小鼠小肠上皮内淋巴细胞的提取与抗原表型测定和功能的初步研究

目的 :建立一种提取小肠上皮内淋巴细胞的方法 ,并对其功能进行初步研究。方法 :采用机械分离法和Percoll非连续密度梯度离心法提取小鼠小肠上皮内淋巴细胞 ,经间接荧光染色后用流式细胞仪检测表型。应用乳酸脱氢酶法检测其自然杀伤功能。结果 :应用该法可获得小鼠小肠上皮内淋巴细胞 2× 10 6 ～ 4× 10 6 只鼠 ,活力测定 >95 %。抗原表型中73 8%以上表达CD8分子 ,TCRγδ为 43 8%。而且自然杀伤活性明显高于小鼠脾淋巴细胞。结论 :表明采用该法提取小鼠小肠上皮内淋巴细胞有效。

孕产妇Rh抗原表型分布及其在Rh新生儿溶血病预防中价值探讨

目的通过对孕妇Rh抗原表型分布及新生儿Rh表型、新生儿溶血病试验、红细胞不规则抗体特异性鉴定及效价测定进行回顾性分析,为Rh新生儿溶血病(Rh-HDN)早期诊断提供实验依据。方法对南京医科大学附属无锡人民医院2018年5月至2020年9月用Rh分型微柱凝胶卡测定的8801例孕产妇Rh表型结果进行统计,并对同期12例Rh-HDN患儿的Rh分型、新生儿溶血3项试验检测结果进行分析。结果8801例孕产妇中,RhD阳性为8760例、阴性41例。RhD阳性孕产妇表型分布规律为:CCee(40.93%)>CcEe(38.3%)>Ccee(10.32%)>ccEE(5.26%)>ccEe(3.61%)>CCEe(0.87%)>CcEE(0.39%)>ccee(0.32%),CCDEE未检出;RhD阴性孕妇中Rh表型分布为,Ccee(43.93%)>ccee(36.6%)>CCee(7.3%)=ccEe(7.3%)>CcEe(4.87%)。新生儿溶血试验共检出Rh血型特异性抗体12例:抗-D 8例,抗-E 3例,抗-c1例,D抗原以外抗体占总检出抗体33.3%。结论Rh抗原表型检测纳入常规产前检查对预测Rh-HDN发生有一定价值。对有输血史、不明原因流产史、死胎、HDN既往史的孕产妇,有必要对夫妻双方进行Rh抗原表型检测。孕期连续监测不规则抗体效价,为预防胎儿发生Rh-HDN提供早期干预依据。

孕产妇Rh抗原表型分布及其在Rh新生儿溶血病预防中价值探讨

经分析孕妇Rh抗原表型分布、新生儿Rh表型、溶血病试验等情况,为Rh新生儿溶血病早期诊断给予可靠信息支持。方法 经本院伦理委员会审核批准后实施此研究,专项选择2020年1月~2021年12月5000例孕产妇Rh表型结果进行记录(予以Rh分型微柱凝胶卡测定),分析12例Rh-HDN(Rh新生儿溶血病)患儿的Rh分型、新生儿溶血检测结果展开研究。结果 5000例孕妇中,RhD阳性为4960例,40例为阴性。Rh表型分布为CCee>CcEe>Ccee>ccEE>ccEe>CCEe>CcEE>ccee,而CcEe、CCee为优势表型;40例阴性孕妇Rh表型分布为Ccee>ccee>CCee>ccEe>CcEe,而优势表型为ccee及Ccee;Rh-HDN新生儿表型分布情况分析:其中CcDEe、CCDee、CcDee、CcDee、ccDEE分别为4、1、5、1、1例,依照比例从高到低分别为41.67%、33.33%、8.33%、8.33%、8.33%。结论 对产妇实施Rh抗原表型检测时,可有效地预测Rh-HDN疾病发生率,可减少对新生儿身体造成的伤害情况;针对存在流产史、输血史等情况的产妇,需要对其整个孕期实施抗体效价检测,同时对夫妻双方都实施Rh抗原表型检测,才能尽早地对Rh-HDN疾病进行监测并采取有效措施预防,提升新生儿生存质量,保障产妇和新生儿的生命安全。

Rh抗原表型检测和不规则抗体筛查对孕产妇的临床意义

目的:对孕产妇Rh血型抗原表型分布特征及不规则抗体检测结果进行分析,探讨其与新生儿溶血病(HDN)之间的关系。方法:选取2019年5月—2020年6月申请备血的孕产妇5550例为研究组,同期申请备血的男性患者3455例为对照组。采用微柱凝胶法对2组患者血样进行Rh抗原表型检测及不规则抗体筛查。收集孕妇分娩新生儿血液检测Rh抗原表型,记录Rh新生儿溶血病(Rh-HDN)发生情况。结果:9005例患者血样中检测出13种Rh血型表现型,以CCDee(45.39%)和CcDEe(34.31%)为主。研究组检测出30例(0.54%)Rh血型抗体阳性,对照组检测出1例(0.03%)Rh血型抗体阳性。孕产妇Rh系统抗体的检出率显著高于男性(P<0.05)。引起Rh-HDN的抗体中,抗E抗体(60%)占比最大。结论:孕产夫妻的Rh抗原分型检测及孕妇不规则抗体筛查,可以为HDN的临床治疗提供依据及指导临床安全输血。

人卵巢上皮癌组织中树突状细胞表型抗原的免疫组织化学研究

目的 :观察人卵巢上皮癌中CD1c、S 1 0 0树突状阳性细胞数和表达强度及癌局部微环境中细胞表型抗原的变化 ,探讨其与卵巢上皮癌发生、发展的关系 ,为临床生物治疗提供实验依据。方法 :采用ABC免疫组织化学技术和图像分析。结果 :在卵巢上皮癌中 ,CD1c+ 、S 1 0 0 + 细胞数明显减少 ,与正常卵巢组织相比较具有显著性差异 ,与临床分期和病理分级无关 ;卵巢上皮癌中D1c、S 1 0 0阳性细胞表达强度与正常卵巢组织相比较明显减弱 ,具有显著性差异 (P <0 .0 1 ) ,与临床分期和病理分级相关。结论 :人卵巢上皮癌局部微环境中 ,树突状细胞表型抗原表达总量下降 ,说明树突状细胞在抗卵巢上皮癌的免疫应答中具有重要作用。

意外抗体阳性患者Rh表型分布及Rh表型匹配输血效果

目的 探究意外抗体阳性患者Rh表型分布及Rh表型匹配输血效果。方法 回顾性收集平顶山市某综合性三级医院2018年3月至2022年3月收治的4 982例住院患者输血信息,其中106例意外抗体筛查阳性患者,对此患者血样行Rh抗原分型并进行意外抗体类别鉴定。统计106例患者意外抗体类别及Rh表型分布,评估其中39例Rh表型为CCDee且经Rh表型匹配输血患者的输血效果。结果 106例抗体筛查阳性患者,Rh表型主要为CCDee(74.53%),CcDEe、ccDEE、CcDee占比较小,ccDEe占比最小,仅1例(0.94%)。39例患者输血24 h后复查血常规,其中36例每输注2单位红细胞制品血红蛋白提高10 g·L^(-1)及以上,有效输血率为92.31%(36/39)。3例[7.69%(3/39)]患者发生溶血性输血不良反应。结论 意外抗体阳性患者中Rh血型系统的意外抗体占比最高,Rh表型中CCDee占比最高。Rh表型匹配输血效果较好。

喉咽癌树突状细胞表型抗原表达

目的对喉咽癌中树突状细胞(Dendriticcells,DCs)的表型抗原的表达进行研究,探讨DC表型抗原的表达与喉咽癌各临床因素尤其是转移和预后的关系。方法对45例喉咽癌标本,用EnvisionHIS的方法检测DC的表型抗原S-100、CD1a、CD83的表达,并观察CD45RO+T细胞与DC的关系。结果S-100+DCs在高分化组以及生存组中的数目明显多于中低分化组及死亡组,具有显著性差异。CD83+DCs的表达与喉咽癌的分化程度、远处转移、生存以及是否复发有关,差异具有显著性;CD83+DCs在癌巢中的数目较癌旁中的少,差异具有显著性。CD1a+DCs的表达与喉咽癌的各临床因素间未发现明显相关性。CD45RO+T细胞主要分布在CD83+DCs的周围。结论表达不同表型抗原的DC具有不同的功能,CD83+DCs被认为是成熟DC分布在癌旁与其激活T细胞的抗原提呈功能有关,对于肿瘤免疫防御机制的建立起着重要作用。DC在喉咽癌中的浸润程度及表型抗原的表达情况是反映宿主肿瘤免疫状况的重要指标,也是预测喉咽癌转移和预后的一项重要指标。

微量梯形板在Rh表型抗原自动化检测中的应用

目的:探讨微量梯形板在Rh表型抗原自动化检测中的应用效果。方法:在Xantus双机械臂加样仪及AK03B数字血型仪组成的全自动血型检测平台上,每批布局8块微量梯形板,每块微板检测24份血样。编制加样程序,优化相关检测参数,同时检测1 198份随机献血者血样及5份Rh(D)阴性固定献血者血样的Rh表型抗原(C、c、D、E、e)。结果:在被检血样红细胞稀释浓度为2%、5种检测试剂(Ig M抗-C、c、D、E、e)分别稀释20倍(最终效价为1∶6.4)、室温静置反应时间为40 min等条件下,与试管法比较,1 203份血样Rh表型自动化检测结果符合率为100%。结论:微量梯形板用于Rh表型抗原检测可以实现自动化,适用于大批量标本检测。该方法具有快速准确、试剂耗量低、结果便于电脑统计管理等优点。

不同基因型Rh抗原反应性及对低效价抗体鉴定的差异性比较

目的明确Rh血型抗原的剂量效应,探讨不同基因型的Rh抗原与抗体的反应性差异。方法采用经典的微孔板―酶标仪微量法检测无偿献血者的Rh血型抗原。结果 1)各抗原阳性时凝集强度在各个基因型中存在差异显著性,CC、cc、EE、ee等纯合子基因抗原,比Cc,Ee杂合子基因抗原时抗原对抗体血清的凝集反应要强。2)低效价抗体检测时漏检最多为杂合子基因型抗原,多为c和C抗原。结论 RHCE基因形成的抗原组合成CC、cc、EE、ee等纯合子基因抗原时,比Cc,Ee杂合子基因抗原时抗原对抗体血清的反应要强,对低效价抗体的检测也更敏感。

广州地区RhD阴性献血人群中ABO血型及抗原分布研究

目的:探讨广州地区RhD阴性献血人群中ABO血型及抗原表型与表位分布情况。方法:选取广州血液中心2017年1月-2019年12月经血型仪法初筛RhD阴性样本1 428例,应用间接抗人球蛋白试验(IAT)进行确认,同时确定RhD阴性献血者ABO血型及抗原表型的分布情况。结果:在1 428例初筛为RhD阴性的样本中,经IAT确认为RhD阴性1 374例(96.22%),D变异型54例(3.78%)。RhD阴性献血人群中血型A型398例(28.97%),B型371例(27.00%),O型426例(31.00%),AB型179例(13.03%)。确认为RhD阴性分型分布为ccee 774例(56.33%)、Ccee 396例(28.82%)、ccEe 89例(6.48%)、CCee 95例(6.91%)、CCEe 4例(0.29%)、CcEE 3例(0.22%)、CcEe 13例(0.95%);RhD阴性献血者的抗原表位中e抗原分布有1 371例,c抗原1 275例,C和E抗原分别为511例和109例。结论:广州地区RhD阴性献血人群中O型血型占比最高,A、B型血型次之,AB型血型占比最低;RhD阴性抗原表型分布以ccee为主,RhD阴性抗原表位以e、c的抗原为主。

新乡地区无偿献血者ABO及RhD阴性表型分布

目的了解新乡地区无偿献血者中Rh D阴性献血者ABO血型及Rh D阴性表型分布情况,不断完善Rh D阴性献血者资料库,保障临床用血安全。方法对新乡地区2010年1月—2015年3月Rh D阴性献血者ABO血型分布、Rh D阴性献血者抗原表型分布及Rh D阴性血液临床使用情况及血液报废情况进行回顾性统计分析。结果新乡地区无偿献血者Rh D阴性率为0.50%,ABO血型分布构成比从高到低依次是B(33.19%)>O(29.37%)>A(27.29%)>AB(10.15%),不同血型间差异有统计学意义(P<0.01)。611份Rh D阴性献血者抗原表型分布特征为dccee>d Ccee>dcc Ee>d CCee>d Cc Ee>dcc EE,不同抗原表型间差异有统计学意义(P<0.01)。结论通过对新乡地区2010年1月—2015年3月无偿献血者ABO血型及Rh D阴性表型分布进行统计分析,有针对性地制定招募方案,同时完善了Rh D阴性献血者表型分型档案库,为临床用血者提供Rh D表型相合的血液,对临床输血的安全性和有效性意义重大。

番禺地区无偿献血人群中Jk(a-b-)表型的筛选与研究

目的研究番禺地区献血人群中Jk(a-b-)表型的分布特点。方法用2mol/L尿素攻膜试验(96孔微量板法)筛选出阴性(不溶血)样本,然后作血清学表型鉴定,对Jk(a-b-)表型进行基因分型及基因组DNA编码区外显子4-11及其侧翼区的分段扩增和测序。结果从本站2004年6月-2006年8月献血的50034名汉族人中筛选出10例Jk(a-b-)表型,频率为0.02%;发现3种突变序列:1)Intron5:3'剪切位点AG>AA,Exon7:nt588A>G、AA196CCA(Pro)>CCG(Pro),推测基因型为JKb(△6)/JKb(△6);2)Exon5:nt222C>A、AA74AAC(Asn)>AAA(Lys),Exon7:nt536C>G、AA179CCT(Pro)>CGT(Arg),Exon7:nt588A>G、AA196CCA(Pro)>CCG(Pro),推测基因型为JKb(222A)/JKb(536G);3)Intron5:3'剪切位点AG>AA,Exon7:nt499A>G,AA167ATG(Met)>GTG(Val),Exon7:nt588A>G、AA196CCA(Pro)>CCG(Pro),推测基因型为JKb(△6)/JKb(499G)。结论在番禺地区献血人群Jk(a-b-)表型查中发现的Exon7:nt499A>G和Exon7:nt536C>G2种突变为首次报道。

漳州地区孕妇Rh血型血清学分析与不规则抗体检测的临床意义

目的回顾并分析福建省漳州地区孕妇Rh血型血清学及红细胞不规则抗体检测结果,为建立和完善本地区产科安全输血和新生儿溶血病诊疗的临床资料提供实验依据。方法选择2020年1月1日—2022年12月31日在漳州市公立医院就诊的36496例孕妇作为研究对象,采用微柱凝胶法进行Rh血型抗原检测和不规则抗体筛查与鉴定,并对其结果进行统计学分析。结果36496例孕妇中,Rh(D)阳性36105例,阴性391例。检测出Rh血型系统的5种主要抗原的阳性率分别为D抗原98.93%,e抗原91.64%,C抗原87.12%,c抗原57.89%,E抗原48.22%。14种Rh血型表型阳性率从高至低排序前5位为DCCee(41.42%)、DCcEe(35.49%)、DCcee(8.94%)、DccEE(8.14%)、DccEe(3.71%);检出不规则抗体150例,其中二孩孕妇组检出率明显高于首次妊娠组(0.72%比0.03%,P<0.05),二孩孕妇组检出123例为Rh血型系统抗体,占比明显高于首次妊娠组(0.61%比0.02%,P<0.05)。结论做好二孩孕妇Rh血型表型检测和Rh血型抗体检测对指导产科科学用血,提高输血疗效和减少输血不良反应有重要意义,也可以作为二孩新生儿溶血病的预测、防范和救治的重要依据。

人卵巢癌细胞特异CTL系的免疫学特性初步研究

目的 探讨人卵巢癌细胞体外刺激、诱导的肿瘤特异细胞毒性T淋巴细胞 (CTL)对靶细胞的杀伤活性。方法 应用建株的人卵巢癌细胞 (OVA 319) ,在体外定期刺激、诱导肿瘤患者外周血淋巴细胞 ,经微量淋巴细胞毒试验和流式细胞术分别测定扩增的淋巴细胞组织相容性白细胞抗原 (HLA)I类分子表型和膜表面免疫标志物 ,并通过 4 甲基偶氮唑盐 (MTT)法分析其对肿瘤细胞的杀伤活性。结果 经卵巢癌细胞刺激、诱导 3周后扩增的淋巴细胞主要为T细胞抗原受体 (TCR) α、β及CD8阳性的CTL ,具有明显特异性杀伤肿瘤细胞的作用 ,并发现经OVA 319细胞刺激、诱导后不同个体的卵巢癌患者CTL的杀伤活性与效靶细胞的HLA A、B位点相同数成正比。结论 肿瘤细胞体外激活的CTL具有特异杀伤靶细胞作用 ,提示CTL特异杀伤作用与刺激细胞、靶细胞及本身CTL表型的HLA A。

冠状病毒检测新方法及其在其他病原体检测中的应用前景

冠状病毒与人和动物的许多疾病有关。迄今至少已发现了13个种属多个抗原表型的冠状病毒，其中人冠状病毒包括HCoV OC43和HCoV 229E两个抗原型，是引起人类上呼吸道感染的重要病原体。2003年严重急性呼吸系统综合症(Severe Acute Respiratory Syndrome，SARS)在中国和世界上其他国家爆发流行，其病原体SARS相关冠状病毒(SARS-CoV)作为新的病毒亚种引起了社会的广泛关注。

多参数流式细胞仪在检测急性髓系白血病微小残留病灶中的运用

急性髓系白血病（AML）并非是一种单一的疾病,而是一组具有不同形态学、免疫表型、细胞遗传学和分子生物学特征的异质性、克隆性造血干/祖细胞疾病。通过化疗能使大部分AML患者缓解,完全缓解（CR）率达50%~80%[1],但仍有约65%的患者最终在3~5年内复发,提示目前的治疗方案尚不能完全清除体内的病变细胞,而这些残留的白血病细胞,即微小残留病灶（MRD）,是最终复发的根源[2-3]。

降低不规则抗体对输血安全影响的相关性分析

随着输血医学的发展,人们逐渐认识到血型不规则抗体对输血安全和输血疗效所产生的影响,其不仅干扰ABO血型的鉴定,还可引起溶血性输血不良反应的发生和输注无效。因此,对有输血史、妊娠史及短时间内需要反复输血患者常规做不规则抗体筛查,可以有效降低输血不良反应的发生。

无偿献血者ABO及RhD血型分布特征分析

目的探讨无偿献血者ABO及RhD血型分布特征,为合理安排供血、建立血型库提供科学依据。方法选择我站2019年1月1日—12月31日期间无偿献血者41297名的血液标本,采用QWALYS 3全自动血型分析仪进行检测,明确血液标本的ABO、Rh抗原表型、基因频率,分析ABO表型观察值、期望值,RhD血型分布及Hardy-Weinberg吻合度检验结果。结果无偿献血者ABO血型分布观察值与期望值比较差异无统计学意义(P>0.05),符合Hardy-Weinberg吻合度,其中ABO血型系统基因频率r>q>P,表型特征O>B>A>AB;无偿献血者RhD血型阴性0.35%,以CCDee、CcDE多见,且分布符合Hardy-Weinberg吻合度(P>0.05)。结论漳州地区无偿献血者ABO及RhD血型分布特征基本符合Hardy-Weinberg群体基因平衡,研究结果可作为合理安排供血、建立稀有血型库的可靠依据,并为血液储备提供依据。

贵州省毕节地区献血人群CD36抗原筛查和基因型鉴定

目的筛查贵州省毕节地区献血者CD36抗原频率并对缺失型的基因型进行鉴定。方法收集2017年由毕节血站提供的934例献血者标本,其中包括汉族、彝族、穿青人、白族等16个民族。应用流式法对血小板和单核细胞上CD36抗原进行检测。提取CD36抗原缺失者DNA,采用PCR-SBT法对3-14外显子进行测序检测并分析。结果毕节献血人群中CD36抗原表达异常频率为5.56%(52/934),其中36例血小板上的CD36抗原表达量较低;16例在血小板上无表达,缺失频率为1.71%(16/934),其中汉族13例,缺失频率为1.84%(13/708),彝族1例,缺失频率为1.52%(1/66),穿青人1例,缺失频率为1.61%(1/62),仡佬族1例,缺失频率为9.1%(1/11)。其中6例为Ⅱ型缺失(即仅在血小板上无表达),2例为Ⅰ型缺失(即血小板和单核细胞上均无表达),Ⅰ型、Ⅱ型缺失表达的频率分别约为0.42%、1.28%。PCR-SBT法分析显示,16例血小板CD36抗原缺失标本的CD36基因型中,5例未发现异常,5例为329-330 del AC,2例为1228-1239 del ATTGTGCCTATT,2例为C681A,发现的突变还有C380T、771delT、T879C、C1123T、C1156A。结论毕节为多民族地区,献血人群中血小板CD36抗原表达具有多样性,且具有民族差异性。