巨细胞病毒抗原血症检测在肾移植术后的应用

目的评估巨细胞病毒抗原血症检测方法对诊断肾移植患者巨细胞病毒感染的意义。方法收集2021年9月至2021年12月昆明市第一人民医院就诊90例肾移植患者的110例血样,对其进行巨细胞病毒(cytomegalovirus,CMV)pp65抗原血症检测与Ig G抗体、CMV DNA结果比较,评估CMV pp65抗原血症结果与肌酐、他克莫司(tacrolimus,Tac/FK506)药物浓度、淋巴细胞亚群的相关性。结果CMV pp65抗原血症结果与CMV DNA结果一致性为65.5%,差异具有统计学意义(P<0.05)。CMV pp65抗原血症检测结果与CMV IgG抗体检测结果一致性为57.3%,差异不具有统计学意义(P>0.05)。CMV pp65抗原血症结果与肌酐、FK506药物浓度比较,差异无统计学意义(P>0.05)。CMV pp65抗原血症结果与淋巴细胞亚群比较中,仅与NK细胞绝对值差异有统计学意义(P<0.05)。结论CMV pp65抗原与CMV IgG抗体结果一致性为57.3%。CMV pp65抗原与CMV DNA结果一致性为65.5%,两种方法联合检测,对提高CMV感染临床诊断准确率具有一定意义。在CMV pp65抗原阴性组与阳性组中,血清肌酐水平、全血FK506药物浓度两组间差异无统计学意义,NK细胞绝对值差异具有统计学意义,NK细胞绝对值偏高的肾移植患者,发生CMV感染的概率偏低。

人巨细胞病毒pp65抗原血症检测方法的建立和初步临床应用

目的 建立人巨细胞病毒抗原 pp6 5 (HCMVpp6 5 )血症特异、灵敏和低成本的酶免组化和荧光免疫组化方法 ,以利于临床推广应用。方法 以HCMV AD16 9感染的人胚肺成纤维细胞 (HELF)爬片作阳性对照 ,选择试剂和材料组建试剂盒 ,并与商品化的同类试剂盒作比较 ,建立人外周血多形核白细胞 (PMNLs)中HCMVpp6 5抗原阳性细胞的检测方法 ,然后再用荧光定量PCR(FQ PCR)方法做相应考评。 结果 我们建立的HCMVpp6 5抗原血症检测法能成功地检出PMNLs中的 pp6 5阳性细胞。其可检测限分别为 10 2 pfu/ml的AD16 9攻击 2 4h后的HELF细胞爬片和 3～ 5个 pp6 5阳性细胞 / 2× 10 5PMNLs ;用高相对分子质量 (5 0 0 0 0 0 )的葡聚糖能快速、有效地分离PMNLs ;用 4 %中性多聚甲醛固定的细胞片 ,于 - 2 0°C或以下可长期保存 (≥ 6个月 ) ,而且 pp6 5抗原性稳定。 结论 自建的试剂盒与同类进口试剂盒相比 ,检测 pp6 5的结果差异无显著性 ,并与FQ PCR的检测结果相一致 ,其检测特异、灵敏、操作简单、费用低廉 ,适宜临床实验室推广应用。

荧光定量PCR和外周血白细胞pp65抗原血症实验对肾移植术后巨细胞病毒感染的检测

目的 探讨肾移植术后 3个月巨细胞病毒 (CMV)的感染状况 ,比较荧光定量PCR和外周血白细胞 pp6 5抗原血症实验两种方法对肾移植术后巨细胞病毒感染的检测情况和使用价值。方法 分别用荧光定量PCR、外周血白细胞 pp6 5抗原血症实验和ELISA法对我院 2 0 0 1年 1月～2 0 0 2年 12月 5 6例肾移植患肾移植术后 3个月的外周血进行巨细胞病毒的检测。结果 5 6例肾移植患者中CMVpp5 6抗原血症阳性 9例 ( 16 1% ) ,PCR阳性 11例 ( 19 6 % ) ,12例 ( 2 1 4 % )诊断为CMV感染 ,其中 7例为症状性感染 ,5例为无症状性感染。荧光定量PCR和外周血白细胞 pp6 5抗原血症实验的一致性为 92 % ,阳性符合率 6 7% ,阴性符合率 92 %。CMVpp6 5抗原、CMVDNAPCR、CMV IgM的敏感性、特异性分别为 72 %、92 % ;10 0 %、92 % ;4 3%、88%。结论 荧光定量PCR和外周血白细胞 pp6 5抗原血症实验的联合应用 ,对监测CMV活动性感染、临床疗效及预后更加客观。

HCMV(PP65)抗原血症检测在HCMV感染疾病中的应用价值

人巨细胞病毒(HCMV)在人群中感染相当普遍,在我国人群中感染率高达80%～100%.一旦发生HCMV感染常终身带毒,免疫功能正常时,感染常无症状,病毒潜伏持续存在,当机体抵抗力下降时,可引起病毒激活感染,导致严重损伤和疾病.HCMV感染对宿主有两方面的负反应,除病毒本身导致的细胞损伤和病毒诱导的免疫病理损伤外,还极易激发宿主受细菌、真菌、原虫以及其它病毒的感染,从而导致双重感染,对人类健康造成极大威胁.在感染早期给予特异性的抗病毒药物治疗可显著降低HCMV疾病出现的频率和严重性,因此早期、快速、精确地诊断HCMV激活感染十分重要.HCMVPP65抗原血症检测技术的建立和发展不仅使上述要求得以实现,而且对于监测HCMV病的发生发展及制定正确的治疗方案具有重要价值.

日本血吸虫病肠相关与卵相关抗原血症检测的诊断互补性初报

应用经羟基磷灰石纯化，偶联长链生物素ＢＡＣＨ（Ｂｉｏｔｉｎａｍｉｎｏｃａｐｒｙｌｈｙｄｒａｚｉｄｅ）的两株主要识别卵相关不同表位的单克隆抗体建立检测灵敏度达微微克水平的硷性磷酸酶抗原捕获酶联试验（ＢＡ－ＡＰＥＬＩＳＡ），对粗制日本血吸虫卵抗原ＳＥＡｊ－ＴＣＡ的检测极限，２Ｈ１０－ＥＬＩＳＡ可达１—０．３ｎｇ／ｍｌ，仅有效地检出日本血吸虫种特异的卵抗原表位分子；而２Ｈ１－ＥＬＩＳＡ则达３．２ｎｇ／ｍｌ，亦能灵敏地检示曼氏血吸虫的卵抗原组分。两组试验反复试用于日本血吸虫病例及正常人群血样检测，显示有非常明显的ＯＤ消光读数差异。同时采用已建立的１Ｂ１０－ＡＰＥＬＩＳＡ检测肠相关ＣＡＡ系列，以平行检测的健康对照组消光ＯＤ均值＋３ＳＤ为阳性界值，对３组采自不同流行区的慢性或混合型病例同批血样进行肠相关ＣＡＡ及卵相关２Ｈ１０和２Ｈ１的二联或三联叠加检测，其累计检出率都得到不同程度的提高，尤以低度流行区的慢性病例组更为明显。

急性脱髓鞘脑病患者人巨细胞病毒pp65抗原血症检测的临床意义

目的探讨人巨细胞病毒(HCMV)在急性脱髓鞘脑病(ADBD)中的病原学作用,并评估HCMV-pp65抗原血症在ADBD活动性HCMV感染早期诊断、抗病毒治疗及疗效判断中的价值。方法采用HCMV单克隆抗体免疫荧光法,对64例ADBD患者的外周血进行HCMV-pp65抗原检测,同时采用金标免疫斑点法检测血清HCMV-IgM,并对检测结果以及抗病毒药物应用与疗效进行分析。结果64例ADBD中HCMV-pp65阳性17例(26.6%),HCMV-IgM阳性8例(12.5%);HCMV-pp65阳性者,应用膦甲酸钠治疗9例,痊愈6例(66.7%),好转3例(33.3%);应用无环鸟苷治疗8例,痊愈2例(25.0%),好转4例(50.0%),无效2例(25.0%)。结论HCMV与ADBD的发生密切相关,HCMV-pp65抗原检测是一种敏感性、特异性强的方法,有助于HCMV感染疾病的早期诊断,指导抗病毒治疗及疗效的评价;膦甲酸钠对HCMV感染所致ADBD效果良好。

HCMV（pp65）抗原血症-肝、肾移植术后巨细胞病毒感染监测的分析

目的通过5000次肝、肾移植术后病人外周血HCMV（pp65）抗原血症检测结果与用ELISA方法检测HCMV特异性IgM、IgG抗体的检测结果进行比较和观察，探讨各种检测方法在检测器官移植术后HCMV感染中的作用。方法应用间接免疫荧光方法，检测2002年1月至2004年11月在我院接受肝、肾移植手术后病人外周血白细胞内人巨细胞病毒（HCMV）的基质磷蛋白（pp65）共检测血标本5000次，阳性病人应用ELISA方法检测HCMV特异性IgM抗体。结果5000次HCMV（PP65）抗原血症检测中，阳性1053次，占21．06％；1053次HCMV（PP65）抗原血症阳性病人，ELISA方法检测HCMV特异性IgM抗体，103次出现阳性。1053次HCMV（PP65）抗原血症阳性病人中约85．23％出现HCMV感染的症状及HCMV病。结论HCMV（PP65）抗原血症检测与其它检测HCMV方法相比，可以早期、快速、准确的检测出肝、肾移植术后病人巨细胞病毒感染，为临床抗病毒治疗提供依据，使HCMV病的发生率明显降低。

更昔洛韦治疗异基因脐血移植术后受者巨细胞病毒抗原血症的研究

目的 研究更昔洛韦 (丽科伟 )对异基因脐血移植术后受者巨细胞病毒抗原血症的临床疗效和不良反应 ,探讨预防巨细胞病毒相关性间质性肺炎的理想用药时机及方法。 方法 12例异基因脐血移植受者 ,在移植后出现CMV Ag阳性 ,即给予更昔洛韦治疗 ,诱导治疗 5mg/ (kg·次 ) ,IV ,q 12h ,用药 2周 ,维持治疗 5mg/ (kg·d) ,IV ,qd ,每周用药 5d ,疗程 2～ 3周。 结果 对CMV Ag阴转比例 11/ 12 ;不良反应主要有胃肠不适、肝功能轻度异常 ,且不良反应均在停药后顺利恢复 ,无白细胞减少。 2例治疗前白细胞和血小板持续下降 ,在治疗后白细胞和血小板逐渐恢复正常。 结论 更昔洛韦治疗异基因脐血移植术后受者巨细胞病毒抗原血症的疗效肯定 ,不良反应轻微 ,可作为CMV IP的预防用药。

病毒抗原血症检测方法诊断活动性HCMV感染

人类巨细胞病毒（HCMV）常在免疫缺陷或免疫受抑制的病人中引起活动性感染，表现为多种临床症病，具有较高的病死率。HCMV抗原血症检测方法具有准确性高、技术简便、可快速诊断并具有定量分析的特点，是目前临床诊断活动性HCMV感染的一种重要方法。本文综述了对外周血白细胞应用单克隆抗体技术和免疫染色方法进行HCMV抗原检测以诊断活动性HCMV感染的方法和可能的质量监控手段。

误诊为湿疹的乙型肝炎抗原血症的临床疗效观察

乙型肝炎抗原血症是由乙型肝炎抗原引起的变态反应综合征，其皮疹表现多样。临床实践中经常容易误诊。我科收治1例误诊为湿疹的乙型肝炎抗原血症，经系统治疗效果良好。现报道如下。1资料与方法1．1临床资料患者女，38岁，因面部肿胀，周身起红斑丘疹，痒3d于2016年2月23日入院。患者3d前无诱因面部弥漫肿胀，无明显自觉症状，周身起多处红斑、丘疹，瘙痒剧烈。皮疹逐渐加重。

巨细胞病毒糖蛋白在骨髓移植术后抗原血症中的临床意义

目的比较人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)糖蛋白B(glycoprotein B,gB)、IE和pp65抗原检测,探讨HCMVgB检测的应用价值。方法检测92份异基因造血干细胞移植术后白细胞样本中的HCMV gB、即刻早期(immediate-early,IE)和磷蛋白65(phosphoprotein 65,pp65)抗原,并按移植术后时间进行分组,分析gB抗原检测在监测HCMV感染中的意义。结果 HCMV gB抗原与pp65和IE抗原检测均呈正相关,其阳性率(82.6%)和pp65抗原阳性率(90.2%)差异无显著意义(P=0.065),但比IE抗原阳性率(92.4%)低(P=0.035)。三种抗原检测阳性率在移植术后1年内无显著差异;而在移植术后时间长于1年的标本中,gB阳性率低于IE和pp65阳性率(P=0.005),并且在gB阴性而IE或pp65阳性的标本中,IE或pp65阳性值处于一个较低的范围(1～6/5×10~4WBC)。结论 HCMV gB对移植术后早期诊断感染有潜在的价值,并可能是一个提示病毒感染能力的指标;在对长期随访病人HCMV感染的监测中,gB可能是较pp65和IE更合适的指标。

异基因造血干细胞移植后巨细胞病毒抗原血症检测指导巨细胞病毒感染的防治

人巨细胞病毒感染及巨细胞病毒疾病是异基因造血干细胞移植后的常见并发症 ,巨细胞病毒性间质性肺炎是移植后巨细胞病毒疾病的主要类型 ,如未能及时检出和救治则病死率极高。为探讨采用免疫组化法测定人巨细胞病毒的方法学 ,指导临床治疗 ,我们采用免疫组化法对 4 5例(慢性粒细胞白血病 2 3例 ,急性髓性白血病 7例 ,急性淋巴细胞白血病 6例 ,骨髓增生异常综合征4例 ,非何杰金氏淋巴瘤 3例 ,再生障碍性贫血 2例 )进行造血干细胞移植后巨细胞病毒抗原血症的检测 ,并与巨细胞病毒血清学检测进行了对比。 4 5例中 38例患者进行了异基因外周血干细胞移植 ,2例骨髓移植 ,5例外周血与骨髓共移植。移植前 ,对供 受者均进行巨细胞病毒抗体检查 ;移植后 ,受者采用本方法进行抗原检查。结果表明 ,有 2 5例患者发生巨细胞病毒相关性间质性肺炎 ,移植后随访时间为 6 - 2 8个月 (平均时间为 18个月 ) ,根据巨细胞病毒检测结果进行预防性治疗的患者预后较未进行预防性治疗的患者有明显差异。预防组巨细胞病毒相关的死亡率为 1 2 9,未预防组为 12 16。提示采用免疫组化法对异基因造血干细胞移植患者进行定期随访监测可更早期、快速的检出巨细胞病毒感染 ,对患者预后有重要意义。

PP65抗原血症检测法在发热患儿巨细胞病毒感染中的诊断价值

目的探讨低基质磷酸化蛋白（PP65）抗原血症检测法（AA法）对发热患儿巨细胞病毒（CMV）感染的诊断价值。方法对128例发热患儿（发热时间7～14d）采用间接免疫荧光染色法检测PP65抗原血症、酶联免疫吸附法（ELISA）检测抗CMV抗体（CMV—IgM）、尿光镜找包涵体等三种方法平行检测128例血标本和尿标本。结果PP65抗原血症、CMV—IgM、尿找巨细胞包涵体的阳性检出率分别为17．2％、8．6％、6．3％。PP65抗原血症与CMV—IgM及尿找巨细胞包涵体的阳性符合率分别为50％（11／22）、36％（8／22）。19例患儿随着病情好转，PP65抗原血症水平从阳性转为阴性，另3例临床痊愈时复查PP65仍为阳性，其中2例2周后复查PP65转为阴性，1例3周后复查转为阴性。结论PP65抗原血症检测法对CMV活动性感染具有早期诊断的意义，可以检测病情变化、指导早期干预治疗。

HIV-1感染各阶段P24抗原血症,P24抗体血症及中和抗体的相互关系

我们在149例同性恋男性和36例 AIDS病人中进行了双盲试验以研究 HIV-1抗原(Ag)血症,中和抗体(Nbb)和 P24抗体在HIV-1感染时相互之间的关系。全部 AIDS病人和68%(101/149)同性恋男性为 HIV-1阳性,48例(32%)同性恋 HIV-1阴性。在两年的观察中有3例血清转为阳性,这3例病人过去连续追综取样的血清学回顾性研究表明,他们有一个早期的一过程 P24Ag 血症,它出现在 NAb 和 P24Ab 产生之前。

pp65抗原血症检测法诊断婴儿巨细胞病毒感染的研究

目的 探讨pp6 5抗原血症检测方法 (AA)对新生儿和小婴儿巨细胞病毒 (CMV)感染的诊断价值。方法 对 2 1例有典型CMV感染症状患儿及 42例无典型症状的患儿 ,进行外周血AA、尿PCR及血清ELISA法IgM检测 ,比较 3种方法的检测结果 ,结合抗原血症的量化结果及对部分患儿的短期随访 ,分析AA的临床应用价值。结果 (1) 6 3例中CMV症状性感染 15例 ,亚临床型感染 8例。症状性感染组AA、PCR、ELISA阳性检出率分别为 93% (14/ 15 )、10 0 % (15 / 15 )和 80 % (12 / 15 ) ;亚临床型感染组阳性检出率分别为 5 0 % (4/ 8) ,75 % (6 / 8)和 38% (3/ 8)。AA相对于PCR的敏感性为 86 %(18/ 2 1) ,特异性为 10 0 %。 (2 )症状性感染通常伴高水平抗原血症 [(4～ 2 0 6 )个 / 1 5× 10 5多形核白细胞 (PMNL) ],亚临床型感染通常抗原血症水平较低 [(0～ 3)个 / (1 5× 10 5)PMNL],症状性感染组抗原血症水平明显高于亚临床型感染组 (P <0 0 1)。 (3)症状性感染组中 4例婴儿肝炎患儿恢复期AA转为阴性或低水平。结论 pp6 5抗原血症检测方法是一种敏感、特异的检测方法 ,量化结果有助于诊断活动感染及监测病情。

pp65抗原血症监测异基因造血干细胞移植受体CMV的感染

人巨细胞病毒（cytomegalovirus，CMV）感染是异基因造血干细胞移植（Allo-HSCT）术后重要并发症和首位感染性死亡原因。若不加以预防或治疗，12％～20％的Allo-HSCT患者术后会发生严重的CMV感染，病死率〉85％。

自身免疫病和非自身免疫病患者巨细胞病毒抗原血症检测及抗病毒治疗后复检观察

目的分析自身免疫病和非自身免疫病患者巨细胞病毒（CMV）抗原血症检测及抗病毒治疗后复检结果。方法回顾性分析2008年5月至2012年2月北京协和医院门诊及住院疑似CMV感染的5325例患者的6471份外周血CMVpp65抗原检测资料。外周血白细胞内CMVpp65抗原检测采用Brite试剂盒和间接免疫荧光法，阳性定义为CMV活动性感染。结果CMVpp65抗原血症阳性共948份，阳性率为14．6％（948／6471）。13种自身免疫病患者CMV抗原血症平均阳性率为34．9％（670／1922），其中系统性红斑狼疮高达52．4％（551／1052）；与CMV感染可能相关的12种非自身免疫病患者CMV抗原血症平均阳性率仅为6．1％（144／2367），但其中呼吸衰竭或急性肾衰竭、获得性免疫缺陷综合征（AIDS）和肾移植术后3个高危病种的CMV抗原血症平均阳性率为17．3％（27／156）。CMV抗原血症阳性经抗病毒治疗后进行1次及以上复查的患者共189例，64例（33．9％）阴转。结论自身免疫病患者已取代AIDS和肾移植术后等传统免疫抑制患者，成为CMV活动性感染的高危人群；抗病毒治疗后复检CMV抗原血症阴转率较低。

巨细胞病毒pp65抗原血症检测

目的 评估巨细胞病毒 (CMV) pp6 5白细胞抗原血症在骨髓移植或外周血干细胞移植后活动性CMV感染早期诊断和CMV病的预测、指导CMV亚临床期感染的抗病毒治疗及抗病毒疗效判断中的价值。方法 1999年 9月～ 2 0 0 0年 4月共收集 2 10份乙二胺四乙酸 (EDTA)抗凝血 ,骨髓移植或外周血干细胞移植患者 36例。移植前用ELISA法检测患者CMV特异性抗体IgG和IgM ,移植后 3周起采用CMVBrite试验盒每周检测 1次CMV pp6 5抗原血症 ,并计数抗原阳性细胞 ,直到移植后 10 0d或治疗后抗原阴转、死亡或出院。移植后患者第 1次检测到 pp6 5抗原阳性细胞即开始更昔洛韦抗病毒治疗。结果 36例骨髓移植或干细胞移植患者于移植前CMV特异性抗体IgG均阳性 ,IgM均阴性 ;移植后 16例出现CMVpp6 5抗原血症 ,其中 15例出现有症状的CMV感染或CMV病 ,14例接受更昔洛韦抗病毒治疗 ,12例治疗后抗原血症阴转、症状消失 ,死亡 2例 (病死率 14.2 % ) ,未经抗病毒治疗者 2例均死亡 (P <0 .0 1)。 16例 pp6 5抗原阳性患者中 ,仅 2例CMV特异性抗体IgM阳性。 10名健康对照组的CMV特异性抗体IgG均阳性 ,IgM均阴性 ,pp6 5抗原血症检测均阴性。结论 本研究结果提示 ,人CMV pp6 5白细胞抗原血症检测可作为骨髓移植后CMV病的预测指标 。