22例新生儿血清抗幽门螺杆菌免疫球蛋白G抗体测定

２２例新生儿血清抗幽门螺杆菌免疫球蛋白Ｇ抗体测定中山医科大学孙逸仙纪念医院小儿科（５１０１２０）翁文骏目前幽门螺杆菌（Ｈｐ）感染的流行模式、传播方式和感染率尚未完全清楚，有关小儿的资料报道更少。本文目的是探讨新生儿及其对应母亲血中抗幽门螺杆菌免疫球蛋...

抗幽门螺杆菌蛋黄免疫球蛋白IgY的制备及生物活性的研究

目的:从免疫了幽门螺杆菌(Hp)抗原的母鸡蛋黄中提取抗Hp-IgY。方法:用超声破碎的Hp抗原免疫21周龄罗曼产蛋母鸡,取免疫后所产鸡蛋卵黄,利用水稀释法加硫酸铵盐析方法,提纯IgY,ELISA间接法检测抗体效价,Bradford法检测抗体蛋白含量,SDS-PAGE法检测其相对分子质量及纯度。结果:母鸡初次免疫后第7天,抗体效价即渐渐升高,约第45天达到高峰;蛋黄抗体经纯化后,抗Hp-IgY蛋白纯度可达90%以上,含量为6.25 g/L。结论:用超声破碎的Hp抗原免疫母鸡,盐析法提纯免疫母鸡产蛋黄中的抗Hp-IgY,可获得高纯度及高效价的抗Hp的特异性蛋黄抗体。

唾液分泌型免疫球蛋白A在抗幽门螺杆菌感染中作用的探讨

目的:探讨唾液分泌型免疫球蛋白A(sIgA)在幽门螺杆菌(HP)感染中对机体的保护作用。方法:应用尿素酶快速检测法检测79例胃和十二指肠炎症、溃疡病人的HP感染情况。同时应用放射免疫法测定唾液及胃液中分泌型免疫球蛋白A(sIgA)、免疫球蛋白G(IgG)浓度。结果:HP检出率70.9%,(56/79)。HP阴性组(n=23)唾液sIgA浓度为(54.41±29.99)mg/L,高于阳性组(n=56)的(37.25±19.25)mg/L(t=2.016 7,P<0.05)。两组中唾液sIgA浓度均明显高于胃液中浓度。胃液中sIgA,唾液及胃液IgG浓度两组间无显著性差异。结论:以上结果显示唾液sIgA在抗幽门螺杆菌感染中可能对机体产生保护作用。

血清胃蛋白酶原与幽门螺杆菌免疫球蛋白G抗体检测在胃癌及癌前病变筛查中的应用观察

目的观察血清胃蛋白酶原与幽门螺杆菌免疫球蛋白G(IgG)抗体检测在胃癌及癌前病变筛查中的应用价值,并探究其临床价值。方法选择2012年4月‐2014年6月于该院接受治疗的42例胃溃疡患者、57例胃癌患者、48例萎缩性胃炎患者、41例浅表性胃炎患者及25例不典型增生患者作为研究病例,同时选取54例体检健康者作为对照组。所有患者均采取酶联免疫吸附法检查血清中的幽门螺杆菌(Hp)、胃蛋白酶原Ⅰ(PG Ⅰ)、胃蛋白酶原Ⅱ(PG Ⅱ)及胃蛋白酶原比值[PGR(PG Ⅰ/PG Ⅱ)]水平,从而确定Hp菌感染和萎缩性胃炎的发生率、定性分析血清IgG抗体。全部操作均按照说明书严格执行。观察各组患者的Hp感染阳性率和阴性率的比较情况以及各组研究对象血清中PG Ⅰ、PG Ⅱ及PGR水平。结果胃溃疡组、胃癌组、萎缩性胃炎组及不典型增生组患者的PG Ⅰ、PG Ⅱ及PGR水平与对照组比较,差异均具有统计学意义(P<0.05);浅表性胃炎组患者的PG Ⅰ、PG Ⅱ及PGR水平与对照组基本相符,两组比较差异均无统计学意义(P>0.05);正常组患者的Hp阳性感染率最低,胃溃疡组、胃癌组、萎缩性胃炎组及不典型增生组、浅表性胃炎组患者的Hp阳性感染率均高于对照组,但差异均无统计学意义(P>0.05);胃溃疡组、胃癌组、萎缩性胃炎组及不典型增生组、浅表性胃炎组中Hp阳性患者的血清PG Ⅰ、PG Ⅱ及PGR水平均与对照组患者基本相符,与对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论血清胃蛋白酶原与幽门螺杆菌lgG抗体检测在胃癌及癌前病变筛查中具有较高的应用价值,是胃癌发病的危险因素之一,可以为临床上诊断胃癌提供有效的依据。

抗幽门螺杆菌蛋黄免疫球蛋白的制备分离

该文研究了幽门螺杆菌(Helicobacterpylori,简称HP)疫苗对母鸡诱导产生特异性抗体(Immunoglobulinofyolk,简称IgY)以及IgY的制备和检定方法.采用融冻法和超声波法对HP破碎,破碎后的细胞用福氏完全佐剂和福氏不完全佐剂制成疫苗对生蛋母鸡进行免疫,通过ELISA间接法检测鸡蛋的免疫应答,IgY用盐析、超滤和葡聚糖凝胶(SephadexG 200)层析等方法纯化,未纯化和纯化的IgY进行SDS PAGE电泳分析.IgY与HP的凝集反应均为阳性,表明IgY为HP的特异性抗体,用ELISA测定效价达1.6×103,比未免疫的蛋黄IgY高约160倍,根据SDS PAGE图谱分析抗HP的特异性IgY分子量在180kD左右.

斑点－酶联免疫吸附法检测幽门螺杆菌抗体IgG及其临床意义

以幽门螺杆菌（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｐｙｌｏｒｉ，ＨＰ）超声粉碎物作包被抗原，以硝酸纤维素膜为载体，借助于酶标ＳＰＡ建立了检测ＨＰＩｇＧ抗体的斑点－酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）。并用此法对１８例慢性胃炎、消化性溃疡患者（患者组），１９例儿童（儿童组）和２２例正常成人（成人组）进行了血清中ＨＰＩｇＧ抗体的测定。结果显示，患者组抗体检出率为７２．２％，与快速尿素酶法相比，符合率为８３．３％，诊断敏感性为９１．７％，特异性为６６．７％。不同人群抗体阳性率以患者组最高，成人组次之，儿童组最低。本法可用于临床ＨＰ感染的初筛检查及人群的流行病学调查。

抗幽门螺杆菌牛初乳IgG酶解特性的研究(in Vitro)——抗幽门螺杆菌牛初乳IgG抗胃蛋白酶及胃酸屏障的研究

采用幽门螺杆菌全菌抗原免疫妊娠母牛,取牛初乳,离心、过柱得到纯化的免疫球蛋白G(IgG),经非还原态的SDS-PAGE(十二烷基磺酸钠聚丙烯凝胶电泳)和HPLC(高效液相色谱)分析,达到电泳纯和HPLC纯。纯化后的IgG在体外经胃蛋白酶和胃酸处理后,经还原态的SDS-PAGE,HPLC和间接ELISA法检测,结果表明在pH4.5以上的环境中,牛初乳中的抗幽门螺杆菌IgG对胃蛋白酶和胃酸屏障有一定的抗性。

酶联免疫吸附技术测定鸡蛋黄中抗幽门螺杆菌IgY活性

目的:探索测定抗Hpylori-IgY的方法. 方法:用间接ELISA法测定幽门螺旋杆菌(Hpylori)超声破碎物免疫鸡所产鸡蛋中抗H pylori-IgY的效价.用间接ELISA法检测抗Hpylori-IgY的酸碱及酶稳定性. 结果:用幽门螺旋杆菌的超声破碎物免疫产蛋母鸡,可得到高效价的抗幽门螺旋杆菌IgY.IgY的酸稳定性好,耐胃蛋白酶. 结论:间接ELISA法简单、准确,可作为测定IgY的标准方法.

抗I型幽门螺杆菌IgY和黄连及太子参联合抗活性空泡细胞毒素A^+和细胞毒素相关蛋白A^+幽门螺杆菌的实验

目的:观察抗I型幽门螺杆菌IgY、黄连、太子参体内外抗活性空泡细胞毒素+、细胞毒素相关蛋白A+幽门螺杆菌的效果及其联合应用效果,并筛选出最佳剂量组合。方法:实验于2003-09/2004-03在江西医学院免疫学教研室完成。①中药药液制备:称取样品黄连60g(购自四川省峨眉),加5倍体积的水浸泡30min。称取样品太子参100g(购自安徽省宣州市),加入5倍体积的水浸泡30min后,两者皆用文火煎煮1h,过滤。滤渣各再加5倍体积的水,文火煎煮30min,过滤,合并2次滤液,加热浓缩至含生药1和1.6g/mL2种原液。②体外实验方法:采用琼脂稀释法进行联合应用和各单一成分的体外抑菌实验。联合应用组的剂量设置采用L1837正交设计。体外联合应用实验剂量设定:IgY的1,2,3分别表示5,10,20g/L;黄连及太子参的1,2,3分别表示20,40,60g/L。③体内实验方法:选用昆明种小鼠100只,6～8周龄。联合应用组的剂量设置采用L1837正交设计。体内联合应用实验剂量设定:IgY的1,2,3分别表示5,10,20mg;黄连的1,2,3分别表示15,30,60mg;太子参的1,2,3分别表示45,90,180mg。单一成分组及对照组采用中间剂量。④动物分组:各单一成分分组和联合应用组。除健康对照组外,所有小鼠经灌胃幽门螺杆菌液0.5mL/只(浓度1×1012CFU/L),每间隔12h重复1次,共3次。建立昆明系小鼠胃黏膜幽门螺杆菌感染模型。取30只小鼠按随机区组法分为5组并编号(1～6号):IgY组、太子参组、黄连组、枸橼酸铋钾组、生理盐水组。在造模后4周给药,前4组分别灌胃10,90,30,0.9mg相应药液0.5mL/只。生理盐水组和健康对照组(未造模,n=6):灌胃0.5mL蒸馏水和无菌生理盐水。1次/d,重复5d。体内实验联合应用组(n=36)按L1837正交设计表进行实验,重复1次。并观察小鼠胃黏膜的病理变化。⑤体外实验评分标准:共分为菌苔、尿素酶、H2O2试验、涂片4项,每项5分。分数越高,感染越严重。体外单一成分各组用综合评分确定最低抑菌浓度。⑥体内实验评分标准:共包括Warthin-Starry染色、苏木精-伊红染色、尿素酶试验三大项,每项15分,共45分。分数高,感染越严重。⑦体内单一成分各组方差分析SNK法及联合应用组的体外体内实验均用正交设计的方差分析进行数据处理。结果:①昆明系小鼠胃黏膜幽门螺杆菌感染模型:实验小鼠在感染4和8周后,胃黏膜涂片镜检、尿素酶试验及组织病理学Warthin-Starry染色检查均阳性,幽门螺杆菌感染率100%。②体外抑菌实验结果:联合应用组实验结果:黄连、太子参是综合评分的主要影响因素(P<0.05),各成分之间无交互作用(P>0.05),其最低抑菌浓度分别为40和60g/L。各单一成分组实验结果:黄连、太子参均有明显抑菌效果,其最低抑菌浓度分别为50和80g/L。③体内实验结果:联合应用组实验结果:黄连、IgY对综合评分起主要作用(P<0.05),太子参与黄连,太子参与IgY之间均有协同作用(P<0.05)。联合应用组中17号小鼠已经完全康复(综合评分为0),即3种成分均在中间用量时(IgY10mg,黄连30mg,太子参90mg),疗效最好。单一成分组实验结果:IgY、黄连、太子参、实验阳性对照对综合评分均有影响(P<0.05)。IgY对幽门螺杆菌及炎症转归均有影响(P<0.05)。结论:①当IgY10mg、黄连30mg、太子参90mg联合应用时,黏膜损伤和炎症反应消失,幽门螺杆菌被根除。②IgY是一种较为理想的免疫治疗剂。③黄连用量为5或10mg/只小鼠时,在体外和体内都能抑制幽门螺杆菌。

抗幽门螺杆菌感染在原发性IgAN治疗中的价值

目的:探究抗幽门螺杆菌(Hp)感染在原发性免疫球蛋白A肾病(IgAN)治疗中的价值。方法:选取濮阳市油田总医院2020年2月至2022年8月期间收治的原发性IgAN患者92例作为研究对象,依据随机数字表法分成对照组与观察组,各46例。对照组患者接受常规治疗,观察组患者基于常规治疗加用2周抗Hp感染的四联疗法,比较两组患者的疗效以及治疗前后肾功能指标〔血清肌酐(Scr)、24 h尿蛋白定量(24h-UTP)、血清尿素氮(BUN)、肾小球滤过率(e GFR)〕、肝功能指标〔丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬门氨酸氨基转移酶(AST)〕、肾活检病理指标变化。结果:与对照组相比较,观察组患者的总有效率明显更高,差异具有统计学意义(P<0.05);治疗后,观察组患者的24h-UTP低于对照组,e GFR高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);两组患者治疗前后AST、ALT水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05);观察组患者炎症细胞浸润、肾小管萎缩发生率均低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:抗Hp感染应用于原发性IgAN的临床治疗中可提高治疗效果,改善患者肾功能,改善肾活检病理指标,不影响肝功能。

幽门螺杆菌感染对血小板减少性紫癜患儿免疫球蛋白及补体的影响

目的观察原发性血小板减少性紫癜患儿幽门螺杆菌(HP)感染对免疫球蛋白及补体的影响。方法对267例原发性血小板减少性紫癜患儿进行13C尿素呼吸试验检测,将HP阳性的患儿选入研究组(n=60),同时随机选择HP阴性的患儿作为对照组(n=58),观察所有研究对象的免疫球蛋白(IgM、IgA和IgG)和补体(C3和C4)情况。结果两组患儿的IgM、IgA、IgG和C3、C4的检测结果差异均有统计学意义,其中研究组明显高于对照组(P<0.05)。结论 HP感染明显影响原发性血小板减少性紫癜患儿的免疫球蛋白和补体,可作为根治HP的临床疗效观察指标。

幽门螺杆菌IgG抗体免疫层析分型方法的建立

目的建立1种检测血清中抗幽门螺杆菌(Hp)抗体的胶体金免疫层析(GICA)方法。方法采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记SPA,将Hp重组抗原VacA、CagA和UreaA、UreaB抗原包被于硝酸纤维素膜NC上,制成免疫层析检测试纸条.血清中的抗Hp抗体与测试条上金标记物结合后沿着硝酸纤维素膜移动,与膜上的固相抗原结合形成肉眼可见的酒红色线条。结果用GICA与免疫印迹试剂盒对比检测了180份血清标本中抗Hp抗体,显示本方法检测敏感度、特异度分别为95.4%和96.3%,两法总符合率为96.1%。结论用这种免疫层析GICA分型方法检测血清中抗Hp抗体,灵敏度高、特异性强、简便快速,有着广泛临床应用前景。

检测抗幽门螺杆菌抗体IgG免疫印迹方法的建立及其临床应用

本研究建立的检测人血清中抗幽门螺杆菌(H.pylori)抗体IgG的免疫印迹方法敏感性为100％,特异性为90。0％,其与空肠弯曲菌和结肠弯曲菌无明显交叉反应。用该方法检测167例不同慢性胃肠病患者血清抗H.pylori IgG抗体并分析各蛋白条带与疾病的关系,发现138.71KD和130.31KD在各种胃肠病中的检出率均很高,达92.9％至100％,各组间无统计学差异(P>0.05)。64.67KD在慢性非活动性胃炎组的检出率为22.2％(6/27),活动性胃炎组为58.6％(17/29),两组之间具有统计学差异(P<0.01)。十二指肠溃疡组和胃溃疡组64.67KD的检出率分别为72.5％(29/40)和64.2％(9/14),与慢性非活动性胃炎组之间有显著性差异(P<0.01)。胃癌组64.67KD的检出率最高,达92.9％(26/28),与各组之间均具有统计学差异(P<0.01或P<0.001)。结果提示:抗H.pylori 64.67KD抗体可作为预测胃病严重程度的一种血清标志物。

唾液抗幽门螺杆菌IgG的检测

【目的】了解唾液抗幽门螺杆菌(Hp)抗体诊断 Hp 感染的价值。【方法】对93例病人同时进行唾液抗 HpIgG测定、快速尿素酶试验(RUT)、组织涂片 HE 染色及病理 WS 银染色。【结果】唾液抗 HpIgG 检测阳性率近似于 RUT 法(P>0.05),高于组织涂片 HE 染色及病理 WS 银染色法(P<0.01)。其诊断 Hp 感染的敏感性为97.0%,特异性为88.2%,准确性为95.2%,阳性预期值97.0%,阴性预期值88.2%。【结论】本方法与组织学方法比较具有更高的敏感性,且简便、快速、可靠。

ELISA对幽门螺杆菌感染血清IgG、IgA、IgM抗体检测的诊断价值

应用酶联免疫吸附试验(ELISA)对无选择性作内镜检查的90例患者血清,分别作抗HPlgG、lgA、lgM特异性抗体的检测,同时与胃粘膜活检组织块的镜检、培养、快速尿素酶试验的结果进行比较。ELISA检测结果显示血清lgG、lgA、lgM抗体的阳性率分别为71.1％(64/90)、56.6％(51/90)、56.6％(51/90),lgG检出率均高于镜检法65.6％(59/90),尿素酶试验55.6％(50/90)、培养法36.7％(33/90)、但lgA、lgM检出率略低于镜检法、而与尿素酶试验相近,高于培养法。三类抗体的灵敏度、特异度分别为81.4％、54.8％(lgG);57.5％、45.2％(lgA);50.8％、32.3％(lgM),提示对特异性lgG抗体水平的检测具有较高的诊断价值。

抗幽门螺杆菌不同免疫途径免疫奶羊的研究

目的:以幽门螺杆菌(Helicobacterpylori,H.polyri,Hp)全菌抗原免疫奶羊,观察羊奶中特异性抗体产生规律。方法:采用菌液浓度为60亿cfu/ml全菌抗原,通过滴鼻、多点皮下注射、妊娠期肌肉注射三种途径免疫3只产奶山羊。前两组都于0、14、21、28d接受四次免疫接种,妊娠组于分娩前后1个月每隔2w注射1次。收集血清、乳清样本,以酶联免疫吸附试验测定IgA、IgG抗体。结果:经滴鼻、多点皮下注射、妊娠期肌注三种途径免疫奶羊后产生了抗体。血清中IgA变化幅度不大,三组血清中IgG较免疫前都有很大升高。羊奶中IgA抗体较免疫前都有升高,抗体水平:滴鼻组>妊娠组>皮下组,羊奶中IgG抗体水平:妊娠组IgG>皮下组>滴鼻组。结论:滴鼻粘膜免疫、多点皮下注射、妊娠期肌肉注射三种途径都能激发奶羊机体的免疫应答,使羊奶中抗Hp-IgA、抗Hp-IgG抗体水平升高,血清中IgG抗体水平升高,尤其是滴鼻免疫能够诱导机体同时产生不同部位的粘膜免疫和系统免疫,且所需的抗原量远远少于其他两组,是一个敏感、安全、可行有效的免疫途径。

特异性抗幽门螺杆菌IgY的制备和活性测定

目的寻找一种高效的特异性抗幽门螺杆菌IgY的制备和活性测定方法。方法分别用福氏完全佐剂、福氏不完全佐剂混合含幽门螺杆菌灭活全菌及其超声碎片的试剂,对6只31周海兰褐种产蛋母鸡进行免疫,2周后二免,4周后三免。于初免后即开始收集鸡蛋,提取特异性抗幽门螺杆菌IgY,采用间接血凝试验测定卵黄中的抗体效价,体外抑菌试验测定其抑制幽门螺杆菌的活性。结果母鸡在初免2周后,抗体效价可达1∶256,初免3周后,抗体效价可达1∶1 024,初免4周后,抗体效价可达1∶8 192;同批样品在此水平可维持达11周以上,然后抗体效价呈缓慢下降趋势,26周后抗体效价仍可保持在较高水平。特异性抗幽门螺杆菌IgY具有明显的抑制HP生长的活性。结论采取加强免疫方法,可高效地引起免疫应答,是一种较好的获得抗体的方法。

幽门螺杆菌相关性疾病血清抗Hp IgG IgM和IL—8含量的检测及意义

目的 研究幽门螺杆菌(Hp)感染与慢性胃炎;胃、十二指肠球部溃疡;冠心病;酒糟鼻的关系。方法 以金标免疫斑点法(金标法)检测血清抗Hp抗体,用放射免疫法检测血清白细胞介素—8(IL—8)浓度。结果 Hp感染阳性慢性胃炎组86.3％,胃溃疡组87.5％,十二指肠球部溃疡组90.7％,冠心病组85.9％,酒糟鼻组91.3％;Hp感染阴性组血清IL—8浓度为0.52±0.04ng/ml,慢性胃炎抗Hp IgG(+)组为0.74±0.23ng/ml、IgG(+)IgM(+)组0.86±0.15ng/ml、胃、十二指肠球部溃疡抗Hp IgG(+)组1.11±0.32ng/ml、IgG(+)IgM(+)组1.22±0.28ng/ml、冠心病抗Hp IgG(+)组O.85±0.22ng/ml、IgG(+)IgM(+)组1.12+0.22ng/ml组间差异有显著意义(P<0.01)。结论 Hp感染可引起多种胃肠道疾病,同时与一些胃肠道外疾病密切相关,Hp感染与血清IL—8水平呈正相关,在基层医院可广泛开展金标法检测血清Hp抗体,明确Hp感染,若同时检测血清IL—8浓度,可协同诊断Hp感染并判断Hp根治情况。