当归注射液对免疫诱导再生障碍性贫血小鼠骨髓细胞CD_(34)^+及Fas抗原表达的影响

目的探讨当归注射液对免疫诱导再生障碍性贫血小鼠骨髓细胞CD34+及Fas抗原表达的影响。方法建立免疫诱导再障小鼠模型,随机分为当归组、再障组、正常组,分别测定各组小鼠的体重、外周血白细胞计数、骨髓单个核细胞计数以及流式细胞仪检测骨髓单个核细胞CD34+及Fas抗原表达的荧光强度,应用SPSS10.0统计软件进行分析。结果再障组及当归组小鼠的体重、外周血白细胞计数、骨髓单个核细胞计数较正常组均有降低,但当归组明显高于再障组(P<0.05),当归组骨髓细胞CD34+抗原表达的荧光强度(69.0±8.3)明显高于再障组(33.6±9.1,P<0.05),而与正常组(78.2±9.4)之间无显著性差异(P>0.05)。再障组骨髓单个核细胞Fas抗原表达的荧光强度(62.7±7.1)明显高于正常组(21.5±3.6,P<0.05),当归组骨髓单个核细胞Fas抗原表达的荧光强度(43.0±6.8)明显低于再障组(62.7±7.1,P<0.05)。结论当归能降低再障小鼠骨髓细胞Fas抗原的表达,减少细胞凋亡,促进骨髓造血细胞增生,有刺激造血作用。

脐血CD_(34)^+细胞体外扩增的实验研究

目的 探讨脐血造血细胞体外扩增及其移植的最佳时期。方法 用免疫磁珠法分离纯化人脐血CD+34细胞 ,从CD+34细胞不同体外培养系中取样检测细胞总数、CD+34细胞百分率和CFC(包括CFU -GM和BFU-E)。结果 A组 (加rhSCF、rhIL - 3、rhG -CSF、rhEpo及rhTPO)与B组 (加rhFL、rhIL - 3、rhG -CSF、rhEpo及rhTPO)对各阶段造血细胞扩增效果无显著差异 ,C组 (加rhSCF、rhFL、rhIL - 3、rhG -CSF、rhEpo及rhTPO)各项结果均显著优于A组 (P <0 0 1)和B组 (P <0 0 1) ,rhCSF与rhFL有明显的协调效应 ;培养 7d时开始增多 ,培养 14d进入高峰 ,培养 2 1d开始下降 ,培养 2 8d明显下降。结论 C组能明显扩增人脐血造血细胞 ,培养 7～ 14d造血细胞达高峰 ,为移植最佳时间。

IL-6/sIL-6R对人脐血CD34^+细胞体外扩增的作用

背景和目的:造血干细胞具有自我更新、多向分化与重建长期造血的潜能,因此,造血干细胞广泛应用于干细胞移植、免疫治疗、基因治疗等领域。胎儿脐带血中富含造血干细胞,但单份脐带血中造血干细胞的数量有限,不能充分满足临床和科研需要,因此在体外培养使脐带血干/祖细胞数量扩增的研究日益受到重视。已知一些细胞因子可以在体外培养中使脐血干/祖细胞大量扩增。新近发现IL-6/sIL-6R(可溶性IL-6受体)或其融合蛋白可促使脐带血CD34+细胞中CD34+gp130+IL-6R-细胞亚群在体外培养中大量扩增。本实验旨在观察IL-6/sIL-6R在脐带血CD34+细胞体外扩增中的作用,并探讨合适细胞因子组合。方法:脐血CD34+细胞用MiniMACS分离,然后在含有不同细胞因子组合的液体培养基中体外培养7天或14天,培养前后分别进行有核细胞计数、用FCM(流式细胞术)测定CD34+细胞比例计算CD34+细胞总数及进行CFU-GM集落培养。根据不同细胞因子组合分为空白对照组,SCF组,SCF+IL-6/sIL-6R组,SCF+FL+IL-6/sIL-6R组,SCF+FL组。结果:空白对照组和SCF组CD34+细胞数量在培养7天或14天后明显下降。SCF+IL-6/sIL-6R组培养7、14天分别使有核细胞及CD34+细胞绝对数扩增(7.1±2.4)倍、(39.0±14.0)倍及(1.8±0.7)倍、(4.8±2.4)倍;SCF+FL+IL-6/sIL-6R组(16.

bFGF改善脐血CD34^+细胞移植效率的实验研究

目的 探讨碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)改善脐血CD34 + 细胞植入经大剂量化疗预处理的成人骨髓基质细胞 (hBMSC)的能力 (移植效率 )及其作用机制。方法 采用hBMSC体外长期培养 ,光镜和电镜及流式细胞术等技术 ,观察 5 氟尿嘧啶 (5 FU)对hBMSC的损伤及损伤后加入bFGF对hBMSC动力学的影响 ,以及bFGF改善脐血CD34 + 细胞对受损hBMSC的粘附能力。结果 5 FU作用hBMSC 3h后 ,细胞形态及DNA周期时相发生显著改变 ,电镜表现为细胞核裂解 ,伪足形态改变 ,流式细胞仪显示基质细胞G0 /G1期前出现明显的亚二倍体峰 ,G0 /G1期和G2 /M期显著低于正常对照组 (P <0 0 5 ) ,而S期则明显高于正常对照组。 (P <0 0 5 )植入脐血CD34 + 细胞 2h后 ,加入bFGF的干预组与损伤组比 ,脐血CD34 + 细胞在基质细胞粘附层的比例有明显提高 ,分别为 12 %和 2 9% ,但仍未达到正常对照组的比例 (36 % )。结论 5 FU可使体外培养的hBMSC形态和DNA合成受损 ;bFGF在短期内具有对受损hBMSC的修复和明显改善人脐血CD34 +

基质细胞来源因子-1(SDF-1)与CD34^+细胞的迁移

造血干细胞的粘附和趋化是归巢过程中的重要环节。该过程的调节非常复杂。基质细胞来源因子 1 (SDF 1 )可能起着重要的作用。该因子对多种细胞均具有趋化作用。对其作用机制的探讨有助于更好地了解细胞在体内的迁移情况 。

人脐血CD_(34)^+细胞体外诱导树突状细胞及其功能的检测

目的 探讨人脐血CD+34 细胞体外诱导树突状细胞 (dendriticcells ,DCs)的可能性 ,并检测DCs的功能。方法 利用吸附单克隆抗体 磁珠分离系统 (MACS)获得脐血CD+34 细胞 ,体外以重组的人干细胞集落刺激因子 (hSCF)、人粒 巨噬细胞集落刺激因子 (hGM CSF)、人肿瘤坏死因子α(hTNF α)、人酪氨酸激酶受体家族III的配体 (hFL)诱生DCs。流式细胞仪检测DCs的表型 ,3H TdR掺入法检测DCs体外刺激同种异体T细胞增殖的功能 ,最后通过乳酸脱氢酶法检测DCs活化的T细胞对肿瘤细胞的杀伤性。结果 从人脐血分离到的CD+34 细胞 ,经hSCF、hGM CSF、hTNF α、hFL共同培养后 ,第 7天镜下即可见典型形态的DCs ,第 10天时明显增多 ,细胞表型检测见CD+1a 细胞的比例增加到 (2 8± 4) %(P <0 0 1) ,人类白细胞抗原DR(HLA DR)表达占 (94± 11) %。在三种不同的混和比例下 ,DCs均可刺激异源T细胞增殖 ,其中以DCs∶T细胞为 1∶5时增殖最明显。而且被激活的T细胞对三种不同组织来源的肿瘤细胞均产生了明显的杀伤性 (P <0 0 1)。结论 人脐血CD+34 细胞体外经细胞因子诱导培养 ,可生成大量具有典型功能的成熟DCs。

造血前体细胞凋亡与再生障碍性贫血

再生障碍性贫血 (AA)患者的骨髓造血功能衰竭 ,与其造血前体细胞 (CD34+ 细胞 )过度凋亡有关 ,AA患者的细胞免疫异常、体液免疫异常以及造血基质的异常 ,均可导致CD34+ 细胞过度凋亡 ,这可能是各种因素引起骨髓造血功能衰竭 。