应用抗多肽抗体鉴别新城疫病毒强弱毒株

:在克隆我国流行的新城疫病毒 ( NDV)强毒株 F4 8E8株、四平株及弱毒株长春株、V4株的 HN和 F基因并进行测序的基础上 ,针对我国流行的 NDV强毒株 F蛋白前体 ( F0 )的 F2片段的特异结构 ,人工合成特异性多肽 ,将其与小牛血清白蛋白 ( BSA)化学偶联制备成全抗原 ,免疫小鼠制备出抗多肽血清。经 ELISA检测 ,该抗体与 NDV强毒株呈强阳性反应 ,而与鸡痘病毒、鸡传染性法氏囊病病毒、NDV弱毒株长春株和 V4株呈阴性反应。试验结果表明 ,该抗体可以用于

鉴别新城疫病毒弱毒株的抗多肽抗体制备

针对鸡新城疫病毒 (NDV )弱毒株F蛋白前体 (F0 )F2片段的特异结构 ,人工合成特异性多肽 ,将多肽与牛血清白蛋白 (BSA)化学偶联制备成全抗原后免疫小鼠 ,制备抗多肽血清。经ELISA检测 ,该抗体与NDV弱毒株呈阳性反应 ,而与鸡痘病毒 (FPV)、鸡传染性腔上囊病病毒 (IBDV)、NDV强毒F4 8E8株和四平株呈阴性反应。试验结果证明该抗体可以用于鉴别NDV弱毒株。

抗环瓜氨酸多肽抗体、类风湿因子联合红细胞沉降率检验诊断类风湿关节炎的价值

目的:探讨应用抗环瓜氨酸多肽(CCP)抗体、类风湿因子(RF)联合红细胞沉降率(ESR)检验诊断类风湿关节炎(RA)的临床价值。方法:选择2022年1月至2023年12月聊城市人民医院收治的105例关节炎患者作为研究对象,按照是否属于RA将其分为参照组(否,52例)和研究组(是,53例)。比较两组患者CCP抗体、RF水平及ESR,CCP抗体、RF、ESR检验单一诊断和联合诊断RA的价值。结果:研究组患者CCP抗体、RF水平及ESR高于参照组患者(P<0.05)。经受试者工作特征曲线(ROC)分析发现,CCP抗体、RF、ESR检验联合诊断RA的ROC下面积大于CCP抗体、RF、ESR检验单一诊断(P<0.05)。结论:应用CCP抗体、RF联合ESR检验诊断RA的灵敏度和特异度较高。

人工髋关节置换对成人股骨颈骨折患者临床效果及抗环瓜氨酸多肽抗体含量的影响

目的 探讨人工髋关节置换对成人股骨颈骨折患者临床效果及抗环瓜氨酸多肽抗体含量的影响。方法 选取股骨颈骨折患者84例,随机分为人工置换组与内固定组,各42例。内固定组给予加压螺钉内固定治疗,人工置换组给予人工髋关节置换治疗,观察临床效果及抗环瓜氨酸多肽(CCP)抗体表达水平。结果 两组住院时间、术中出血量、手术时间对比无明显差异(P>0.05);人工置换组术后6个月并发症发生率低于内固定组(P<0.05);两组血清抗CCP抗体水平对比,术前1 d无差异(P>0.05),术后14 d低于均术前1 d,且人工置换组低于内固定组(P<0.05);两组髋关节Harris评分对比,人工置换组术后1、6个月均高于内固定组(P<0.05)。结论 人工髋关节置换在成人股骨颈骨折的应用能抑制血清抗CCP抗体的表达,不会增加对患者的创伤,还可减少并发症的发生,提高髋关节功能。

布鲁氏菌病致骨关节损伤患者骨关节功能障碍评分与血清抗体检测指标的相关性研究

目的:研究布鲁氏菌病致骨关节损伤患者的骨关节功能障碍评分与血清抗体检测指标的相关性.方法:选择2020年5月—2023年4月在我中心进行检测的44例布鲁氏菌病致骨关节损伤患者作为布鲁氏菌病组,同期选择在我中心进行检测没有受到布鲁氏菌感染的健康人群44例作为对照组.2组都采用骨性关节炎功能评分-日本骨科协会(JOA)评分评定患者的骨关节功能障碍,同时送血清到县人民医院检测抗环状胍氨酸多肽抗体和抗Ⅱ型胶原蛋白水平并进行相关性分析.结果:布鲁氏菌病组的骨关节JOA评分与对照组相比显著降低,差异有统计学意义(P<0.05).布鲁氏菌病组的血清抗环状胍氨酸多肽抗体、抗Ⅱ型胶原蛋白含量都显著高于对照组,组间差异有统计学意义(P<0.05).布鲁氏菌病组Pearson分析显示,布鲁氏菌病致骨关节损伤患者的骨关节JOA评分与血清抗环状胍氨酸多肽抗体、抗Ⅱ型胶原蛋白含量存在相关性(P<0.05).在布鲁氏菌病组中,以骨关节JOA评分作为因变量,以血清抗环状胍氨酸多肽抗体、抗Ⅱ型胶原蛋白含量作为自变量,多元logistic回归分析显示,血清抗环状胍氨酸多肽抗体、抗Ⅱ型胶原蛋白含量为影响布鲁氏菌病致骨关节损伤患者骨关节JOA评分的重要因素(P<0.05).结论:布鲁氏菌病致骨关节损伤多伴随血清抗环状胍氨酸多肽抗体、抗Ⅱ型胶原蛋白的高表达,布鲁氏菌病致骨关节损伤患者的骨关节功能障碍评分与血清抗体检测指标存在相关性.

抗CCP抗体联合免疫球蛋白型类风湿因子在类风湿关节炎诊断中的意义及临床价值

目的探讨抗环瓜氨酸多肽(CCP)抗体、免疫球蛋白A型类风湿因子(IgA-RF)、免疫球蛋白G型类风湿因子(IgG-RF)、免疫球蛋白M型类风湿因子(IgM-RF)在类风湿关节炎(RA)诊断中的意义。方法选取河南省焦作煤业(集团)有限责任公司中央医院2022年1月至2023年1月收治的80例RA患者作为RA组,选取80例同期其他结缔组织疾病患者作为其他结缔组织疾病组,另选取80例健康体检者作为对照组。比较三组研究对象抗CCP抗体、IgA-RF、IgG-RF、IgM-RF阳性率和血清浓度,比较不同病情活动度RA患者各指标浓度,分析各项指标对RA的诊断价值。结果RA组抗CCP抗体、IgA-RF、IgG-RF、IgM-RF阳性率和血清浓度均高于其他结缔组织疾病组和对照组,差异均有统计学意义(P<0.05),其他结缔组织疾病组高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);高活动度组血清IgA-RF高于中低活动度组,差异具有统计学意义(P<0.05);四项指标联合检测诊断的敏感度高于各项指标单独检测(χ^(2)=12.877、8.581、60.210、4.838,P<0.05);联合检测特异度高于IgM-RF单独检测(χ^(2)=26.883,P<0.05);联合检测准确度高于各项指标单独检测(χ^(2)=45.926、34.592、6.176、12.625,P<0.05);联合检测阳性预测值高于IgA-RF、IgG-RF、IgM-RF单独检测(χ^(2)=3.888、6.365、21.671,P<0.05);联合检测阴性预测值高于各项指标单独检测(χ^(2)=9.497、7.402、33.961、6.117,P<0.05)。结论抗CCP抗体、IgA-RF、IgG-RF、IgM-RF联合诊断RA的价值较高,其中IgA-RF可能与疾病活动性有关。

用抗新城疫病毒膜蛋白特异多肽抗体鉴别强毒株和弱毒株

利用ＪｅｆｆＧｏｒｍａｎ建立的用抗新城疫病毒（ＮＤＶ）膜蛋白特异多肽抗体鉴别强弱毒株的方法，对国内的Ⅰ系、Ⅱ系、ＬａＳｏｔａ和两株分离毒进行了毒力分析。结果证明，上述毒株的毒力顺序为：Ⅰ系＞Ⅱ系和ＬａＳｏｔａ＞Ｖ４（澳大利亚弱毒疫苗株）＞临床分离株（青岛）。其结论为：Ⅰ系毒株与澳大利亚维多利亚分离株（ＡＶ）的Ｆ２蛋白片段有类似的氨基酸序列，属中发型毒株。虽然Ⅱ系和ＬａＳｏｔａ比Ｖ４和临床分离株（青岛）毒力稍强，但认为这４株均为缓发型毒株。该方法敏感、特异，结果精确可靠，不仅可用于临床分离野毒的致病性分析，而且也可用于疫苗株研究中毒力的评价。

抗人趋化素样因子1羧基端多肽抗体的制备、鉴定及组织芯片分析

目的制备及鉴定抗人趋化素样因子1(CKLF1)多克隆抗体,为CKLF1表达和功能研究提供基础。方法利用生物信息学方法分析CKLF1蛋白序列,设计、合成CKLF1羧基端多肽,与钥孔戚血蓝素穴KLH雪偶联,免疫新西兰白兔获得多克隆抗体。经ELISA法测定抗体效价,Western-blot鉴定抗体与原核细胞体外翻译和果蝇S2细胞稳定转染表达的CKLF1反应,组织芯片检测该抗体与内源性表达的CKLFs结合。结果抗CKLF1C端多肽抗体的效价为10-4,能识别在原核细胞体外翻译系统和真核细胞中表达的CKLF1蛋白,也可与多种组织中天然表达的CKLFs发生特异性反应熏在正常支气管软骨、胃粘膜和平滑肌中呈阳性表达,在正常直肠和高分化直肠癌的腺上皮中呈强阳性表达,而在低分化的直肠癌中为阴性。结论抗CKLF1多克隆抗体效价高,亲和力强,可用于CKLF1的检测和研究。

抗环瓜氨酸多肽抗体、RF在类风湿关节炎诊断中的应用评价

目的 探讨抗环瓜氨酸多肽（anti-CCP）抗体、类风湿因子（RF）在类风湿关节炎（RA）诊断中的意义.方法 通过检测126份RA患者,44份其他自身免疫性疾病患者和30份体检者血清的anti-CCP抗体和RF,分析其在RA诊断中的价值.结果 RA组anti-CCP抗体和RF水平显著高于非RA组和健康对照组（P＜0.01）,非RA组和健康对照组之间anti-CCP抗体差异无统计学意义.单独测定anti-CCP,RF,对RA检出的敏感度分别为57.1%,62.7%,特异度为95.9%,78.4%,二者敏感度差异无统计学意义（P＞0.05）,特异度差异有统计学意义（P＜0.01）,ROC曲线面积分别为0.826 0,0.733.联合检测抗CCP抗体和RF敏感度和特异度分别为80.16%,98.65%,anti-CCP抗体与RF呈正相关.结论 anti-CCP抗体对RA具有较好的敏感度和很高的特异度,作为RA早期诊断的血清学指标,anti-CCP抗体优于RF.二者联合检测对于提高早期RA筛查的 敏感度和诊断的特异度,以及RA的预后判断、治疗观察有重要意义.

ANA、抗dsDNA、ANCA、抗ENA多肽抗体联合检测在SLE诊断中的价值

为探讨ANA、抗dsDNA、ANCA、抗ENA抗体谱联合检测在SLE诊断中的价值。采用间接免疫荧光法(IIF)检测ANA、抗dsDNA、ANCA,采用免疫印迹法(IBT)检测抗ENA多肽抗体。结果:检测170例SLE患者ANA阳性率为88.2%,抗dsDNA阳性率为66.5%,ANCA阳性率为55.2%,抗ENA多肽抗体阳性率为73.5%。SLE患者组ANA、dsDNA、抗ENA多肽抗体、ANCA4项指标均显著高于正常对照组(P<0.01)。ANA、抗dsDNA、ANCA、抗ENA抗体联合检测在SLE诊断中具有互补性,并能提高对SLE诊断的阳性率和特异性,对SLE的诊断分型、治疗、预后均有重要的临床价值。

类风湿因子阴性类风湿关节炎患者血清抗瓜氨酸肽或蛋白抗体、IL-10及IL-18检测分析

目的探讨抗瓜氨酸肽或蛋白抗体(ACPAs)、白细胞介素(IL)-10和IL-18在类风湿因子(RF)阴性类风湿性关节炎(RA)诊断中的临床意义。方法分别收集RF阴性的RA患者56例、系统性红斑狼疮(SLE)患者40例和RF阴性骨关节炎(OA)患者44例的血清,采用间接免疫荧光法检测抗角蛋白抗(AKA),采用酶联免疫吸附法检测anti-Sa、抗环瓜氨酸(CCP)多肽抗体、IL-10和IL-18。结果 AKA、anti-Sa和抗CCP抗体在RF阴性RA、SLE和OA患者中的阳性率分别为33.9%、50.0%和64.3%,抗CCP抗体阴性、RF阴性RA患者IL-10水平低于抗CCP抗体阳性、RF阴性RA患者(P<0.05),而IL-18则相反(P<0.05)。结论 ACPAs检测有助于提高RF阴性RA患者的诊断率。早期的炎症因子失衡可能与RA早期病变有关。IL-10、IL-18检测对于抗CCP抗体阴性、RF阴性临床可疑RA患者具有一定的早期预测价值和鉴别诊断价值。

联合检测类风湿因子、抗环瓜氨酸多肽抗体和抗角蛋白抗体在类风湿关节炎诊断中的价值

目的:研究类风湿因子(RF)、抗环瓜氨酸多肽(CCP)抗体和抗角蛋白抗体(AKA)联合检测在类风湿关节炎(RA)诊断中的价值。方法:分别应用免疫比浊法、ELISA法和间接免疫荧光染色法检测150例RA患者和75例非RA患者血清中的RF、抗CCP抗体和AKA水平,并分析三种抗体在RA诊断中的价值。结果:单一抗体检测中敏感性以RF最高(82.0%),特异性以AKA最高(93.33%),阳性预测值以AKA最高(94.05%),阴性预测值以RF最高(67.47%);联合检测中敏感性以RF+抗CCP抗体最高(43.33%),特异性以RF+抗CCP+AKA最高(100%),阳性预测值以RF+抗CCP+AKA最高(100%),阴性预测值以RF+抗CCP抗体最高(44.81%)。结论:RF诊断RA的灵敏性最高,但特异性以RF+抗CCP+AKA最高。

抗α-胞衬蛋白多肽IgA抗体对干燥综合征的诊断价值

目的以α-胞衬蛋白(α-Fodrin)多肽为抗原,采用ELISA检测干燥综合征(Sjgren's syndrome,SS)患者血清抗α-Fodrin多肽IgA抗体(α-Fodrin-derived polypeptide antibody,αF5-IgA),并分析其与SS临床表现和其他实验室指标的关系。方法以固相法合成的α-Fodrin 37-59多肽(αF5)为包被抗原,ELISA定量检测169例原发性干燥综合征(primary Sjgren's syndrome,pSS)、31例继发性干燥综合征(secondary Sjgren syndrome,sSS)、221例其他结缔组织病患者及88名健康对照者血清抗α-Fodrin37-59多肽IgA(αF5-IgA)抗体水平,并分析其与SS患者临床表现及自身抗体、IgG、IgA、血沉及血常规等的相关性。结果 ELISA定量检测抗αF5-IgA抗体,pSS和sSS组的阳性率分别为73.4%和64.5%,而类风湿关节炎、系统性红斑狼疮和健康对照组的阳性率分别是27.3%、17.8%和2.3%,抗αF5-IgA抗体在SS患者的阳性率显著高于其他结缔组织病患者及健康对照组(χ2=114.5～234.1,P<0.01)。抗αF5-IgA抗体对SS诊断的特异性为86.1%,在抗SSA、抗SSB抗体和ANA阴性的pSS患者中,抗αF5-IgA抗体的阳性率分别为48.9%、46.6%和57.1%。抗αF5-IgA抗体阳性pSS患者的肾脏受累率高于抗αF5-IgA抗体阴性患者(χ2=3.0,P<0.05)。抗αF5-IgA抗体阳性pSS患者IgG、IgA升高,血沉增快,白细胞与血小板下降的概率明显高于抗体阴性的患者(χ2=17.9～73.5,P<0.05)。结论 ELISA法可用于检测SS患者血清抗αF5-IgA抗体,该抗体为诊断SS较为特异的自身抗体之一,且抗αF5-IgA抗体对其他自身抗体阴性的SS的诊断有参考意义。

抗环瓜氨酸肽抗体检测对类风湿性关节炎的诊断价值

目的探讨抗环瓜氨酸多肽抗体(CCP-Ab)与类风湿因子(RF)在类风湿性关节炎(RA)诊断中的临床价值。方法使用酶标分析仪及其IgG ELISA试剂盒检测血清抗CCP-Ab;采用基于速率散射比浊法的BN100特定蛋白仪测定血清RF。结果130例RF阳性病例RF最大值640.00 IU/ml,最小值20.26 IU/ml,均值95.63 IU/ml;抗CCP-Ab检测RA的特异度较RF高,差异具有显著性意义(P<0.05)。结论血清RF和抗CCP-Ab是RA良好的诊断指标,二者联合检测有助于RA的早期诊断、预后判断和治疗观察。

抗环瓜氨酸多肽抗体和类风湿因子联合检测在早期类风湿关节炎诊断中的意义

目的:同时检测抗环瓜氨酸多肽(Anti-CCP)抗体和类风湿因子(RF)各亚型在早期类风湿关节炎(RA)中的敏感性及特异性,探讨两者联合检测对早期RA的诊断意义。方法:对96例早期RA患者、132例非RA弥漫性结缔组织病患者和26例健康对照者,以ELISA方法体外定量检测人抗环瓜氨酸肽抗体。以速率免疫比浊法定量检测RF-IgM,以金标免疫斑点法检测RF-IgA及RF-IgG,比较分析其敏感性、特异性及联合检测的意义。结果:与单独测定RF相比,联合检测RF和Anti-CCP抗体可提高敏感性(从80.2%升到85.4%),但特异性相当,均为70.3%。Anti-CCP抗体在单独测定中的特异性最高达98.1%,但敏感性最低为43.8%。RF及Anti-CCP抗体均阳性对RF的诊断特异性高达99.4%。结论:Anti-CCP抗体可作为RA早期诊断的血清学指标,和RF联合检测可提高RA的诊断率,尤其是RF阴性的RA患者。

电化学发光免疫测定与酶联免疫吸附试验检测抗环瓜氨酸多肽抗体比较

目的分析酶联免疫吸附试验(ELISA)和电化学发光免疫测定(ECLIA)检测抗环瓜氨酸多肽抗体(抗CCP抗体)的结果,并评价两种方法检测结果的一致性。方法应用ELISA和ECLIA同时检测145例类风湿关节炎(RA)患者(含25例早期RA患者)、155例其他风湿免疫性疾病患者(包括50例骨性关节炎、35例强直性脊柱炎、30例干燥综合征、20例系统性红斑狼疮、10例原发性胆汁性肝硬化和10例系统性硬化症)、50例其他疾病患者和50例健康对照者共400例血清样本的抗CCP抗体含量。用SPSS13.0统计软件对结果进行一致性、敏感性及特异性分析,并分别对3例ECLIA检测高浓度抗CCP抗体血清样本做1∶20、1∶30、1∶40、1∶80和1∶160稀释后进行线性分析。结果 ELISA和ECLIA检测400例血清样本抗CCP抗体的一致性极好;两种方法检测RA患者抗CCP抗体的敏感性和特异性近似,ECLIA分别为77.24%和98.00%,ELISA分别为76.55%和98.00%。3例ECLIA检测高浓度抗CCP抗体血清样本线性回归分析结果显示,样本浓度稀释至1∶160,线性R2值均>0.9。结论 ECLIA和ELISA检测抗CCP抗体具有较好的一致性,且ECLIA线性范围较宽,ECLIA检测抗CCP抗体具有良好的应用前景。

抗环瓜氨酸多肽抗体在类风湿性关节炎诊断中的意义

目的探讨抗环瓜氨酸多肽（CCP）抗体对类风湿性关节炎（RA）的诊断意义。方法回顾性分析2000年5月至2008年5月150例风湿病患者完整的病历资料，其中RA患者110例，非RA患者40例。应用酶联免疫吸附试验检测抗CCP抗体，速率散射比浊法检测类风湿因子。计算抗CCP抗体的敏感度和特异度，并对2类患者检测结果进行对比分析。结果RA患者和非RA患者抗CCP抗体表达阳性率分别为70．9％（78／110）和7．5％（3／40），差异具有统计学意义（矿=33．41，P〈0．01）。类风湿因子对RA的敏感度为83．6％（92／110），特异度为65．0％（26／40）。抗CCP抗体对RA的敏感度为70．9％（78／110），特异度为92．5％（37／40）。抗CCP抗体与类风湿因子的敏感度差异无统计学意义（X^2=5．07，P〉0．01），特异度差异有统计学意义（X^2=9．04 P〈0．01）。结论抗CCP抗体对RA具有较好的敏感度和很高的特异度，对RA的诊断具有重要意义。

抗环瓜氨酸多肽抗体的临床意义及干扰因素分析

目的研究抗环瓜氨酸多肽(CCP)抗体对于早期类风湿关节炎(RA)的诊断价值,并探讨应用ELISA法测定抗CCP抗体时不同临床标本对于实验结果的影响。方法52例诊断为RA的患者和其他结缔组织病患者60例用ELISA方法检测抗CCP抗体,同时用间接免疫荧光法检测抗角质蛋白抗体(AKA),并用溶血、高血脂、黄疸标本做干扰实验。结果抗CCP抗体对RA诊断的敏感性为59.62％,特异性为96.67％;干扰实验中溶血、高血脂、高浓度黄疸对于检测结果无显著影响(P>0.05);中度黄疸使测定结果下降,有显著性差异(P<0.05)。结论抗CCP抗体对于早期RA有极高的诊断价值,联合检测AKA效果更好;ELISA方法检测抗CCP抗体是一种准确灵敏的方法。

抗突变型瓜氨酸波形蛋白抗体和抗环瓜氨酸肽抗体对类风湿关节炎诊断价值的比较

目的:评价抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体和抗突变型瓜氨酸波形蛋白抗体(MCV)对类风湿关节炎(RA)的诊断价值。方法:用酶联免疫吸附试验(ELISA)法分别测定RA患者47例、其他风湿病患者42例以及健康对照者30例血清中的抗CCP抗体和抗MCV抗体,并应用R0C曲线比较两者对RA的诊断价值。结果:RA组血清抗CCP抗体和抗MCV抗体水平(中位数)分别为120.0 U/mL和501.0 U/mL,分别与其他风湿病组(分别为12.5 U/mL和23.0 U/mL)和健康对照组(分别为12.0 U/mL和20.5 U/mL)比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。抗CCP抗体单项检测、抗MCV抗体单项检测、抗CCP抗体+抗MCV抗体按序列实验联合检测和按平行试验联合检测诊断RA的敏感度分别为68.1%、72.3%、53.2%和83.0%,特异度分别为88.9%、87.5%、91.7%和84.7%,Youden指数分别为0.570、0.598、0.449和0.677。结论:抗MCV抗体同抗CCP抗体一样对RA有较高的诊断价值,以111.0 U/mL为界值点,对RA诊断的正确率更高,联合检测可弥补单项抗体检测造成的RA漏诊,按平行试验联合检测抗MCV抗体和抗CCP抗体对RA的诊断有很大的临床价值。