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口蹄疫灭活疫苗的免疫效果及其对鉴别诊断的干扰
被引量:
5
1
作者
孙普
何伟
+13 位作者
付元芳
李冬
杨林
魏德陇
曹轶梅
李平花
白兴文
马雪青
李坤
包慧芳
张婧
朱新荣
刘在新
卢曾军
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第10期2481-2489,共9页
灭活疫苗免疫是防控口蹄疫的重要措施,但是灭活疫苗的免疫效果及其对感染与免疫鉴别诊断的干扰一直是口蹄疫免疫无疫区建设评估需要明确的重要问题。本研究中选择了3个企业(代号A、B与C)的4组口蹄疫O型与A型二价灭活疫苗,分别免疫口蹄...
灭活疫苗免疫是防控口蹄疫的重要措施,但是灭活疫苗的免疫效果及其对感染与免疫鉴别诊断的干扰一直是口蹄疫免疫无疫区建设评估需要明确的重要问题。本研究中选择了3个企业(代号A、B与C)的4组口蹄疫O型与A型二价灭活疫苗,分别免疫口蹄疫抗体阴性健康未成年牛,免疫3~4次,测定免疫前后结构蛋白和非结构蛋白抗体的应答水平。结果显示:(1)结构蛋白抗体合格率:a1组(A企业多批次疫苗)4次免疫后O型和A型均为100%;a2组(A企业同批次疫苗)一~三免O型为36.7%、98.3%与100%,A型为15%、86.7%与100%;b组(B企业疫苗)一~三免O型为18.3%、97%与100%,A型为1.7%、45%与53.3%;c组(C企业疫苗)一~三免O型为26.7%、96.7%与100%,A型为21.7%、71.7%与100%。(2)非结构蛋白3ABC抗体阳性率(两种方法复核结果):a1组一~四免分别为0.7%、1.4%、9.5%与4.8%;a2组和c组三次免疫均未检测到阳性;b组仅三免后阳性率为0.6%。3组灭活疫苗首次免疫牛的抗体合格率远不及70%,但加强免疫后抗体合格率均显著提高;非结构蛋白抗体检测结果表明有3组疫苗的抗原纯净度符合OIE的要求,但a1组灭活疫苗免疫后,仍然对感染与免疫鉴别诊断存在干扰;采用两种非结构蛋白抗体检测方法进行复核检验,可以提高感染与免疫鉴别诊断的准确性。本研究为口蹄疫免疫无疫评价方案的制定提供了科学依据。
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关键词
口蹄疫
灭活疫苗
免疫效果
抗原纯净度
鉴别诊断
下载PDF
职称材料
口蹄疫病毒非结构蛋白3AB双抗体夹心ELISA方法的建立
被引量:
2
2
作者
付元芳
何伟
+10 位作者
孙普
杨林
包慧芳
曹轶梅
白兴文
李平花
李冬
陈应理
刘磊
卢曾军
刘在新
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第11期2357-2366,共10页
抗原纯净度是口蹄疫(Foot-and-mouth disease,FMD)灭活疫苗质量检验的一项重要内容,一般采用疫苗2–3次免疫动物后,检测非结构蛋白(Non-structural protein,NSP)抗体是否阳转,判断疫苗抗原的纯净度。文中旨在建立定量检测FMD灭活疫苗抗...
抗原纯净度是口蹄疫(Foot-and-mouth disease,FMD)灭活疫苗质量检验的一项重要内容,一般采用疫苗2–3次免疫动物后,检测非结构蛋白(Non-structural protein,NSP)抗体是否阳转,判断疫苗抗原的纯净度。文中旨在建立定量检测FMD灭活疫苗抗原中NSP 3AB含量的ELISA方法,为疫苗质量控制提供参考方法。利用口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus,FMDV)NSP 3A单克隆抗体和辣根过氧化物酶(Horseradish peroxidase,HRP)标记的3B单克隆抗体,建立定量检测NSP 3AB含量的双抗体夹心ELISA检测方法。采用原核表达并纯化的3AB蛋白作为标准品,标准品系列稀释,绘制标准曲线,以标准品与未加抗原的阴性对照吸光值(OD)的比值大于2.0的标准品最低浓度为最低检测限。标准品浓度介于4.7–600.0 ng/mL之间时,测得的OD值与浓度呈线性相关,回归曲线呈直线,相关系数R2=0.99,确定最低检测限为4.7 ng/mL。检测12份未纯化灭活抗原中3AB蛋白含量介于9.3–200.0 ng/mL之间;而纯化后的病毒抗原中3AB蛋白残留量低于最低检测限;33份来自不同厂家的成品疫苗抗原中9份疫苗抗原3AB蛋白含量在9.0–74.0 ng/mL之间,其余24份疫苗抗原中3AB蛋白残留量低于最低检测限。检测3AB蛋白含量的双抗体夹心ELISA方法能够特异、敏感地检测疫苗抗原中的3AB蛋白含量,为疫苗质量控制与纯净度检验提供了一种可供选择的检测方法。
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关键词
口蹄疫
非结构蛋白
定量ELISA
疫苗
抗原纯净度
原文传递
题名
口蹄疫灭活疫苗的免疫效果及其对鉴别诊断的干扰
被引量:
5
1
作者
孙普
何伟
付元芳
李冬
杨林
魏德陇
曹轶梅
李平花
白兴文
马雪青
李坤
包慧芳
张婧
朱新荣
刘在新
卢曾军
机构
中国农业科学院兰州兽医研究所
甘肃农业大学
甘肃荷斯坦奶牛繁育示范中心
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第10期2481-2489,共9页
基金
“十三五”国家重点研发计划(2016YFD0501504,2017YFD0501104)。
文摘
灭活疫苗免疫是防控口蹄疫的重要措施,但是灭活疫苗的免疫效果及其对感染与免疫鉴别诊断的干扰一直是口蹄疫免疫无疫区建设评估需要明确的重要问题。本研究中选择了3个企业(代号A、B与C)的4组口蹄疫O型与A型二价灭活疫苗,分别免疫口蹄疫抗体阴性健康未成年牛,免疫3~4次,测定免疫前后结构蛋白和非结构蛋白抗体的应答水平。结果显示:(1)结构蛋白抗体合格率:a1组(A企业多批次疫苗)4次免疫后O型和A型均为100%;a2组(A企业同批次疫苗)一~三免O型为36.7%、98.3%与100%,A型为15%、86.7%与100%;b组(B企业疫苗)一~三免O型为18.3%、97%与100%,A型为1.7%、45%与53.3%;c组(C企业疫苗)一~三免O型为26.7%、96.7%与100%,A型为21.7%、71.7%与100%。(2)非结构蛋白3ABC抗体阳性率(两种方法复核结果):a1组一~四免分别为0.7%、1.4%、9.5%与4.8%;a2组和c组三次免疫均未检测到阳性;b组仅三免后阳性率为0.6%。3组灭活疫苗首次免疫牛的抗体合格率远不及70%,但加强免疫后抗体合格率均显著提高;非结构蛋白抗体检测结果表明有3组疫苗的抗原纯净度符合OIE的要求,但a1组灭活疫苗免疫后,仍然对感染与免疫鉴别诊断存在干扰;采用两种非结构蛋白抗体检测方法进行复核检验,可以提高感染与免疫鉴别诊断的准确性。本研究为口蹄疫免疫无疫评价方案的制定提供了科学依据。
关键词
口蹄疫
灭活疫苗
免疫效果
抗原纯净度
鉴别诊断
Keywords
foot-and-mouth disease
inactivated vaccine
immune efficacy
antigen purity
differential diagnosis
分类号
S852.659.6 [农业科学—基础兽医学]
下载PDF
职称材料
题名
口蹄疫病毒非结构蛋白3AB双抗体夹心ELISA方法的建立
被引量:
2
2
作者
付元芳
何伟
孙普
杨林
包慧芳
曹轶梅
白兴文
李平花
李冬
陈应理
刘磊
卢曾军
刘在新
机构
中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室国家口蹄疫参考实验室
甘肃农业大学动物医学院
出处
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第11期2357-2366,共10页
基金
国家重点研发计划项目(No.2016YFD0501500)
宁夏回族自治区重点研发计划(No.2019BBF02005)资助。
文摘
抗原纯净度是口蹄疫(Foot-and-mouth disease,FMD)灭活疫苗质量检验的一项重要内容,一般采用疫苗2–3次免疫动物后,检测非结构蛋白(Non-structural protein,NSP)抗体是否阳转,判断疫苗抗原的纯净度。文中旨在建立定量检测FMD灭活疫苗抗原中NSP 3AB含量的ELISA方法,为疫苗质量控制提供参考方法。利用口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus,FMDV)NSP 3A单克隆抗体和辣根过氧化物酶(Horseradish peroxidase,HRP)标记的3B单克隆抗体,建立定量检测NSP 3AB含量的双抗体夹心ELISA检测方法。采用原核表达并纯化的3AB蛋白作为标准品,标准品系列稀释,绘制标准曲线,以标准品与未加抗原的阴性对照吸光值(OD)的比值大于2.0的标准品最低浓度为最低检测限。标准品浓度介于4.7–600.0 ng/mL之间时,测得的OD值与浓度呈线性相关,回归曲线呈直线,相关系数R2=0.99,确定最低检测限为4.7 ng/mL。检测12份未纯化灭活抗原中3AB蛋白含量介于9.3–200.0 ng/mL之间;而纯化后的病毒抗原中3AB蛋白残留量低于最低检测限;33份来自不同厂家的成品疫苗抗原中9份疫苗抗原3AB蛋白含量在9.0–74.0 ng/mL之间,其余24份疫苗抗原中3AB蛋白残留量低于最低检测限。检测3AB蛋白含量的双抗体夹心ELISA方法能够特异、敏感地检测疫苗抗原中的3AB蛋白含量,为疫苗质量控制与纯净度检验提供了一种可供选择的检测方法。
关键词
口蹄疫
非结构蛋白
定量ELISA
疫苗
抗原纯净度
Keywords
foot-and-mouth disease
non-structural proteins
quantitative ELISA
vaccine antigen purity
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
口蹄疫灭活疫苗的免疫效果及其对鉴别诊断的干扰
孙普
何伟
付元芳
李冬
杨林
魏德陇
曹轶梅
李平花
白兴文
马雪青
李坤
包慧芳
张婧
朱新荣
刘在新
卢曾军
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020
5
下载PDF
职称材料
2
口蹄疫病毒非结构蛋白3AB双抗体夹心ELISA方法的建立
付元芳
何伟
孙普
杨林
包慧芳
曹轶梅
白兴文
李平花
李冬
陈应理
刘磊
卢曾军
刘在新
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020
2
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已选择
0
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导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
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