抗核蛋白体100、抗糖蛋白210联合线粒体2型抗体检测在原发性胆汁性胆管炎诊断中的应用研究

目的探讨抗核蛋白体100(抗sp100)、抗糖蛋白210(抗gp210)联合线粒体2型(AMA-2)抗体检测在原发性胆汁性胆管炎(PBC)诊断中的临床价值。方法选取2022年1月至6月宿迁市第一人民医院收治的112例疑似PBC患者作为研究对象,均采血检测抗sp100、抗gp210、AMA-M2抗体。以肝穿刺为金标准,分析抗sp100、抗gp210、AMA-M2抗体单一及联合检测在PBC中的诊断价值,另采用kappa检验分析各项指标与肝穿刺的一致性。结果112例疑似患者经肝穿刺确诊为PBC有68例,其中抗SP100阳性28例,抗gp210阳性29例,AMA-M2抗体阳性58例,联合检测阳性67例。联合检测敏感度、准确度、阴性预测值高于抗sp100、抗gp210、AMA-M2抗体单一检测,AMA-M2抗体敏感度、准确度、阴性预测值高于抗sp100、抗gp210(均P<0.05)。kappa检验显示,抗sp100与肝穿刺结果一致性差(kappa值=0.323);抗gp210与肝穿刺结果一致性差(kappa值=0.336);AMA-M2抗体与肝穿刺结果一致性尚可(kappa值=0.748);联合检测与肝穿刺结果一致性极好(kappa值=0.944)。结论抗sp100、抗gp210联合AMA-M2抗体检测在PBC中的诊断价值高于各项单一检测,能提高诊断敏感度、准确度,避免漏诊的发生。

异质性胞核核糖核蛋白A2在类风湿关节炎诊断中的临床意义

目的探讨异质性胞核核糖核蛋白A2(hnRNP A2)在类风湿关节炎(Rheumatoid Arthritis,RA)诊断中的临床意义,建立简便、快捷的ELISA检测方法,并与国外Anti-RA33 Ab试剂盒的结果对比,以作为验证国内试剂盒可用性的依据。方法以高纯度的具有抗原反应性的重组hnRNP A2蛋白作为抗原,对临床上包括137例RA在内的多种结缔组织病患者的血清中的相应抗体进行ELISA检测。应用国外Anti-RA33 Ab试剂盒ELISA法检测并对比检测结果。结果hnRNP A2在RA患者中的敏感性为37.23%,特异性为85.44%,抗hnRNP A2/RA33抗体在RA患者中阳性率均明显高于其他疾病组(P<0.05)。抗hnRNP A2/RA33抗体在早期RA患者中的阳性率为43.75%。与国外Anti-RA33 Ab试剂盒检测结果比较,在各组患者中检测抗RA33抗体的阳性率无明显差别(P>0.05),且总体符合率高达86.88%。另外,该抗体与年龄、病程、晨僵时间、血沉、C反应蛋白、关节功能、X线分期、类风湿因子(RF)、抗角蛋白抗体(AKA)、抗核周因子抗体(APF)及抗CCP抗体之间均无相关性(P>0.05)。结论我们初步纯化了RA33抗原,对hnRNP A2进行了基因的克隆、重组蛋白的表达和纯化,并以其为抗原,用ELISA方法检测抗hnRNP A2/RA33抗体是早期诊断RA的可靠方法。与国外Anti-RA33 Ab试剂盒的检测结果对比无明显差异,自制的抗RA33抗体试剂盒可以可靠地应用于临床检验。

抗异质性胞核核糖核蛋白A2/RA33抗体酶联免疫吸附法的建立及临床应用

目的 探讨酶联免疫吸附法 (ELISA)检测抗异质性胞核核糖核蛋白A2 (hnRNPA2 ) /类风湿关节炎 (RA) 33抗体在不同风湿性疾病患者中的阳性率及对RA早期诊断的意义。方法 以纯化的重组蛋白hnRNPA2为抗原 ,用ELISA检测RA 179例、系统性红斑狼疮 (SLE) 14 1例、其他弥漫性结缔组织病 (CTD) 97例、血清阴性脊柱关节病 (SPA) 30例、骨关节炎 (OA) 10例、关节痛 /关节炎5 9例、正常对照 4 0名 ,比较抗hnRNPA2 /RA33抗体在各组人群中的阳性率 ,并评价其与RA患者临床和实验室检查指标间的关系及早期诊断的价值。结果 抗hnRNPA2 /RA33抗体在RA患者中的敏感性为 36 9%、特异性为 87 1% ,在SLE、其他CTD、SPA和OA患者中阳性率分别为 19 2 %、7 2 %、6 8%和 0。抗hnRNPA2 /RA33抗体在早期RA患者中的阳性率为 4 3 3%。结论 以纯化的重组蛋白hnRNPA2为抗原的ELISA是检测抗hnRNPA2 /RA33抗体 ,早期诊断RA的可靠方法。

人胃、肠黏蛋白糖链在胃肿瘤中的表达

目的 :探讨新制备抗人胃、肠黏蛋白糖链抗体 (HGM72 、HGM75、HCM14 和HCM2 1)及抗核蛋白MUC2抗体 (NCL MUC2 )在胃黏膜、化生胃黏膜及肿瘤中的表达。方法 :使用LSAB试剂盒对 15例胃腺瘤、136例浅表型胃腺癌 (肠型 77例 ,弥散型 5 9例 )及 10例正常胃黏膜、10例化生胃黏膜进行免疫组织化学染色和组织化学染色。结果 :HGM72 抗原表达在正常胃窦腺和胃底腺的颈细胞胞质中 ,两型胃腺癌的表达明显高于胃腺瘤 (P <0 0 1) ,两型胃腺癌之间无差异 ;HGM75抗原表达在胃小凹上皮细胞胞质中 ,在胃腺瘤和弥散型胃腺癌的表达明显高于肠型胃腺癌 (P <0 0 1) ;HCM14 抗原部分表达在化生胃黏膜的杯状细胞胞质中 ,在胃腺瘤的表达高于胃腺癌和化生胃黏膜 (P <0 0 1) ;HCM2 1抗原均表达低下 ;MUC2表达在化生的杯状细胞胞质中 ,在胃肿瘤中无明显差异。结论 :抗黏蛋白糖链抗体与其它染色联合使用 。

AMA-M2抗体、gp210抗体和sp100抗体在原发性胆汁性胆管炎诊断中的应用

目的探讨抗线粒体2型(AMA-M2)抗体、抗糖蛋白210(gp210)抗体及抗核蛋白体100(sp100)抗体在诊断原发性胆汁性胆管炎(PBC)中的应用效果。方法将2017年8月至2019年6月晋城煤业集团总医院收治的50例PBC患者作为PBC组,50例自身免疫性肝炎和病毒性肝炎患者作为非PBC组。所有入选者均需接受AMA-M2抗体、gp210抗体及sp100抗体以及ALP、GGT、ALB的检测,分析检测结果。结果PBC组AMA-M2、gp210及sp100抗体阳性率均高于非原发性胆汁性胆管炎组,差异有统计学意义(P均<0.05);PBC组碱性磷酸酶(ALP)、谷氨酰转肽酶(GGT)水平高于非PBC组,差异有统计学意义(P<0.05);白蛋白(ALB)与非PBC炎组比较差异未见统计学意义(P>0.05)。结论联合应用AMA-M2、gp210、sp100及ANA可提高原发性胆汁性胆管炎的诊断率,对PBC早期诊断及预后判断有非常重要的作用。

不同免疫方法检测原发性胆汁性胆管炎特异性自身抗体的对比研究

目的比较不同免疫学检测方法对抗线粒体2型抗体（AMA－M2）、抗糖蛋白210抗体（anti－gp210）和抗核蛋白体100抗体（anti－sp100）等原发性胆汁性胆管炎（PBC）特异性自身抗体的检测性能。方法2015年4月到2017年4月期间，共收集北京佑安医院就医的91例PBC、67例肝脏疾病对照（包括病毒性肝炎、自身免疫性肝炎、肝硬化等）和40名健康体检对照的血清样本，应用化学发光法（CLIA）和酶联免疫吸附法（ELISA）平行检测AMA－M2，同时采用CLIA和线性免疫印迹法（LIA）检测anti－gp210和anti－sp100。不同方法之间一致性比较采用Kappa检验。CLIA和ELISA检测AMA－M2对PBC诊断准确度的比较则采用受试者工作特征曲线（ROC曲线）。结果CLIA与ELISA检测AMA－M2的总符合率为88.4% （Kappa＝0.765，P〈0.01）。而CLIA与LIA检测anti－gp210和anti－sp100的总符合率分别为96.5%（Kappa＝0.852，P〈0.01）和98%（Kappa＝0.884，P〈0.01）。ROC曲线分析显示CLIA和ELISA检测AMA－M2曲线以下面积（AUC）分别为0.965（P〈0.01）和0.928（P〈0.01）。结论应用CLIA和ELISA在检测AMA－M2时，两种方法具有良好符合率和一致性。而CLIA和LIA在检测anti－gp210和anti－sp100时，同样表现出良好的符合率和一致性。（中华检验医学杂志，2018, 41：203－207）