抗氧化低密度脂蛋白自身抗体与2型糖尿病动脉粥样硬化关系的研究

目的探讨抗氧化低密度脂蛋白自身抗体在T2DMAS发生发展中的作用及其关系。方法采用7ml／dlPEG沉淀法获得免疫复合物，应用抗氧化低密度脂蛋白自身抗体（OX-LDL-Ab）酶联免疫测定方法对40例正常对照组、50例T2DM无AS组、30例T2DM有AS组患者血清中抗氧化低密度脂蛋白免疫复合物（0X—LDL—IC）中0X—LDL—Ab进行测定。结果正常对照组与T2DM无AS组比较0X—LDL—Ab阳性率和含量水平差异均无统计学显著性意义（t=2．54，t=1．64，P〉0．05），正常对照组与T2DM有AS组比较则差异有统计学显著性意义（t=64．22，t=34．92，P〈O．01），T2DM无AS组与T2DM有AS组比较差异也有统计学显著性意义（t=53．73，t=35．89，P〈0．01）。结论：OX—LDL—Ab可作为早期诊断和防治糖尿病有无动脉粥样硬化的一个可靠指标。

基于NOD样受体3炎性小体通路对利拉鲁肽在氧化低密度脂蛋白诱导内皮细胞损伤的作用机制研究

背景动脉粥样硬化是世界范围内引起心脑血管疾病最主要的原因,炎症是目前研究热点,其中NOD样受体3(NLRP3)是研究最为深入的炎症小体。胰高糖素样肽1(GLP-1)受体激动剂有抗动脉粥样硬化作用,具体机制尚不明确。目的研究利拉鲁肽通过拮抗氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的内皮细胞损伤的作用机制。方法2022-03-25—05-19培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),取HUVEC加空白血清作为对照组,100μg/mL的ox-LDL干预HUVEC 48 h作为模型组,100μg/mL的ox-LDL干预HUVEC 24 h后分别加入100、200、400 nmol/L利拉鲁肽处理24 h作为利拉鲁肽低浓度组、利拉鲁肽中浓度组、利拉鲁肽高浓度组。CCK-8法计算细胞增殖率。通过扫描电镜观察焦亡细胞形态。检测乳酸脱氢酶(LDH)活力。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测白介素(IL)-1β、IL-18表达水平。蛋白质免疫印迹试验(Western blot)检测NLRP3、接头蛋白凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、天冬氨酸蛋白水解酶1(Caspase-1)、焦亡执行蛋白(GSDMD)、N端结构域的焦亡执行蛋白(N-GSDMD)表达水平。结果模型组、利拉鲁肽低浓度组和利拉鲁肽中浓度组细胞增殖率低于对照组,利拉鲁肽低浓度组、利拉鲁肽中浓度组、利拉鲁肽高浓度组细胞增殖率高于模型组(P<0.05)。细胞扫描电镜结果示模型组细胞焦亡明显,利拉鲁肽低浓度组、利拉鲁肽中浓度组、利拉鲁肽高浓度组细胞焦亡情况明显改善。模型组、利拉鲁肽低浓度组LDH活力高于对照组,利拉鲁肽低浓度组、利拉鲁肽中浓度组、利拉鲁肽高浓度组低于模型组(P<0.05)。模型组、利拉鲁肽低浓度组IL-1β表达水平高于对照组,利拉鲁肽中浓度组、利拉鲁肽高浓度组IL-1β表达水平低于模型组(P<0.05);模型组IL-18表达水平高于对照组,利拉鲁肽低浓度组、利拉鲁肽中浓度组、利拉鲁肽高浓度组IL-18表达水平低于模型组(P<0.05)。模型组NLRP3、ASC、Caspase-1、GSDMD、N-GSDMD表达水平高于对照组,利拉鲁肽低浓度组ASC、Caspase-1表达水平高于对照组,利拉鲁肽中浓度组NLRP3、ASC表达水平低于模型组,利拉鲁肽高浓度组NLRP3、ASC、Caspase-1表达水平低于模型组(P<0.05)。结论利拉鲁肽显著抑制ox-LDL诱导的内皮细胞NLRP3炎性小体活化,并且能够抑制内皮细胞的焦亡,具有抗动脉粥样硬化作用。

血清小而密低密度脂蛋白胆固醇和总抗氧化能力水平与脑梗死患者认知功能障碍的相关性分析

目的:探究脑梗死患者血清小而密低密度脂蛋白胆固醇(small dense low-density lipoprotein cholesterol, sdLDL-C)和总抗氧化能力(total antioxidant capacity, T-AOC)水平变化及其与认知功能障碍发生的关系。方法:选择148例脑梗死患者,依据发病后7 d是否出现认知功能障碍,分为非障碍组(n=77)和障碍组(n=71);分别采用过氧化氢酶法和比色法测定两组血清sdLDL-C和T-AOC水平,并进行比较;Pearson相关系数法分析脑梗死患者血清sdLDL-C、T-AOC水平与蒙特利尔认知评估(MoCA)评分相关性;二元Logistic回归分析影响脑梗死患者认知功能障碍发生的危险因素。结果:与非障碍组相比,障碍组血清sdLDL-C水平明显升高(P<0.05),T-AOC水平明显降低(P<0.05)。相关性分析显示,血清sdLDL-C水平与MoCA评分呈负相关(r=-0.516,P<0.05),T-AOC水平与MoCA评分呈正相关(r=0.446,P<0.05)。Logistic回归分析显示,高血压、糖尿病、病情严重程度、血清sdLDL-C和T-AOC是脑梗死患者认知功能障碍发生的独立影响因素(P<0.05)。结论:脑梗死患者血清sdLDL-C水平升高,T-AOC水平降低,二者是影响脑梗死患者并发认知功能障碍的独立影响因素。

免疫复合物中抗氧化低密度脂蛋白抗体的检测

目的建立检测免疫复合物(IC)中抗氧化低密度脂蛋白抗体(ox-LDL-Ab)的ELISA法。方法以Cu2+-ox-LDL包被固相板,70 g/L聚乙二醇(PEG)沉淀免疫复合物(ox-LDL-IC),测定冠心病各组与对照组的ox-LDL-Ab,与检测ox-LDL-Ab的某试剂盒测定结果进行比较。结果抗原最佳包被浓度为7.5 mg/L;血清最佳加样量为200μl;酶标抗体工作浓度为1∶6 000;灵敏度18.5 mU/ml;批内变异系数3.6%、批间变异系数8.2%。平均回收率97.1%。对稳定型心绞痛(SAP)组和不稳定型心绞痛(UAP)组测定结果与某试剂盒测定的ox-LDL-Ab水平差异无统计学意义(P>0.05),而用本法测定IC中ox-LDL-Ab水平UAP组比SAP组显著增高(P<0.01)。结论测定IC中的ox-LDL-Ab有利于区分UAP组和SAP组患者。

氧化低密度脂蛋白及其自身抗体与冠心病的相关性

目的探讨氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)及其自身抗体(ox-LDLAb)与冠心病(CHD)的相关关系,并绘制受试者工作特征曲线(ROC),评价其临床诊断意义。方法分别提取血浆和血清,用酶联免疫吸附(ELISA)方法测定血浆ox-LDL及血清ox-LDLAb浓度。结果冠心病患者ox-LDL、ox-LDLAb明显高于对照组(P<0.01),且急性心梗组(AMI)、不稳定心绞痛组(UAP)高于稳定心绞痛组(SAP)(P<0.05)。ox-LDL与ox-LDLAb)负相关。ROC曲线下面积ox-LDL为(0.805±0.039),0x-LD-LAb为(0.747±0.041),对急性冠脉综合征(ACS)有一定的鉴别力。结论血ox-LDL、ox-LDLAb水平的高低与冠心病严重程度呈正相关,可作为预测ACS和识别斑块不稳定的一项血清学指标。

氧化型低密度脂蛋白自身抗体及其免疫复合物与冠心病的相关性

目的 :探讨氧化型低密度脂蛋白 (ox- LDL )自身抗体及其免疫复合物与冠心病之间的关系。方法 :应用酶联免疫法对 6 1例确诊的冠心病患者、116例高血压患者和 12 3例健康对照组进行血清 ox- LDL自身抗体及其循环免疫复合物的检测 ,并同步测定 ox- LDL和血脂水平。结果 :冠心病患者自身抗体 Ig G[2 1.4 8(17.5 8～ 2 9.0 1) ]U/L和 Ig M[4 .71(3.88～ 7.0 6 ) ]U/ L以及 ox- L DL [0 .87(0 .4 4～ 1.0 8) ]mg/ L均显著高于高血压组 [15 .93(11.12～2 2 .2 6 ) U/ L、2 .5 4 (1.17～ 5 .0 5 ) U/ L、0 .32 (0 .16～ 0 .6 1) mg/ L ]和健康对照组 [11.12 (4.70～ 16 .5 7) U/ L、1.6 1(0 .6 0～ 3.0 3) U/ L、0 .2 3(0 .12～ 0 .36 ) mg/ L],P均 <0 .0 0 1,而循环免疫复合物 [2 .6 3(1.6 9～ 5 .90 ) U/ L ]显著低于高血压组 [15 .71(6 .2 5～ 2 8.74 ) U/ L]和健康对照组 [12 .5 4 (8.2 8～ 2 3.90 ) U/ L ],P均 <0 .0 0 1。ox- LDL与其自身抗体之间的关系在各组之间存在不一致性。结论 :ox- LDL自身抗体与循环免疫复合物在冠心病患者中的变化可能与ox- L DL及其自身抗体在冠状动脉硬化进程中发挥作用有关。

氧化低密度脂蛋白抗体水平与冠状动脉再狭窄的相关性:独立于年龄、性别、体质量指数、高血压、高血脂及吸烟史的危险因子

目的:探讨非糖尿病人群中血氧化低密度脂蛋白(oxidizedlowdensitylipoproteins,ox-LDL)抗体与经皮冠状动脉成形术(percutaneoustranslu-milarcoronaryangioplasty,PTCA)后临床再狭窄的联系,阐明ox-LDL抗体预测再狭窄的意义。方法:冠脉造影确定为单处病变的非糖尿病不稳定心绞痛(unstableangina,UA)患者41例,分别于PTCA术前、后留取外周血检测ox-LDL抗体、高敏感C反应蛋白(highsensitiveC-reactiveprotein,hs-CRP)等。术后随访6个月,随访内容包括:胸痛,静息或症状发作时心电图(electrocardiogram,ECG),和(或)负荷ECG及心肌核素灌注显像,必要时行冠状动脉造影(coronaryangiography,CAG),综合判断临床再狭窄。结果:41例患者中,术后6个月内发生临床再狭窄11例,发生率26.8%。再狭窄组术前CRP值较非再狭窄组显著升高(P=0.03)。两组术后C反应蛋白(C-reactiveprotein,CRP)值与术前比较,差异无显著性意义(P>0.05)。再狭窄组术前ox-LDL抗体较非再狭窄组显著增高(P=0.008)。术后1周时,再狭窄组ox-LDL抗体水平较术前显著增高近1倍(P<0.001),而非再狭窄组术前、术后差异无显著性意义(P>0.05)。Logistic回归分析显示,术前血清ox-LDL抗体与临床再狭窄发生显著正相关(OR=2.663,CIof95%forOR1.149,6.974,χ2=16.688,P<0.

糖尿病患者血浆氧化、丙二醛修饰低密度脂蛋白及其自身抗体水平

目的探讨血浆氧化及丙二醛(MDA)修饰低密度脂蛋白(LDL)及其自身抗体与糖尿病(DM)及其他血脂项目之间的关系。方法选择DM患者、正常对照组各60例。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)分别测定铜离子氧化型LDL(ox-LDL)、MDA修饰型LDL(MDA-LDL)及其自身抗体,同时对受检者血脂水平进行检测。结果DM患者血浆ox-LDL、MDA-LDL及其自身抗体水平均明显高于对照组(P<0.01),分别与总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)呈高度正相关,而与高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)呈负相关;且ox-LDL、MDA-LDL分别同其自身抗体呈高度正相关。结论DM患者ox-LDL、MDA-LDL及其自身抗体水平显著升高,可能参与动脉粥样硬化的发生、发展过程。

氧化低密度脂蛋白抗体与冠心病严重程度及Gensini积分的相关性

目的研究氧化低密度脂蛋白抗体(ox-LDLAb)与冠心病严重程度及Gensini积分的相关性。方法选择行冠状动脉造影的154例患者,分为正常对照组、不稳定心绞痛(UAP)组、急性心肌梗死(AMI)组,ELISA法测定三组血清ox-LDLAb水平,并根据造影结果行Gensini积分。结果UAP组和AMI组ox-LDLAb均低于对照组(P<0.05);ox-LDLAb与Gensini积分呈显著负相关(r=-0.334,P=0.000),ox-LDLAb与高密度脂蛋白呈显著正相关(r=0.263,P=0.004),ox-LDLAb为急性冠脉综合征的保护性因素。结论ox-LDLAb可能具有抗动脉粥样硬化的作用。

血清高敏C反应蛋白和氧化型低密度脂蛋白自身IgG抗体可作为急性冠脉综合征的预后指标

目的探讨急性冠脉综合征(ACS)患者血清高敏C反应蛋白(hs CRP)和氧化型低密度脂蛋白自身IgG(ox LDL-IgG)水平变化及其与ACS患者预后的相关性。方法分别采用夹心ELISA和间接ELISA检测79例发病6 h以内的ACS患者和40例对照组血清hs CRP与ox LDL-IgG的水平,研究二者在ACS早期的变化规律。对ACS患者随访2年,记录心血管不良事件的发生例数,探讨hs CRP和ox LDL-IgG与ACS患者预后的相关性。结果与对照组相比,ACS组血清hs CRP水平显著升高,ACS组血清ox LDL-IgG反应指数也明显升高。血清hs CRP与ox LDL-IgG水平高的ACS患者2年内不良事件的发生率明显高于血清hs CRP与ox LDL-IgG水平低的患者。结论 ACS患者血清hs CRP与ox LDL-IgG的水平可作为判定ACS患者预后的指标。

抗磷脂抗体对巨噬细胞摄取氧化型低密度脂蛋白及CD36表达的影响

为了探讨抗磷脂抗体对巨噬细胞摄入氧化型低密度脂蛋白的影响及其主要清道夫受体CD36抗原表达的调节 ,将培养的U937细胞与氧化型低密度脂蛋白 (80mg L)和抗磷脂抗体 (10 0mg L)孵育 ,用酶荧光法观察人类单核细胞株U937内脂质的变化、逆转录—聚合酶链反应和流式细胞术观察CD36抗原mRNA和蛋白水平表达的改变。结果发现氧化型低密度脂蛋白存在时细胞内胆固醇和胆固醇酯含量分别为 2 4 3± 9mg g细胞和 2 89± 12mg g细胞 ,流式细胞仪测CD36抗原为 2 5 % ,凝胶电泳分析CD36mRNA β actionmRNA为 1.0 5 ;在加入抗磷脂抗体后 ,胞浆内胆固醇和胆固醇酯明显增加 ,分别为 2 76± 10mg g细胞和 4 78± 13mg g细胞 ,流式细胞仪测CD36抗原为 37% ,凝胶电泳分析CD36mRNA β actionmRNA为 1.90 ;两组相比差异有显著性 (P <0 .0 5 )。以上提示抗磷脂抗体有促进U937细胞摄取氧化型低密度脂蛋白的作用 。

血清氧化低密度脂蛋白抗体水平与动脉粥样硬化危险性的关系

目的探讨血清中抗氧化低密度脂蛋白抗体(ox-LDL-Ab)在评估动脉粥样硬化患者危险性中的作用。方法采用酶联免疫吸附法检测83例动脉粥样硬化患者、179例冠心病患者(稳定型心绞痛92例和急性心肌梗死87例)和80例健康者(对照组)血清ox-LDL-Ab水平。结果动脉粥样硬化组、稳定型心绞痛组和急性心肌梗死(心梗)组血清ox-LDL-Ab水平显著高于健康对照组(P<0.05);急性心梗组血清ox-LDL-Ab水平显著高于动脉粥样硬化组、稳定型心绞痛组(P<0.05);稳定型心绞痛组与动脉粥样硬化组血清ox-LDL-Ab水平比较差异无显著性(P>0.05);血压、血脂异常对动脉粥样硬化和冠心病患者血清ox-LDL-Ab水平的影响也无显著性差异(P>0.05)。结论氧化低密度脂蛋白抗体水平升高与动脉粥样硬化的发生和进展密切相关,且对动脉粥样硬化引起心血管事件危险性的评估有一定的价值。

普罗布考对急性冠脉综合征患者外周血氧化低密度脂蛋白抗体等的影响

目的观察普罗布考对急性冠脉综合征(ACS)患者血氧化低密度脂蛋白抗体(oxLDL-Ab)、血浆内皮素-1(ET-1)和一氧化氮(NO)水平的影响。方法将ACS患者81例随机分为普罗布考组(P组)41例和常规治疗组(R组)40例,均常规应用硝酸酯类药物、阿司匹林、氯吡格雷、钙拮抗药、β受体阻滞药、低分子肝素等治疗,两组剂量相同。心绞痛发作时均舌下含服硝酸甘油0.5mg,有溶栓指征者及时给予尿激酶溶栓,符合冠状动脉内介入治疗指征者行介入治疗。P组在上述治疗基础上加用普罗布考片0.5g,bid,早晚餐后口服,疗程4周,避免服用他汀类及其他抗氧化药。检测两组治疗前后外周血oxLDL-Ab、ET-1和NO,分析两组治疗结束前1周心绞痛发作频率。结果P组治疗后oxLDL-Ab、ET-1浓度较R组显著降低,NO水平显著升高(均P<0.05);P组疗程结束前1周平均心绞痛发作频率较R组低,次数减少与oxLDL-Ab、ET-1含量减少及NO增加有明显相关性(P<0.05)。结论普罗布考可降低ACS患者oxLDL-Ab、ET-1,升高NO,具有抗氧化和保护血管内皮功能等作用。

人血清氧化低密度脂蛋白自身抗体的提取和初步鉴定

目的提取和鉴定人血清氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)自身抗体。方法采用溴化氰活化的Sepharose4B交联Ox-LDL制备免疫吸附层析柱,从正常人血清中提取抗Ox-LDL自身抗体,采用ELISA法鉴定其免疫反应性,散射免疫比浊法分析自身抗体种类。结果用NaHCO3、醋酸盐和KCNS溶液洗脱,分别收集洗脱峰。8份正常人血清中均收集到Ox-LDL自身抗体,与Ox-LDL均具有良好的反应性。自身抗体种类中以IgG为主,其次为IgM。结论此法提取的抗Ox-LDL自身抗体同Ox-LDL具有良好的反应能力。

ST段抬高急性心肌梗死患者血清氧化低密度脂蛋白抗体-IgM水平与冠状动脉病变程度及住院期间预后的相关研究

目的：探讨血清氧化低密度脂蛋白抗体-IgM（ox-LDL-Ab IgM）水平在ST段抬高急性心肌梗死（STEMI）患者中与冠状动脉病变程度及近期预后的相关性。方法选取2008年8月至2009年5月诊断明确并行急诊经皮冠状动脉介入（PCI）治疗的STEMI患者95例，根据冠状动脉造影结果分为单支病变组、双支病变组及三支病变组，并以Gensini积分评价冠状动脉狭窄程度，分别测定血清ox-LDL-Ab IgM、丙二醛（MDA）、血脂，计算体质量指数（BMI），统计患者住院期间心血管事件发生情况，分析ox-LDL-Ab IgM水平与冠状动脉病变程度及近期预后的关系。结果 STEMI患者血清ox-LDL-Ab IgM水平随冠状动脉病变支数增加而降低（P＜0.05），但与Gensini积分无明显相关性（P＞0.05）；ox-LDL-Ab IgM水平与血脂、血糖水平等无明显相关性（P＞0.05），与MDA水平呈显著负相关（r＝-0.319，P＜0.05）；ox-LDL-Ab IgM水平与患者住院期间心血管事件发生率呈显著负相关（r＝-0.708，P＜0.05），logistic回归分析显示， ox-LDL-Ab IgM是STEMI患者住院预后的保护因素（OR＝-0.588，P＜0.05）。结论血清ox-LDL-Ab IgM水平可在一定程度上反映STEMI患者冠状动脉病变的严重程度。其可能通过调节机体氧化应激水平，减少LDL氧化修饰生成ox-LDL，从而减轻冠状动脉粥样硬化的面积，可能对STEMI患者近期预后具有保护作用。

不同类型冠心病患者C反应蛋白与氧化型低密度脂蛋白自身抗体水平的比较

目的研究C反应蛋白(CRP)、氧化型低密度脂蛋白自身抗体(anti-oxLDL)与急性冠状动脉综合征(ACS)的关系。方法分别测定26例急性心肌梗死、29例不稳定性心绞痛、20例稳定性心绞痛和21例对照者的CRP、anti-oxLDL和anti-LDL水平,比较各组中上述指标有无显著差异并评估CRP水平与anti-oxLDL水平的相关性。结果ACS患者(包括急性心肌梗死组和不稳定性心绞痛组)的CRP水平明显高于稳定性心绞痛组和对照组(P<0.05);ACS患者的anti-oxLDL水平明显高于稳定性心绞痛组和对照组(P<0.05);各组anti-oxLDL水平比较无显著差异(P>0.05);各组中CRP水平与anti-oxLDL水平成显著正相关(P<0.001)。结论特异性抗原oxLDL的免疫反应,在导致斑块的不稳定及ACS的发生中可能起着重要作用,anti-oxLDL水平可能是评价ACS斑块不稳定的重要特异性标志。

急性缺血性脑血管病患者血清氧化型低密度脂蛋白抗体的检测

目的探讨氧化型低密度脂蛋白抗体检测在急性脑缺血发生发展过程中的作用及诊断价值。方法选择我院2007年6月～8月住院的急性脑缺血患者80例，根据发病时头颅磁共振检查结果，将患者分为急性脑梗死组与短暂脑缺血组，采用酶联免疫吸附法同时测定二组血清氧化型低密度脂蛋白抗体，检测血清生物化学各项指标，并对结果进行统计学分析。结果急性脑梗死组血清氧化型低密度脂蛋白抗体为38．07±32．14ku／L，短暂脑缺血组为25．18±9．17ku／L，二组比较有显著性差异（P〈0．05）；而与其它生物化学学指标无相关性。结论氧化型低密度脂蛋白抗体水平在不同类型脑缺血中有所不同，其升高有可能是急性脑梗死的危险信号。

不同类型冠心病患者血浆氧化低密度脂蛋白及其抗体变化的临床意义

目的 探讨急性冠脉综合征 (ACS)、稳定型心绞痛 (SAP)患者血浆血脂、氧化低密度脂蛋白 (OX-L DL)及其抗体 (Anti- OX- L DL)变化在冠状动脉粥样硬化 (AS)发生、发展中的作用及其相关性。方法 分别用酶联免疫吸附法测定 136例冠心病 (ACS组 10 6例 ,SAP30例 )及 5 6例正常对照组的血浆血脂、OX- L DL、Anti- OX-L DL,并进行直线相关性分析。结果 1冠心病组血脂 TC、TG、L DL- C与对照组存在显著差异 (P<0 .0 1)。 2ACS组血浆 OX- L DL及 Anti- OX- L DL与 SAP组、对照组比较 ,P均 <0 .0 1;SAP组与对照组比较上述指标差异无显著性 (P>0 .0 5 )。 3ACS组 OX- L DL与 L DL呈正相关 (r=0 .6 4 2 ,P<0 .0 1) ;Anti- OX- L DL与 L DL无关 (r=0 .341,P>0 .0 5 )。结论 高脂血症是冠心病的绝对危险因素 ;OX- L DL及其抗体在 ACS发病中起重要作用 ;Anti- OX- L DL 作用不依赖于 L DL。