生理病理状态下大鼠体内荭草花抗心肌缺血再灌注损伤活性成分筛选

目的基于生理病理状态筛选大鼠体内荭草花抗心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的潜在活性成分。方法将SD大鼠分为正常对照组、正常给药组、MIRI对照组和MIRI给药组,每组5只。经药物干预或造模、药物干预后,收集各组大鼠的血浆样品,使用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱联用技术进行色谱分离和质谱数据采集,经比对对照品图谱、各血浆样品图谱并参考相关文献后,对原型入血成分和代谢产物进行分析;同时,确定正常给药组和MIRI给药组大鼠血浆样品中的共有峰,结合主成分分析和“有监督”的正交偏最小二乘法-判别分析,以变量重要性投影(VIP)值>1为标准,筛选差异移行成分,并推测生理病理状态下荭草花抗MIRI的潜在活性成分。将SD大鼠分为对照组、MIRI组、阳性对照组(复方丹参片0.2 g/kg,每天3次)、各潜在活性成分组(各潜在活性成分均为10 mg/kg,每天2次),每组5只。各药物组大鼠灌胃相应药液,连续3 d。末次给药后,对各组大鼠血浆中超氧化物歧化酶(SOD)活性和乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)、心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)泄漏量进行检测、比较。结果从荭草花提取物总离子流图中获取主要色谱峰26个,确定了其中14个色谱峰,包括没食子酸、儿茶素、原儿茶酸等。从正常大鼠血浆样品中检测到移行成分15个,其中原型入血成分6个、代谢产物9个;从MIRI大鼠血浆样品中检测到移行成分19个,其中原型入血成分6个、代谢产物13个。两者共有移行成分8个,其中山柰酚的葡萄糖醛酸化代谢产物、槲皮素的羰基化代谢产物和N-p-香豆酰酪胺对应色谱峰的VIP值均大于1。与MIRI组比较,各潜在活性成分组大鼠血浆SOD活性均显著升高(P<0.01),LDH、CK-MB、cTnⅠ泄漏量均显著降低(P<0.01)。结论N-p-香豆酰酪胺、槲皮素、山柰酚和山柰素-3-O-β-D-葡萄糖苷可能是荭草花提取物抗MIRI的潜在活性成分。

基于网络药理学与分子对接技术探究炙甘草汤抗心肌缺血再灌注损伤的作用机制

目的:运用网络药理学方法和分子对接技术探讨炙甘草汤减轻心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的作用机制。方法:利用中医药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)与中药分子机制生物信息学分析工具(BATMAN-TCM)获取炙甘草汤有效成分并预测其作用靶点,然后应用人类基因综合(GeneCards)与人类疾病相关基因和突变信息的综合平台(DisGeNET)数据库预测MIRI靶点,通过Venny在线绘图软件获取炙甘草汤抗MIRI潜在作用靶点。利用蛋白质相互作用分析数据库(STRING数据库)平台构建蛋白互作(PPI)网络,并通过Cytoscope 3.9.1软件可视化、筛选出核心靶点,利用Metascape基因功能分析平台对筛选出的核心靶点进行基因本体(GO)富集分析与京都基因与基因组百科全书(KEGG)信号通路富集分析,探究炙甘草汤抗MIRI机制,再次利用Cytoscape 3.9.1软件构建活性成分-疾病-核心靶点-通路网络。最后利用分子对接程序AutoDock vina对炙甘草汤主要活性成分与其核心靶点结合活性进行验证。结果:经筛选获得炙甘草汤147个活性成分、865个基因靶点,MIRI 144个靶标,通过Venny数据库获取炙甘草汤抗MIRI潜在作用靶点79个;经PPI网络分析并筛选出40个关键靶点,其中肿瘤坏死因子(TNF)、白细胞介素-6(IL-6)、蛋白激酶B(AKT1)、血管内皮生长因子A(VEGFA)、一氧化氮合酶3(NOS3)、过氧化氢酶(CAT)、CC趋化因子配体2(CCL2)、髓过氧化物酶(MPO)均与炎症反应或氧化应激有关。经GO富集分析发现氧化应激、炎症反应与此生物学过程密切相关;经KEGG分析探究炙甘草汤抗MIRI的通路,共映射出178条信号通路。将炙甘草汤活性成分-疾病-核心靶点-通路网络中排名居前3位的成分及其关键靶点进行验证,结果显示炙甘草汤主要活性成分与关键作用靶点结合活性很强,能形成稳定的化合物。结论:甘草查尔酮A、人参皂苷Rh2、6-醛基异麦冬黄酮B、山柰酚、芒柄花黄素、麦冬皂苷C等为炙甘草汤抗MIRI的主要成分,通过TNF、IL-6、AKT1、VEGFA、NOS3、CAT、CCL2、MPO等核心靶点调控丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)、TNF、Toll样受体-4(TLR4)、缺氧诱导因子-1(HIF-1)、磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)、雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、转化生长因子-β(TGF-β)、核转录因子-κB(NF-κB)等信号通路,减轻改善MIRI,体现出炙甘草汤多成分-多靶点-多途径的作用优势,为进一步深入动物学实验与临床试验提供了数据与理论支持。

基于网络药理学和体外实验探讨附子-干姜抗心肌缺血再灌注损伤的作用机制

运用网络药理学方法探讨附子-干姜(Aconiti Lateralis Radix Preparata-Zingiberis Rhizoma,AZ)抗心肌缺血再灌注损伤(myocardial ischemia-reperfusion injury,MI/RI)的潜在机制。通过中药系统药理数据库TCMSP筛选AZ的活性成分;Disgenet数据库获得MI/RI靶点;STITCH数据库获得蛋白互作;用DAVID数据库获得GO功能富集与KEGG信号通路并利用Cytoscape 3.8.0进行绘图;细胞实验验证网络药理学预测的结果。结果共获得AZ活性成分16个、治疗靶点171个;作图分析发现AKT1、IL6、TNF为潜在靶点;GO富集分析发现AZ可能通过凋亡、炎症、血管舒张发挥治疗作用;KEGG分析发现AZ可能通过PI3K-AKT信号通路、TNF信号通路、HIF信号通路发挥治疗作用;体外研究发AZ可使缺氧复氧损伤的大鼠血管内皮细胞存活率提高、降低凋亡率、氧化损伤;提高HIF-α、VEGF、eNOS蛋白的表达。附子-干姜激活HIF/VEGF/eNOS信号通路,降低血管内皮细胞氧化损伤、凋亡率发挥抗心肌缺血再灌注损伤的作用。

丹红注射液及其组分抗心肌缺血再灌注损伤作用机制的研究

心肌梗死在外科手术治疗中常伴随着心肌缺血再灌注损伤(MI/RI),影响术后患者的正常生活。丹红注射液(DHI)已在临床中被广泛用来治疗冠心病和心绞痛等疾病,但其对MI/RI的治疗效果仍需进一步研究。本研究旨在探讨DHI抗MI/RI的药效作用成分及其作用机制。通过化学分离的方法,从DHI中得到其中的初生代谢物组分(PM)和次生代谢物组分(SM),通过建立大鼠心肌缺血再灌注损伤模型并分别给药,验证DHI、PM和SM的药效作用。实验结果表明DHI、PM和SM能够纠正扩张的心脏结构,还可以下调补体C2的表达以减轻炎症反应,通过上调环氧合酶(COX)的表达减少活性氧(ROS)的产生以及通过抑制脂肪酸代谢和刺激糖代谢恢复正常能量供应来改善心脏功能。此外,DHI和SM还可以通过下调Ca^(2+)/钙调素依赖性蛋白激酶II(CaMKII)的表达来减轻因钙超载引起的炎症反应和氧化应激。这些发现可能为中药注射剂的质量控制和安全性评价提供依据,并为心血管疾病的预防和治疗提供新思路。

温阳益气通脉中药抗心肌缺血再灌注损伤作用机制研究进展

心肌缺血的治疗关键是尽早再灌注,近年来随着溶栓、介入等再灌注措施的广泛应用,患者的病死率显著降低。但再灌注时,缺血心肌在恢复血供的同时又会加重心肌组织的损伤,造成缺血再灌注损伤,文献表明温阳益气通脉中药结合再灌注治疗能够显著改善患者再灌注损伤后的心功能,此文主要对温阳益气通脉单体中药、药对及复方抗心肌缺血再灌注损伤的有效成分及作用机制进行综述,以期深入了解温阳益气通脉中药的作用机制。

SIRT1/CLDN5信号通路介导褪黑素抗心肌缺血再灌注损伤的机制研究

目的:探究人体内源性物质褪黑素(Melatonin,MEL)对心肌缺血再灌注(ischemia reperfusion,IR)损伤的影响及SIRT1/CLDN5信号通路在该过程中的作用机制。方法:实验1:将心肌H9c2细胞分为5组(n=6),即对照组、IR组、IR+1μmol MEL组、IR+2μmol MEL组、IR+4μmol MEL组,处理一段时间后分别检测细胞活力值,细胞凋亡水平,SIRT1及CLDN5的表达水平,并观察MEL处理对H9c2细胞抗IR的影响。

碘化N-正丁基氟哌啶醇抗心肌缺血再灌注损伤的作用及其分子机制的研究

碘化N-正丁基氟哌啶醇（F2）是我课题组合成的具有国家发明专利的一个新化合物。在国家自然科学基金一广东省自然科学基金联合基金重点项目、国家新药基金、国家自然科学基金、教育部博士点基金、广东省自然科学基金重点和面上项目等10余项基金资助下，

黄芪多糖抗心肌缺血再灌注损伤的线粒体机制研究

目的:通过观察黄芪多糖对缺血再灌注损伤大鼠心肌线粒体膜电位、膜通透性转换孔(mPTP)活性及钙离子浓度等指标的影响,以探索黄芪多糖产生心肌保护作用的线粒体机制。方法:健康成年SD雄性大鼠35只分为假手术组、缺血再灌注组、黄芪多糖预处理组、黄芪多糖后处理组、阳性药物腺苷对照组各7只,采用冠状动脉结扎的方法建立大鼠心肌缺血模型,测定心肌线粒体膜电位、线粒体膜通透性转换孔(mPTP)活性、线粒体钙离子浓度及ROS水平等指标。结果:与假手术组比较,缺血再灌注损伤组线粒体膜电位、mPTP的开放程度、线粒体钙离子浓度及ROS水平均显著升高,而经黄芪多糖处理后线粒体膜电位、mPTP的开放程度、线粒体钙离子浓度及ROS水平明显降低。结论:黄芪多糖可通过减轻钙超载,减少ROS产生,降低膜电位水平及抑制mPTP过度开放,从而减轻缺血再灌注损伤对线粒体膜结构的破坏,保护线粒体功能,进而保护心脏舒缩功能。

瓜蒌薤白滴丸抗心肌缺血再灌注损伤作用

目的研究瓜蒌薤白滴丸(GX)对大鼠心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的保护作用。方法将经筛选合格的SPF级大鼠随机分为4组,每组12只,假手术组、模型组分别给予生理盐水,GX组和复方丹参滴丸组分别给予相当于原药22.5 g/kg和85.05 mg/kg的滴丸,1次/d,给药7 d,末次给药后1 h采用结扎大鼠冠状动脉30 min后,解结扎120 min进行MIRI造模。记录造模前后心电图的变化,测定血浆肌酸激酶MB(CK-MB)、心肌肌钙蛋白T(CTNT)、心肌肌红蛋白(MYO)含量,通过光镜、电镜观察心肌组织病理变化,采用伊文思蓝灌注染色法测定心肌梗死百分率。结果与模型组比较,GX可对抗MIRI过程中心电图ST段的抬高,明显降低大鼠血浆CK-MB、MYO、CTNT含量(P<0.05或P<0.01),改善心肌细胞纤维排列紊乱的状况,减轻心肌细胞组织间的水肿,减少肌纤维间的炎细胞浸润和心肌细胞变性坏死,降低心肌梗死百分率(P<0.01)。结论 GX对大鼠MIRI有保护作用。

川芎嗪抗心肌缺血再灌注损伤的临床研究

目的：探讨川书芎嗪对心肌缺血再灌注损伤的保护作用。方法：将１６例心内直视手术患者随机分为川芎嗪组（ｎ＝８）和对照组（ｎ＝８），川芎嗪组分别在阻断前及循环开放后即刻于２～３ｍｉｎ内恒速静脉滴注，术中分别于主动脉阻断前、阻断３０ｍｉｎ及开放３０ｍｉｎ采血，测定血超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）、乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）活性及丙二醛（ＭＤＡ）含量。结果：川芎嗪组与对照组各指标除ＧＳＨ－Ｐｘ外，变化有显著性差异（Ｐ＜０．０１和Ｐ＜０．０５）。结论：川芎嗪具有明显的保护心肌作用。

丹参抗心肌缺血再灌注损伤的研究进展

丹参为唇形科植物丹参的干燥根及根茎,具有祛癖止痛、活血通经、凉血消痈、清心除烦之功。近年来,国内外学者对丹参的化学成分及药理作用进行了深入研究,取得较大的进展。丹参主要含有两类主要的活性成分:一类为脂溶性的二萜醌类化合物;另一类为水溶性的酚酸类化合物。二者均具有明显的抗心肌缺血再灌注损伤作用。

镁盐抗心肌缺血再灌注损伤的研究

利用整体犬急性心肌缺血再灌注模型，在心肌缺血后再灌注前运用镁盐，观察镁盐对心肌组织超微结构的影响。电镜下可见再灌组的再灌注区心肌组织超微结构病变较单纯性缺血更严重，表现为大部分肌原纤维溶解，呈凝固性坏死，大部分肌节结构消失；且血清肌酸磷酸激酶（ＣＰＫ）水平升高更明显，７１．４％的犬发生再灌注性心律失常。镁盐组的再灌注区心肌组织超微结构病变明显减轻，仅见心肌细胞轻度水肿及线粒体肿胀，血清ＣＰＫ水平降低，无一只犬发生再灌注性心律失常。

四逆汤有效成分不同组合抗心肌缺血再灌注损伤的作用研究

目的 考察四逆汤有效成分不同组合抗心肌缺血再灌注损伤的作用。方法 采用正交试验法 ,以超氧化物歧化酶 (SOD)、丙二醛 (MDA)以及乳酸为指标 ,考察附子生物碱 (A)、干姜挥发油 (B)、甘草酸粗品 (C) 3个因素。结果 3种有效成分最佳剂量为 A4B4C4,3因素对 SOD和 MDA影响大小顺序为 A>C>B,对乳酸影响大小顺序为 A>B>C。结论 3种有效成分临床极量组合的疗效最佳。附子生物碱是四逆汤有效成分组合中的关键因素 。

姜黄素抗心肌缺血再灌注损伤作用及其机制研究

目的探讨姜黄素抗心肌缺血再灌注(IR)损伤的效果及其可能的作用机制。方法选用日本大耳白兔随机分为4组:单纯IR组、姜黄素组、姜黄素预处理组、血红素氧合酶-1(HO-1)抑制组。分别给予单纯IR、同时用姜黄素+IR、提前8h用姜黄素+IR、提前8h用姜黄素+ZnPPⅨ然后行IR等处理。IR采用的是结扎冠状动脉左前降支40min、松开6h的方法进行。检测IR前心肌HO-1蛋白表达与活性以及IR后心肌中性粒细胞浸润、超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽(GSH)及丙二醛(MDA)含量、心肌梗死范围及心肌细胞凋亡指数(AI)。结果与单纯IR组比较,与IR同时应用的姜黄素仅显示较弱的抗氧化作用,轻度缩小心肌梗死范围(P<0.05),对AI无影响。姜黄素预处理可明显上调HO-1蛋白表达与活性,并显著抑制IR后心肌中性粒细胞浸润及脂质过氧化反应,明显降低心肌梗死范围及AI(P<0.01)。这一保护作用可被HO-1抑制剂ZnPPⅨ消除。结论姜黄素可通过抗氧化作用防止心肌IR损伤,其保护作用主要是通过上调HO-1蛋白表达与活性实现的。

脂质体携载前列腺素E_1抗心肌缺血再灌注损伤

目的 研究脂质体携载前列腺素E1(Lipo PGE1)减轻心肌再灌注损伤的机理。方法 2 4只家兔随机分成Lipo PGE1组 ,PGE1组及对照组 ,每组 8只。以家兔左冠脉前降支 (LAD)结扎 6 0min ,再灌注 12 0min为缺血再灌注模型 ,于再灌注前 10min分别自耳缘静脉静注Lipo PGE1(2 μg·kg-1PGE1) ,PGE1(2 μg·kg-1)及等容量的脂肪乳剂 (Lipo PGE1的溶剂 ) ,以Evans蓝及氯化三苯基四氮唑 (TTC)双重染色确定缺血心肌及梗塞心肌范围 ,通过测定心肌组织髓过氧化物酶 (MPO)活性反应缺血心肌中性粒细胞浸润程度。结果 Lipo PGE1组梗塞心肌占危险区心肌重量百分比(32 2 0 %± 4 70 % )比较对照组 (44 5 7%± 5 46 % )及PGE1(42 0 9%± 6 93% )降低 (P <0 0 1) ;Lipo PGE1治疗组缺血区心肌组织MPO活性〔(1 9± 1 2 )U·g-1〕较对照组〔(5 3± 2 4)U·g-1〕及PGE1组〔(4 2± 2 0 )U·g-1〕均降低 ,边缘区心肌组织MPO活性〔(1 4± 1 1)U·g-1〕较对照组〔(3 3± 1 5 )U·g-1〕也降低 (P <0 0 5 )。结论 Lipo PGE1能有效抑制再灌注心肌中性粒细胞的浸润 ,减轻心肌再灌注损伤。

缬草提取物抗心肌缺血再灌注损伤的实验研究

了解缬草提取物对心肌缺血再灌注损伤的保护作用。方法：大耳白种家兔２０只，分为实验组和对照组。结扎冠状动脉左室支１ｈ后松解，观察１．５ ｈ。实验组手术前１ｈ，结扎前１０ｍｉｎ给予缬草提取物１００ｍｇ／ｋｇ（体重）腹腔注射。观察体表标测心电图、心肌ＳＯＤ：ＭＤＡ、ＴＸＢ_２、６－Ｋｅｔｏ－ＰＧＦ_１α、ＴＮＦ－α、ＩＬ－β等指标。结果：心电图：结扎后１ｈ，实验组Ｎ－ＳＴ、ΣＳＴ、Ｎ．Ｒ明显低于对照组（ Ｐ＜ ０ ．０５）；松解复灌后１．５ｈ，实验组Ｎ－ＳＴ、ΣＳＴ明显低于对照组（ Ｐ＜ ０．０５）。心肌匀浆：实验组ＸＯＤ、ＭＤＡ、ＴＮＦ－α均低于对照组（ Ｐ＜ ０．０５）；实验组６－Ｋｅｔｏ－ＰＧＦ_(１α)／ＴＸＢ_２高于对照组（Ｐ＜０．０５）。实验组ＩＬ－１β略低于对照组，但统计学上无显著差异。结论：缬草提取物有抗心肌缺血再灌注损伤的作用。

黄酮类化合物抗心肌缺血再灌注损伤研究进展

黄酮类化合物的抗氧化活性及其他多种生物活性使其对心肌缺血再灌注损伤有一定的保护作用。它可以通过抑制自由基的产生、抗炎、抑制细胞凋亡、舒张血管等多种途径来保护心肌。本文回顾了近年来黄酮类化合物在抗心肌缺血再灌注损伤方面的研究进展,分析了其保护心肌缺血再灌注损伤的作用机理,并对黄酮类化合物在心血管疾病领域的应用进行了展望。

丹参对抗心肌缺血再灌注损伤的分子生物学机制研究进展

在停搏液中添加丹参可以对抗体外循环心脏停搏导致的心肌缺血再灌注损伤。近年来有关其机制的研究较多,主要集中在降低钙超载、抑制中性粒细胞的活化、抑制心肌细胞调亡和清除氧自由基四个方面。现综述如下。1减少细胞内Ca2+超载钙超载的原因为:①心肌细胞的缺血缺氧造成了细胞的酸中毒,促使了Na+-H+交换和Na+-Ca2+交换,