应用C—ELISA检测禽流感病毒核蛋白抗体

应用杆状病毒表达的重组核蛋白及单抗建立了竞争ＥＬＩＳＡ（Ｃ—ＥＬＩＳＡ），用于抗Ａ型禽流感病毒核蛋白抗体的检测。试验检测了７５６只鸡，１１２３只火鸡，７０７只鸸鹋和１２６１只鸵鸟的共３８４７个血清样品。与琼脂扩散试验（ＡＧＩＤ）对比，Ｃ—ＥＬＩＳＡ方法对上述四种血样的敏感性均为１００％；而与血凝抑制试验（ＨＩ）相比，则其敏感性在鸡、火鸡和鸸鹋为１００％。鸵鸟为９６．２％。经ＡＧＩＤ检测为阴性而Ｃ—ＥＬＩＳＡ阳性的样品中有９０％以上通过ＨＩ试验至少一种血清亚型呈阳性反应。试验发现Ｃ—ＥＬＩＳＡ和ＡＧＩＤ方法的特异符合率在８５．５％—９９．８％之间。这些结果表明，Ｃ—ＥＬＩＳＡ和ＨＩ一样都比ＡＧＩＤ更敏感、更特异。因此，Ｃ—ＩＬＩＳＡ有可能取代ＡＧＩＤ，用于禽类（包括平胸鸟）Ａ型流感病毒血清学监测。

抗异质性胞核核糖核蛋白(hnRNP)抗体与自身免疫病的关系

抗异质性胞核核糖核蛋白(hnRNP)抗体在自身免疫性疾病的研究中具有重要意义.类风湿性关节炎(RA)、系统性红斑狼疮(SLE)和混合型结缔组织病(MCTD)中的抗hnRNP抗体主要是针对hnRNPA/B蛋白质,其中针对3种hnRNP蛋白质A2、B1、B2(RA3复合物)的自身抗体又称抗RA33抗体,检查抗RA33抗体有助于RA的早期诊断.抗hnRNP抗体不仅是有价值的诊断指标,而且在自身免疫性疾病发病机制的研究中也具有重要意义.

系统性红斑狼疮自身抗体的研究

系统性红斑狼疮(Systemic lupus erythematosis,SLE)是一种典型的自身免疫性疾病.其特点是免疫调节性T细胞的功能缺陷和B细胞的高反应性.无论哪一方面的缺陷都会导致各种自身抗体的产生.

抗核小体抗体与系统性红斑狼疮的致病相关性

目的分析抗核小体抗体(anti-nucleosome antibody,AnuA)与系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)的临床表现和其他自身抗体的关系,并了解其与SLE活动性的关系,探讨AnuA在SLE发病中的意义。方法回顾性分析2014年3月至2016年1月天津医科大学总医院165例SLE住院病人病历资料,其中AnuA阳性者96例,分析其主要的实验室指标与临床特征,并与69例同期住院的AnuA阴性病人比较。结果 AnuA阳性病人抗核抗体、抗双链DNA抗体、抗Sm抗体、抗SSA抗体、抗SSB抗体、抗U1核糖核蛋白抗体阳性率高,更易出现C3及C4下降,发热、皮疹、口腔溃疡、关节炎、肾损害、浆膜炎、光敏感、血小板减少阳性率较高,均差异有统计学意义(χ2值分别为4. 187、5. 667、4. 708、6. 660、5. 686、12. 062、6. 793、7. 323、4. 850、12. 617、5. 251、6. 178、4. 850、4. 521、7. 446、4. 377,均P <0. 05),两组SLEDAI积分比较差异有统计学意义(t=2. 19,P <0. 05),两组病人在抗核糖体P蛋白、抗心磷脂抗体、雷诺现象、心包炎、胸膜炎、脱发、神经系统损害、白细胞减少、淋巴细胞减少均差异无统计学意义(P> 0. 05)。结论 AnuA与抗核抗体、抗双链DNA抗体、抗Sm抗体、抗SSA抗体、抗SSB抗体、抗U1核糖核蛋白抗体高阳性率、C3下降、C4下降、发热、皮疹、口腔溃疡、关节炎、肾损害、浆膜炎、光敏感、血小板减少相关,AnuA与SLE活动性相关,AnuA在SLE的发病中有重要意义。

狼疮肾炎患者肾小管间质损伤的自身抗体特征

目的:观察狼疮肾炎(lupus nephritis,LN)肾小管间质损伤(tubulointerstitial damage,TID)情况及自身抗体与LN患者TID的关系。方法:回顾性收集2012年3月1日至2021年7月31日就诊于北京大学深圳医院且经肾脏活组织检查证实为LN的患者,收集患者的病历资料及临床数据,按肾小管间质炎症(tubulointerstitial inflammation,TII)及肾小管间质瘢痕形成(即间质纤维化和肾小管萎缩,interstitial fibrosis/tubular atrophy,IF/TA)的情况分为中重度组及无或轻度组。采用t检验、Mann-Whitney U检验和卡方检验分析患者临床指标、自身抗体与TII或IF/TA的关系。结果:共纳入226例患者,中位年龄32(26,39)岁,201例(89%)患者为增殖型LN,中重度TII和中重度IF/TA分别为67例(30%)和76例(34%)。自身抗体方面,中重度TII患者比无或轻度TII患者血清抗RNP抗体阳性率低(34%vs.51%),中重度IF/TA比无或轻度IF/TA患者抗核糖体P蛋白(anti-ribosomal P protein,anti-P)抗体阳率低(19%vs.33%)。其它临床指标方面,与无或轻度TII患者相比,中重度TII患者增殖型LN占比更高,血清肌酐值更高,肾小球滤过率更低,且合并高血压和贫血更多,既往无糖皮质激素和免疫抑制药物使用史的初治患者更少;IF/TA以上临床指标结果与TII一致。结论:抗RNP抗体和anti-P抗体可能分别是TII和IF/TA的潜在保护因素,需要更多的研究来探讨自身抗体与TID的关系,以制定更好的预防和治疗策略,进而最终改善LN患者的生存率。

异质性胞核核糖核蛋白A2在类风湿关节炎诊断中的临床意义

目的探讨异质性胞核核糖核蛋白A2(hnRNP A2)在类风湿关节炎(Rheumatoid Arthritis,RA)诊断中的临床意义,建立简便、快捷的ELISA检测方法,并与国外Anti-RA33 Ab试剂盒的结果对比,以作为验证国内试剂盒可用性的依据。方法以高纯度的具有抗原反应性的重组hnRNP A2蛋白作为抗原,对临床上包括137例RA在内的多种结缔组织病患者的血清中的相应抗体进行ELISA检测。应用国外Anti-RA33 Ab试剂盒ELISA法检测并对比检测结果。结果hnRNP A2在RA患者中的敏感性为37.23%,特异性为85.44%,抗hnRNP A2/RA33抗体在RA患者中阳性率均明显高于其他疾病组(P<0.05)。抗hnRNP A2/RA33抗体在早期RA患者中的阳性率为43.75%。与国外Anti-RA33 Ab试剂盒检测结果比较,在各组患者中检测抗RA33抗体的阳性率无明显差别(P>0.05),且总体符合率高达86.88%。另外,该抗体与年龄、病程、晨僵时间、血沉、C反应蛋白、关节功能、X线分期、类风湿因子(RF)、抗角蛋白抗体(AKA)、抗核周因子抗体(APF)及抗CCP抗体之间均无相关性(P>0.05)。结论我们初步纯化了RA33抗原,对hnRNP A2进行了基因的克隆、重组蛋白的表达和纯化,并以其为抗原,用ELISA方法检测抗hnRNP A2/RA33抗体是早期诊断RA的可靠方法。与国外Anti-RA33 Ab试剂盒的检测结果对比无明显差异,自制的抗RA33抗体试剂盒可以可靠地应用于临床检验。

抗Sm抗体、抗U1-RNP抗体阳性检测结果与临床诊断不符1例报道

自身免疫性疾病是指机体对自身抗原发生反应,导致自身组织损伤而引起的疾病。抗核抗体(anti-nuclear antibody,ANA)及ANA谱对于自身免疫性疾病的诊断、鉴别诊断、疗效观察及预后评估具有重要意义。抗U1-核糖核蛋白(U1-ribonucleoprotein,U1-RNP)抗体可在多种风湿性疾病中出现,但高滴度抗U1-RNP抗体对混合性结缔组织病(mixed connective tissue disease,MCTD)有诊断意义。抗Sm抗体是系统性红斑狼疮的高特异性血清学标志物。本研究报道1例抗Sm抗体、抗U1-RNP抗体阳性结果与临床诊断不符的患者。

人胃、肠黏蛋白糖链在胃肿瘤中的表达

目的 :探讨新制备抗人胃、肠黏蛋白糖链抗体 (HGM72 、HGM75、HCM14 和HCM2 1)及抗核蛋白MUC2抗体 (NCL MUC2 )在胃黏膜、化生胃黏膜及肿瘤中的表达。方法 :使用LSAB试剂盒对 15例胃腺瘤、136例浅表型胃腺癌 (肠型 77例 ,弥散型 5 9例 )及 10例正常胃黏膜、10例化生胃黏膜进行免疫组织化学染色和组织化学染色。结果 :HGM72 抗原表达在正常胃窦腺和胃底腺的颈细胞胞质中 ,两型胃腺癌的表达明显高于胃腺瘤 (P <0 0 1) ,两型胃腺癌之间无差异 ;HGM75抗原表达在胃小凹上皮细胞胞质中 ,在胃腺瘤和弥散型胃腺癌的表达明显高于肠型胃腺癌 (P <0 0 1) ;HCM14 抗原部分表达在化生胃黏膜的杯状细胞胞质中 ,在胃腺瘤的表达高于胃腺癌和化生胃黏膜 (P <0 0 1) ;HCM2 1抗原均表达低下 ;MUC2表达在化生的杯状细胞胞质中 ,在胃肿瘤中无明显差异。结论 :抗黏蛋白糖链抗体与其它染色联合使用 。

应用细胞法代替小鼠法检测狂犬病毒毒力

目的应用细胞法代替小鼠法检测狂犬病毒毒力。方法将34批病毒样品采用小鼠法检测半数致死量LD50。同时，将病毒样品感染BSR细胞，检测病毒的荧光灶单位（FFU／ml）。结果用细胞法所得的logFFU值与对应的小鼠法所得LD50之间呈正相关性；分次测得同一狂犬病毒logFFU值在3．03—3．28之间，而log LD50值在2～3之间。结论细胞法代替小鼠法检测狂犬病毒的毒力是可行的。

不同免疫方法检测原发性胆汁性胆管炎特异性自身抗体的对比研究

目的比较不同免疫学检测方法对抗线粒体2型抗体（AMA－M2）、抗糖蛋白210抗体（anti－gp210）和抗核蛋白体100抗体（anti－sp100）等原发性胆汁性胆管炎（PBC）特异性自身抗体的检测性能。方法2015年4月到2017年4月期间，共收集北京佑安医院就医的91例PBC、67例肝脏疾病对照（包括病毒性肝炎、自身免疫性肝炎、肝硬化等）和40名健康体检对照的血清样本，应用化学发光法（CLIA）和酶联免疫吸附法（ELISA）平行检测AMA－M2，同时采用CLIA和线性免疫印迹法（LIA）检测anti－gp210和anti－sp100。不同方法之间一致性比较采用Kappa检验。CLIA和ELISA检测AMA－M2对PBC诊断准确度的比较则采用受试者工作特征曲线（ROC曲线）。结果CLIA与ELISA检测AMA－M2的总符合率为88.4% （Kappa＝0.765，P〈0.01）。而CLIA与LIA检测anti－gp210和anti－sp100的总符合率分别为96.5%（Kappa＝0.852，P〈0.01）和98%（Kappa＝0.884，P〈0.01）。ROC曲线分析显示CLIA和ELISA检测AMA－M2曲线以下面积（AUC）分别为0.965（P〈0.01）和0.928（P〈0.01）。结论应用CLIA和ELISA在检测AMA－M2时，两种方法具有良好符合率和一致性。而CLIA和LIA在检测anti－gp210和anti－sp100时，同样表现出良好的符合率和一致性。（中华检验医学杂志，2018, 41：203－207）

儿童起病的混合性结缔组织病1例报告并文献复习

目的探讨儿童起病的混合性结缔组织病(MCTD)的临床特点及治疗方法,提高对该病的认识水平。方法以1例首发为雷诺现象的MCTD为例,对儿童起病MCTD的诊断和治疗进行分析概述。结果MCTD具多种结缔组织病临床特点重叠表现,儿童以雷诺现象起病者较成人少见,其首发症状变化多样,缺乏特异性表现,雷诺现象可持续在MCTD整个病程中,并与疾病演变相关,高滴度抗核糖核蛋白(抗U1RNP)抗体阳性是诊断MCTD必备条件之一。MCTD的预后个体差异很大,根据病程、受累脏器程度及进展速度选择个体化治疗方案。结论应重视儿童起病MCTD的早期诊断,及时治疗,减少误诊,加强随访。

尿频、尿急、双肾积水、输尿管扩张2a

患者女，23岁，因尿频、尿急、排尿不适2a余，门诊拟诊尿路感染、双肾积水原因待查，于2010年8月19日收入院。患者于28前始出现尿频、尿急、排尿不适，偶伴有急迫性尿失禁，时轻时重。2a前曾在北京协和医院检查，血清抗核抗体（ANA）阳性，抗双链抗体116IU／ml（正常参考值〈100IU／ml），抗核糖核蛋白抗体（RNP-Ab）阳性，

AMA-M2抗体、gp210抗体和sp100抗体在原发性胆汁性胆管炎诊断中的应用

目的探讨抗线粒体2型(AMA-M2)抗体、抗糖蛋白210(gp210)抗体及抗核蛋白体100(sp100)抗体在诊断原发性胆汁性胆管炎(PBC)中的应用效果。方法将2017年8月至2019年6月晋城煤业集团总医院收治的50例PBC患者作为PBC组,50例自身免疫性肝炎和病毒性肝炎患者作为非PBC组。所有入选者均需接受AMA-M2抗体、gp210抗体及sp100抗体以及ALP、GGT、ALB的检测,分析检测结果。结果PBC组AMA-M2、gp210及sp100抗体阳性率均高于非原发性胆汁性胆管炎组,差异有统计学意义(P均<0.05);PBC组碱性磷酸酶(ALP)、谷氨酰转肽酶(GGT)水平高于非PBC组,差异有统计学意义(P<0.05);白蛋白(ALB)与非PBC炎组比较差异未见统计学意义(P>0.05)。结论联合应用AMA-M2、gp210、sp100及ANA可提高原发性胆汁性胆管炎的诊断率,对PBC早期诊断及预后判断有非常重要的作用。

儿童混合性结缔组织病诊治进展

自混合性结缔组织病的概念被提出以来,其发病机制及诊断一直备受争议。目前学术界普遍认为混合性结缔组织病是一种独立的风湿免疫病,其特征是系统性红斑狼疮、系统性硬化、皮肌炎/多肌炎一种或多种临床症状的混合,伴抗U1核糖核蛋白抗体高滴度阳性。有研究表明多达1/4的患者幼年起病,首发症状以雷诺现象和多关节炎为主,其临床特征和诊治特点与成人存在一定差异。疾病后期有进展为其他结缔组织病的可能,早期诊断和治疗对改善预后具有重要意义。该文就儿童混合性结缔组织病的流行病学、发病机制、临床表现及诊断治疗等方面的研究进展展开阐述。

混合性结缔组织病肾损害四例

1972年Sharp等将一组具有多种结缔组织病临床表现，且血清学上表现为高滴度斑点型抗核抗体（ANA）和抗核糖核蛋白抗体（RNP）抗体的结缔组织病，称为混合性结缔组织病（MCTD）。Kitridou等认为MCTD的肾损害发生率为10％-50％：而国内相关的报道少见。我们分析了本院4例MCTD肾损害的临床病理表现，以进一步提高对此类疾病的认识。