雷公藤多甙治疗抗原诱导性葡萄膜视网膜炎的临床及实验研究

目的 观察雷公藤多甙防治抗原诱导性葡萄膜视网膜炎(antigen-induceduveore-tinitis,AIU)的临床效果,并探讨免疫学机制。方法 使用牛S抗原和福氏完全佐剂的混合乳剂免疫大鼠14d后,将S抗原接种于玻璃体腔,建立AIU动物模型。实施雷公藤多甙治疗方案,观察其对实验动物的眼部临床表现、病理组织学、血清抗体效价、淋巴细胞增殖反应以及抗原特异性迟发型超敏反应(delayed-typehypersensitivity,DTH)的影响。结果 对照组炎症持续时间平均为12.90d,雷公藤治疗组为7.63d(P<0.01),对照组抗体滴度平均为1∶8～1∶16,雷公藤治疗组为1∶4,受ConA和S抗原刺激的淋巴细胞增殖反应对照组平均为0.68OD和0.84OD,雷公藤治疗组为0.49OD(P<0.01)和0.67OD(P<0.01),对照组DTH平均为1.75mm,雷公藤治疗组为0.66mm(P<0.01)。结论 雷公藤可下调AIU的细胞免疫和体液免疫,具有潜在的应用价值。

抗原诱导关节炎兔关节内注射^(153)钐-柠檬酸-羟基磷灰石的生物学分布及病理学变化

目的 :研究兔关节内注射放射性核素1 53 钐 -柠檬酸 -羟基磷灰石 (1 53 Sm -citrate -HA)制剂的生物学分布及病理学变化。方法 :将 30只新西兰大白兔分为 4组 ,其中 2 4只制作成抗原诱导关节炎 (antigeninducedarthritis,AIA)模型 (AIA兔 )。A组为正常兔 6只 ,B组AIA兔 1 2只 ,2组膝关节腔内注射1 53 Sm -citrate -HA 3.7× 1 0 7Bq后分别于第 3d、第 6d显像 ,用SPECT获得放射性计数并计算核素在关节内滞留率及生物学分布、漏出率。C、D组均为AIA兔 6只 ,C组不做任何治疗 ,D组关节腔内注射1 53 Sm -citrate-HA 3.7× 1 0 7Bq ,2组观察 30d后取滑膜、软骨行病理学观察。结果 :A、B组关节腔内核素的滞留率分别为 (97.7± 1 .2 ) % (3d)、(93.5± 0 .9) % (6d)和 (98.4±1 .4 ) % (3d)、(95 .1± 0 .5 ) % (6d)。关节外漏出率分别为 0 .1 7% (3d)、0 .31 % (6d)和 0 .0 7% (3d)、0 .0 9% (6d)。病理学观察 :D组较C组滑膜炎症明显好转 ,关节软骨未发现损害。结论 :1 53 Sm -citrate-HA漏出率低 ,关节内分布均匀且滞留率高 ,疗效肯定 。

角膜可溶性抗原诱导前房相关性免疫偏离的实验研究

①目的 建立兔前房相关性免疫偏离 (ACAID)诱导模型。②方法 采用甘氨酸法制备可溶性角膜分类抗原 ,分组行兔前房注射诱导ACAID ,并观察各组耳膨胀试验和脾脏病理学检查结果。③结果 角膜上皮、内皮、基质及全角膜可溶性抗原皆可诱导ACAID ,诱导质量浓度为 2 .0 g/L .成功率分别为 90 % ,10 0 % ,80 %和 10 0 % .④结论 角膜可溶性抗原可以诱导产生ACAID .

卵巢癌细胞系SKOV3冻融抗原诱导CTL特异性杀瘤效应的研究

目的探讨卵巢癌冻融抗原对T淋巴细胞的增殖作用及其诱导的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)在体外杀伤卵巢癌细胞的抗原特异性细胞毒性效应。方法采用免疫磁珠分离法(magneticactivatedcellsorting,MACS)分离纯化正常人外周血CD+3T细胞,体外以SKOV3卵巢癌细胞中提取的可溶性肿瘤抗原加以刺激。溴标法检测肿瘤抗原对T细胞增殖的影响;MTT法测定肿瘤抗原诱导的CTL体外杀伤卵巢癌细胞的能力;利用绒毛膜癌细胞抗原对比观察肿瘤抗原诱导CTL杀伤肿瘤细胞的抗原特异性。结果卵巢癌细胞抗原有很强的促进T淋巴细胞增殖的作用,且存在时间依赖性,在24h时促进作用最强。SKOV3抗原诱导的CTL在体外对SKOV3细胞的杀伤率为68.38%,显著高于它对JAR绒毛膜癌细胞的杀伤率(18.31%);而JAR细胞抗原诱导的CTL对JAR和SKOV3细胞的杀伤率分别为61.02%和14.79%,有显著的抗原特异性(P=0.0001)。结论卵巢癌细胞冻融抗原诱导的CTL在体外具有很强的增殖能力和抗原特异性杀伤卵巢癌细胞的作用。

构建体外联合培养条件下抗原诱导淋巴细胞反应的抑制模型

目的:观察在体外混合培养条件下,抗原能否诱导外周淋巴细胞反应抑制,建立体外淋巴细胞反应抑制模型。方法:实验于2003-10/2004-04在解放军第四军医大学西京医院心脏外科研究所实验室进行。取健康自愿者新鲜血液用于分离外周淋巴细胞。在体外条件下,以同种异体外周淋巴细胞分作供体和受体进行混合培养,采用四甲基偶氮唑盐比色法、电镜、姬姆萨-瑞氏染色、流式细胞仪检测对照组D组:首次混合培养淋巴细胞(PMLC),即受体淋巴细胞(R)+用丝裂霉素处理过的供体淋巴细胞(DBm)混合培养72h所得,A组(PMLC+DBm)、B组(PMLC+白细胞介素2中和单抗)、C组(PMLC+DBm+白细胞介素2中和单抗)等4组淋巴细胞的活性变化、活性变化的原因及其数量的变化。结果:①4组混合培养淋巴细胞在电镜、显微镜下变化:均可见细胞质染色浓集、核固缩裂解、凋亡小体形成。②四甲基偶氮唑盐比色法检测4组细胞活性即刺激指数:B组和C组比A、D组明显减弱(3.152±0.322,1.802±0.115,4.293±0.269,3.709±0.278,P<0.05);C组细胞活性比B组也明显减弱(P<0.05)。③流式细胞仪检测淋巴细胞凋亡率:单向混合淋巴细胞培养后的T淋巴细胞的凋亡率Bf组和Cf组高于Df对照组和Af组(11.25±0.78)%,(31.65±1.33)%,(5.95±0.24)%,(2.15±0.04)%,P<0.01;

抗原诱导兔关节炎模型的建立及早期磁共振表现

目的建立抗原诱导兔关节炎模型并分析其早期磁共振表现。方法7只新西兰兔采用卵清白蛋白致敏后于右膝关节注射相同抗原进行关节炎动物模型的诱导，观察诱导后第5、15天膝关节磁共振表现并作病理对照。结果6只兔右膝关节炎诱导成功，平扫见关节滑模增生、关节积液增多，T1WI均显示为等或稍低信号，T2WI显示为不均匀高信号，两者不易区分，经Gd—DTPA增强扫描后关节滑膜显示为明显强化而关节积液未见明显强化。与第5天图像比较，关节内注射后15天滑膜增生更明显。组织学观察可见右膝关节滑膜增厚、衬里层细胞的增多，衬里及衬里下层炎性细胞浸润，炎性细胞大多为淋巴细胞、单核细胞和巨噬细胞细胞。结论从发病机理、病理表现及磁共振影像等各方面看，抗原诱导兔关节炎模型都是一种较理想的类风湿关节炎动物模型。

不同抗原诱导后小鼠调节性T淋巴细胞趋化特性动态研究

目的:了解不同抗原诱导下调节性T淋巴细胞表面趋化因子受体表达的情况及在趋化因子CCL20、CCL22引导下T淋巴细胞的趋化行为。方法:用C57BL/6小鼠皮肤抗原、卡介苗或生理盐水诱导BALB/c小鼠,于诱导后1、2、3及4周,用流式检测两组小鼠脾脏单个核细胞悬液中CD4+CD25-T、CD4+CD25+CD127-T细胞表面趋化因子受体CCR4和CCR6表达的动态变化,并用趋化试验观察CCL20、CCL22作用下各CD4+T细胞亚型的趋化特性。结果:1皮肤抗原诱导组CD4+CD25-T细胞表面CCR4表达平均荧光强度在第4周时显著高于第3周,卡介苗诱导组趋化因子受体表达无显著变化;皮肤抗原诱导组CD4+CD25+CD127-T细胞表面CCR4表达平均荧光强度在第4周时最高(P<0.05),卡介苗诱导组趋化因子受体表达无显著变化。2皮肤抗原诱导组CD4+CD25-T细胞表面CCR6表达的平均荧光强度在第2周最高(P<0.05),卡介苗诱导组是第4周最高(P<0.05);皮肤抗原诱导组CD4+CD25+CD127-T细胞表面CCR6表达的平均荧光强度前两周显著高于第3周、第4周(P<0.05),在卡介苗诱导组第2周及第4周比第1周高(P<0.05)。3CCL20趋化下CD4+CD25+CD127-T细胞的趋化指数在卡介苗诱导4周时较高(P<0.05),皮肤抗原诱导2周和4周时升高(P<0.05);CCL22趋化下,卡介苗诱导组与皮肤抗原诱导组CD4+CD25+CD127-T细胞的趋化指数变化均无统计学意义。结论:1提示Treg表面趋化因子受体的表达与抗原性质有关。2诱导早期CCL22对Treg细胞的趋化作用明显,诱导后期CCL20作用明显。

胶原诱导与抗原诱导C57BL/6小鼠类风湿关节炎造模的比较研究

目的通过对C57BL/6小鼠背景下胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)和抗原诱导的关节炎(antigen-induced arthritis,AIA)造模情况的分析,来比较其造模成功率和关节炎进展的差异性。方法将42只小鼠分成两组,一组为CIA,一组为AIA。每组3只作为正常组,18只作为模型组。最后一次造模后定期监测小鼠的体重、膝关节和踝关节直径。结果在C57BL/6背景下,CIA造模成功率不高且严重程度差异大,AIA造模成功率高但维持时间短。结论为了更全面地研究类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)的致病机制,可能更适合在后续的转基因小鼠身上造CIA模型。

MRI对高致敏性小鼠的抗原诱导的肺炎的评价

目的探讨MR质子成像无创性检查抗原诱导的呼吸道炎症小鼠模型血管外及腔内液体的可行性。材料及方法巴塞尔兽医权威机构批准了这项试验。

医院中禁忌种植52种含有“Epsteln-Barr病毒早期抗原诱导物”的促癌植物

中国预防医科院病毒所对植物所含物质的促癌作用进行了研究,从1693种中草药和植物中共检出18个科中的52种植物含有促癌物质。这些植物多属大戟科和瑞香科。实验表明,这些促癌植物中所含有的“Epsteln-Barr病毒早期抗原诱导物”,可以诱导EB病毒对淋巴细胞的转化,并能促进由肿瘤病毒或化学致癌物质引起的肿瘤生长。目前,致癌物质诱发鼻咽癌和食管癌的实验已得到证实,它们不公浑身上下都带“毒”,而且种过此类植物的土壤中都被检测出含有致癌病毒和化学致癌物的激活物质。其中铁海棠、变叶木、乌桕、红背桂花、油桐、金果榄等一些市民家中及公园里常见的观赏性花木均含有促癌物质。

Myc诱导的核抗原通过调控蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白/信号通路促进急性髓细胞性白血病细胞增殖

目的探讨Myc诱导的核抗原(Myc induced nuclear antigen,MINA)在急性髓细胞性白血病(AML)中的表达及其对HL-60细胞的增殖影响及其分子机制。方法研究时间为2021年5月至2023年1月。AML数据集来自癌症基因组图谱(TCGA)。通过TCGA数据库下载AML的临床信息和MINA的表达水平。构建MINA基因的过表达慢病毒载体,通过慢病毒感染,建立稳定MINA基因过表达的人原髓细胞白血病细胞(HL-60)细胞系,通过细胞计数法检测其对细胞增殖的影响;蛋白质印迹法检测MINA对HL-60细胞蛋白激酶B(Akt)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)磷酸化的影响。TCGA数据库分析MINA与mTOR在AML中表达的相关性。结果分析TCGA数据库,结果显示MINA mRNA在AML中表达16.25±0.58明显高于健康对照者10.20±0.29,MINA的表达水平与AML病人预后密切相关,相对于低表达者,高表达MINA的AML癌病人预后较差(HR=2.30,P=0.003)。成功构建稳定MINA高表达的HL-60细胞系,过表达MINA促进HL-60细胞增殖,第6天细胞数过表达组明显高于对照组(P<0.01);过表达MINA可明显增加Akt和mTOR的磷酸化水平,Akt抑制剂哌立福新(Perifosine)可逆转过表达MINA导致的HL-60细胞增殖。MINA与mTOR的表达水平在AML中具有明显的正相关性(r=0.36,P<0.01)。结论MINA在AML病人中高表达,高表达MINA的AML病人预后较差,MINA可能通过调控Akt/mTOR通路促进AML细胞增殖。

阿魏酸钠对大鼠抗原诱导性关节炎的影响

目的:研究阿魏酸钠(SF)对大鼠抗原诱导性关节炎模型(AIA)的影响。方法:选用50只Wistar大鼠作为研究对象,随机选30只建立AIA大鼠模型后分为模型对照组、0.1%及0.5%SF实验组,未造模动物随机分为正常对照组及0.5%SF对照组,每组各10只。各组关节腔注射相应浓度药物或生理盐水0.1ml,每周2次。6周后处死动物,进行大体形态学、组织学、生物化学以及免疫组化的方法评价滑膜及关节软骨的情况。结果:与模型组比较,0.1%、0.5%SF实验组大体观察血管翳形成显著减轻,关节标本病理评分显著降低,滑膜血管内皮生长因子(VEGF)、关节软骨基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)表达率均显著降低。与0.1%SF实验组比较,0.5%SF实验组在病理评分及免疫组化指标降低有显著差异。结论:SF对AIA大鼠滑膜炎症及软骨破坏具有一定改善作用,其作用呈一定剂量相关性,提示阿魏酸钠可用于类风湿关节炎的辅助治疗。

外源性抗原诱导内皮细胞增殖及其MICA分子的表达

MHC—I类相关链A（MICA）位于人类第6号染色体，属于非经典HLA—I类基因家族。抗MICA抗体与肾移植排斥反应相关及影响移植肾长期存活的观点已得到学者的广泛认同。MICA分子在移植物血管内皮细胞表达，特别是在内皮细胞膜蛋白的表达，增加了MICA抗原在移植受者体内成为抗移植物靶目标的可能性。

G145R变异乙型肝炎表面抗原诱导的抗体性质研究

乙型肝炎表面抗原（HBsAg）变异可导致抗原性改变。HBsAga决定簇最常见的变异位点是G145R。G145R变异可能改变原来的抗原表位，并形成新的抗原表位。本研究探讨G145RHBsAg能否刺激机体产生抗体及免疫应答的情况。

胶原抗原肽表位诱导的耐受性抗原递呈细胞对大鼠类风湿关节炎的治疗作用

目的:观察抗原肽表位(CTE)1和CTE2诱导、TGF-β2刺激的抗原递呈细胞(APC)对大鼠类风湿关节炎的疗效。方法:雌性Wistar大鼠32只,分为关节炎组、免疫性细胞组、耐受性细胞组和正常对照组,每组8只。关节炎、免疫性细胞和耐受性细胞组大鼠使用鸡Ⅱ型胶原(CⅡ)加完全福氏佐剂诱导CIA后,分别静脉注射免疫性APC、耐受性APC和Hanks平衡盐溶液(HBSS),1周后观察大鼠关节炎指数,1月后检测外周血血清中抗CⅡ抗体吸光度(A)值,流式细胞仪检测各组大鼠外周血CD4+T细胞中Th1和Th2细胞比例。结果:各组大鼠关节炎指数、外周血抗CⅡ抗体A值和Th1型/Th2型CD4+T细胞比率比较,差异均有统计学意义(F=20.911、22.498和10.775,P<0.001);耐受性细胞、免疫性细胞和关节炎组较正常对照组升高(P<0.05),耐受性细胞组较免疫性细胞和关节炎组降低(P<0.05)。结论:CTE1和CTE2诱导、TGF-β2刺激的APC对大鼠类风湿关节炎有抑制作用。

瞬时受体电位M2对抗原诱导关节炎小鼠的作用及机制研究初探

本研究初步探索瞬时受体电位M2(TRPM2)在抗原诱导关节炎(AIA)小鼠中的作用及机制。取C57BL/6小鼠12只,TRPM2基因敲除小鼠12只,分为野生型对照组、野生型AIA组、TRPM2基因敲除对照组、TRPM2基因敲除AIA组,每组6只。采用甲基化牛血清白蛋白(mBSA)建立野生型小鼠和TRPM:基因敲除小鼠AIA模型,进行小鼠膝关节肿胀程度、炎性细胞浸润、滑膜增生评分:实时荧光定量聚合酶链反应检测膝关节滑膜细胞白细胞介素(IL)-6、IL-8、趋化因子配体6(CXCL-6)、肿瘤坏死因子a(TNFa)mRNA表达。结果显示,与野生型AIA组小鼠比,TRPM,基因敲除AIA组小鼠膝关节肿胀更明显;膝关节滑膜细胞增生,滑膜组织炎性细胞浸润明显增加,膝关节中中性粒细胞、巨噬细胞计数升高,单核细胞无明显差异;IL-6、IL-8、CXCL-6mRNA表达水平明显增加,TNFa mRNA表达无明显变化。TRPM2可通过减少AIA小鼠膝关节中性粒细胞和巨噬细胞的浸润,抑制小鼠膝关节IL-6、IL-8等炎性细胞因子表达,减轻AIA小鼠膝关节炎症状。

应用体内诱导抗原技术筛选结核分枝杆菌体内表达基因

为寻找新型抗结核药物靶标 ,采用体内诱导抗原技术筛选结核分枝杆菌的体内诱导基因。首先构建了结核分枝杆菌基因组质粒表达文库 ,库容量为 1 0 2× 1 0 5CFU。再用经过结核分枝杆菌和大肠杆菌的裂解产物吸附过的结核病人血清 ,通过原位免疫印迹来筛选基因组表达文库 ,共获得 1 6个阳性克隆。对阳性克隆进行测序和生物信息学分析 ,发现该 1 6个阳性克隆可能包含 2 2个开放阅读框 (ORF)。按照功能将其分为 7类基因 :脂类代谢 2个、信号途径 5个、PE/PPE蛋白家族 2个、中间产物与能量代谢 6个、细胞壁与细胞处理 1个、假想蛋白 4个和与牛型分枝杆菌定向进化同源的 2个 ,其中部分基因可能与毒力相关 。