧光。结论成功制备了能用于检测血清的卡波肉瘤相关疱疹病毒的细胞抗原片,为进一步研究卡波肉瘤相关疱疹病毒的流行病学提供方法。

PVC薄膜三联抗原片免疫酶染试验检测血吸虫等感染的应用

<正>桐乡市为历史上血吸虫病、疟疾、丝虫病等寄生虫病流行区。经几十年的反复防治,于1994年达到消灭血吸虫病标准,又于1996年分别达到基本消灭疟疾及消灭丝虫病标准。为了解外来人员中的寄生虫病(血吸虫病、丝虫病、疟疾)动态和传染源分布,于1996年4~10月采用聚氯乙烯薄膜血吸虫,丝虫、疟原虫三联抗原片(PVC三联抗原片)免疫酶染试验(IEST)对外来人员进行血清学检测,现将结果报道如下。材料与方法1．对象:对本市外来人员由各乡、镇防保人员调查、登记并取血,分离血清后送市卫生防疫站冰箱4℃保存,一个月内检测。

马来丝虫成虫冰冻切片抗原制备及其应用的研究

目前,浙江省兰虫病防治已全面进入基本消灭后期监测阶段,为了更好地实现卫生部颁布的消灭丝虫病近期目标,满足我省各地开展人群丝虫病血清学监测,我们自1990年底始,开展马来丝虫成虫冰冻切片抗原制备及其应用于IFAT的研究,并与广西省寄生虫病防治研究所提供的抗原片进行对照实验。结果显示,本实验制备的马来丝虫成虫冰冻切片抗原(HF-Ag)与广西省寄研所的马来丝虫成虫冰冻切片抗原(GF-Ag)在应用于IFAT中,血清阳性率分别为81.5％和83.33％,无统计学差异(P】0.75),血清抗体GMT有显著差异,HF-Ag显示抗体GMT为1:76,而GF-Ag为1:18,两者间有显著差异(P【0.025)。

日本血吸虫成虫和肝卵切片抗原免疫酶试验诊断血吸虫病的观察

自Kamiya创用曼氏血吸虫鼠肝石蜡切片免疫酶试验(LE-IIP)以来,国内陆续有报道。我们对日本血吸虫成虫(AW),肝卵切片进行IIP比较,发现存有差异,现报告如下。 材料和方法 一、切片抗原 病兔肝组织常规石蜡切片,片厚4μm,每张载玻片贴6枚。活成虫经生理盐水漂洗后,用5％福尔马林固定,6％琼脂包被后同上石蜡包埋切片。载体改进用25μm厚的硬性PVC薄膜,裁成10×5cm大小,每张贴24枚。

柯萨奇B组病毒抗原片的制备及其早期快速诊断的应用

柯萨奇B组病毒(CBV)感染可引起多种临床疾病.如普通感冒、无菌性脑膜炎、脊髓灰质炎、流行性胸肌痛等,也是引起心肌炎的病原因子,已日益受到人们的重视.为此,研究CBV感染的早期快速、简便易行的诊断方法,对预防和治疗CBV性疾病是十分必要的.以往病毒感染性疾病的诊断多采用传统的病毒分离,补体结合试验,也有采用免疫荧光等方法.但前者操作繁琐,历时较长;