镉胁迫下绿豆和箭舌豌豆幼苗的抗氧化反应

采用溶液培养法对Cd2+胁迫下绿豆和箭舌豌豆幼苗叶组织内的抗氧化酶活性、活性氧和丙二醛(MDA)含量以及细胞电解质泄漏率的变化进行了研究。结果显示,随着Cd2+胁迫浓度的增加和胁迫时间的延长,2种作物叶组织内的MDA含量和细胞电解质泄漏率明显增加;在胁迫期间,二者的过氧化氢(H2O2)和超氧阴离子(O2.-)的含量以及过氧化氢酶(CAT)、抗坏血酸过氧化物酶(APX)、超氧化物歧化酶(SOD)活性呈先升高并在不同的时间达到高峰后再下降的趋势。与箭舌豌豆相比,Cd2+胁迫下的绿豆幼苗叶组织的MDA含量、电解质泄漏率及H2O2和O2.-的积累量较高,CAT、SOD和APX的活性较低。研究表明,Cd2+胁迫下箭舌豌豆的抗氧化能力高于绿豆的抗氧化能力。

微囊藻毒素在鲋鱼体内生物富集及其体内的抗氧化反应

为了解微囊藻毒素在鲋鱼Carassius auratus L.体内生物富集作用,用LC/MS监测不同时间的鲋鱼肝脏、肌肉,以及饲养用水中痕量的微囊藻毒素。结果显示,肌肉组织中MC-RR和MC-LR的含量在18d时达到峰值,分别为7.87ng·g-1和2.18ng·g-1;而肝脏组织中MC-RR和MC-LR的含量在鲋鱼暴露9天时达到最高值,分别为25.30ng·g-1和33.27ng·g-1。研究结果支持肝脏组织是MCs的主要靶向器官,并且表明肝脏组织对MC-LR的富集量远大于MC-RR,而肌肉组织更易于积累MC-RR。文章还研究了鲋鱼体内的抗氧化酶(SOD、CAT、GST、GR酶)的活性变化,对MCs介导的氧化胁迫进行了评估。通过分别测定暴露不同时间点(3、9、18d)肝脏和肌肉组织中的抗氧化酶的活性,发现它们的活性与组织中MCs的含量基本呈正相关,可能对MCs介导的氧化胁迫有缓解作用。以上表明,MCs能在鱼体内积累,抗氧化系统虽可缓解,但不能完全降解。因此食用被MCs污染的鱼类存在潜在的食品安全风险。

紫锥菊提取物对彭泽鲫生长和抗氧化反应的影响

试验旨在研究紫锥菊提取物对彭泽鲫(Carassius auratus var.pengze)生长和抗氧化反应的影响。选取体重为(7.50±0.15)g的彭泽鲫作为试验动物,在其饲料中分别按0.1%、0.2%、0.4%、0.8%的不同比例添加紫锥菊提取物,经过60 d的饲养,测定其生长及血清中抗氧化酶活力等的变化。结果表明,紫锥菊提取物显著增加彭泽鲫的相对增重率(P<0.05);显著降低鲫鱼血清中的羟自由基(.OH)(P<0.05),降低丙二醛(MDA)含量,提高其血清中的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽还原酶(GR)活力,同时降低谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力。该研究阐明了紫锥菊提取物对鲫鱼生长及抗氧化反应的影响,为紫锥菊在水产养殖中的研究与应用提供基础数据。

机械伤胁迫下刺梨果实的抗氧化反应

以‘贵农五号’刺梨为材料,研究了刺梨果实对机械伤处理造成的氧化胁迫及其主要抗氧化系统的响应情况.结果表明,机械伤处理可诱导刺梨果实中O2.-和H2O2等活性氧的产生,促使膜脂过氧化水平加剧.在此过程中,抗氧化系统各组分的反应不尽相同:其中,抗坏血酸含量在处理2h内急剧降低,相应地其氧化态DHA的含量则持续增加;SOD活性在处理2h内急剧增强并一直保持较高水平,而抗氧化酶系统中的其它重要组分如APX、POD和CAT等却一直未能检测到活性.

转录因子E2相关因子2-抗氧化反应元件信号通路与机体抗氧化的关系

转录因子E2相关因子2-抗氧化反应元件(Nrf2-ARE)信号通路是机体抗氧化过程中的重要调节途径。Nrf2-ARE信号通路在抗氧化活化过程中受亲核物质、氧化应激因子、蛋白激酶C(PKC)、丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)、磷脂酰肌醇激酶(PI3K)、胰腺内质网激酶(PERK)等因子调控。Nrf2-ARE信号通路的活化可以保护细胞的酶类和抗氧化物处于基础表达水平,细胞处于稳定状态。本文就Nrf2-ARE信号通路调节机体抗氧化的机理进行综述。

基于抗氧化反应元件的药物筛选模型的建立

目的建立基于抗氧化反应元件(antioxident responseelement,ARE)和SEAP报告基因的细胞筛选模型,用此模型对金雀异黄素、芹菜苷配基、儿茶素、茨非醇4种化合物进行活性比较,观察上述化合物拮抗过氧化氢损伤的作用,寻找具有强抗氧化活性作用的黄酮类化合物。方法构建重组报告基因表达载体pARE-TAL-SEAP与对照载体分别转染HEK-293细胞,检测上述黄酮类化合物作用后对SEAP的活性和抗氧化作用的影响。结果在加入25μmol.L-1H2O2进行氧化损伤的HEK-293细胞中,加入100μmol.L-1的4种化合物进行比较时金雀异黄素的抗氧化作用最强,金雀异黄素诱导SEAP的最大表达水平较对照孔升高1.3倍;加入25μmol.L-14种化合物的抗氧化作用时茨非醇的抗氧化作用最强,茨非醇诱导SEAP的最大表达水平较对照孔升高1.5倍。结论利用此模型可以检测H2O2的氧化应激反应并可筛选到抗氧化活性强的黄酮类化合物。

芪明颗粒对糖尿病大鼠晶体抗氧化反应的影响

目的 探讨芪明颗粒对糖尿病性白内障(diabetic cataract,DC)的作用及其机理。方法 采用链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱发糖尿病大鼠模型,随机分为5组,即芪明低、中、高剂量组,模型组,阳性药物对照组;另设立正常对照组。3个月后给予芪明颗粒治疗,连续灌胃3个月,观察芪明颗粒对DM大鼠晶体中脂质过氧化终产物丙二醛(Maldonclialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(Glutatlaione pemxidase,GSH-px)含量的影响。结果 芪明颗粒可降低晶体中MDA含量,提高SOD、GSH-px活性,与模型组比较其差异有统计学意义(P<0.05-0.001)。结论 芪明颗粒能增强DM大鼠抗氧化能力,减轻晶体的氧化损伤。

核转录相关因子2—抗氧化反应元件信号通路在认知障碍相关疾病中的作用

核转录相关因子2-抗氧化反应元件(Nrf2-ARE)信号通路是机体内最重要的抗氧化应激通路之一。近年来研究发现,在血管性痴呆、阿尔兹海默病、帕金森病等认知障碍相关的疾病中,机体可以通过激活Nrf2-ARE信号通路来增加内源性的抗氧化能力,最终使认知功能得到改善。因此,本文旨在对Nrf2-ARE信号通路的组成、调节及其与认知障碍相关疾病的关系作一综述。

神经干细胞衰老与核因子E2相关因子2/抗氧化反应元件信号通路的关系

目的建立D-半乳糖(D-gal)诱导小鼠神经干细胞(NSCs)体外衰老模型,探讨NSCs衰老与细胞核因子E2相关因子2(Nrf2)/抗氧化反应元件(ARE)信号通路的关系。方法取新生C57BL/6J小鼠全脑,分离、鉴定NSCs,培养至第3代,随机分为对照组和衰老组。对照组细胞在NSCs培养基中常规培养48 h,衰老组细胞在对照组基础上加入D-gal(终浓度为10 g/L)。细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测NSCs增殖活力;衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色检测衰老阳性神经球百分率;锥虫蓝染色检测细胞存活率;酶标比色法检测细胞培养上清液中超氧化物歧化酶(SOD)与过氧化氢酶(CAT)活性和丙二醛(MDA)含量;Western boltting检测NSCs中Nrf2和血红素加氧酶1(HO-1)蛋白表达水平;Real-time PCR检测GCLC和GCLM基因表达水平。结果与对照组相比,衰老组NSCs增殖活力明显下降,锥虫蓝染色显示,NSCs存活率下降明显,SA-β-gal染色阳性神经球百分率显著上升,SOD活性与CAT活性均显著降低,MDA含量显著升高,NSCs中Nrf2/ARE信号通路相关蛋白Nrf2和HO-1表达水平显著下调,通路相关GCLC和GCLM基因表达下调。结论采用D-gal可以构建NSCs体外衰老模型,其氧化损伤机制可能与抑制Nrf2/ARE抗氧化信号通路有关。

Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1-核因子E2相关因子2/抗氧化反应元件抗氧化应激通路在多发性硬化中作用的研究进展

多发性硬化(MS)是一种慢性炎症性疾病,主要是由T淋巴细胞引起,可使中枢神经系统产生氧化应激反应,导致脱髓鞘等病理改变。Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Keap1)-核因子E2相关因子2(Nrf2)/抗氧化反应元件(ARE)抗氧化应激通路是体内最重要的内源性抗氧化应激通路,激活该通路可启动下游解毒酶、抗氧化蛋白,参与清除氧自由基,维持细胞内氧化还原系统平衡,从而对神经退行性疾病起保护作用。通过药物或各种康复治疗手段激活该Keap1-Nrf2/ARE通路,减轻MS疾病进展的作用及未来MS治疗靶点是目前研究热点。

延龄草苷对脊髓损伤大鼠核因子E2相关因子2/抗氧化反应元件信号通路的影响

目的探索延龄草苷对大鼠脊髓损伤后核因子E2相关因子2(Nrf2)/抗氧化反应元件(ARE)通路及氧化应激反应的影响。方法雄性Sprague-Dawley大鼠108只,随机分为假手术组、模型组和延龄草苷组,每组36只,每组再分为1 d、3d和7d三个亚组,每个亚组12只。模型组和延龄草苷组采用改良Allen重物打击法制备髓损伤模型,假手术组不损伤脊髓。延龄草苷组每天给予延龄草苷200mg/kg灌胃,假手术组和模型组每天给予等量生理盐水,每天2次。术后1d、3d、7d进行BBB评分;术后7d,取损伤部位脊髓组织进行尼氏染色,观察形态学变化;ELISA检测脊髓内氧化应激因子丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)的变化;术后1d、3 d、7 d,Western blotting分析检测脊髓组织内Nrf2、Kelch样ECH关联蛋白1(Keap1)、血红素加氧酶-1(HO-1)和NAD(P)H醌氧化还原酶-1(NQO1)的表达情况。结果与模型组相比,延龄草苷组BBB评分提高(P<0.05);脊髓结构较完整,神经元形态较正常,尼氏小体数量增多;脊髓组织内SOD活性提高(P<0.05),MDA含量降低(P<0.05);脊髓内抗氧化相关蛋白Nrf2、Keap1、HO-1和NQO1的表达均升高(P<0.05)。结论延龄草苷对大鼠脊髓损伤有保护作用,可能通过抑制组织内氧化应激反应改善运动功能。

OsZEP2基因沉默对2,2′,5-三氯联苯胁迫下水稻抗氧化反应的影响

载脂蛋白基因OsZEP2沉默突变株(mutation type,MT)和野生型(wide type,WT)的水稻愈伤组织被暴露于10、50、100μg·mL-1的2,2′,5-三氯联苯(PCB18)的培养基3 d后,通过比较两种水稻愈伤组织的生长、PCB18积累和抗氧化反应的变化情况,来探究水稻在多氯联苯胁迫下OsZEP2基因对水稻解毒响应机制的影响.实验发现,PCB18可以抑制WT和MT的生长,但PCB18的中浓度胁迫对两种愈伤组织生长的促进作用十分明显,即有"hormesis"效应.PCB18对MT生长的抑制高于WT,低浓度CB18(10μg·mL-1)胁迫抑制MT生长(4.5%),中浓度PCB18(50μg·mL-1)促进MT生长(8.3%),高浓度PCB18(100μg·mL-1)抑制MT生长(9.9%).OsZEP2基因沉默后促进了PCB18在愈伤组织的积累,并导致培养基中的PCB18去除效率提高.OsZEP2基因沉默降低类胡萝卜素含量,导致MT本身的氧化胁迫增强;并且在不同浓度PCB18胁迫下,MT的类胡萝卜素含量稳定,MT的抗氧化反应活性低与WT.在PCB18胁迫下,MT体内的SOD和CAT酶的活性都明显低于WT,这可能是导致膜脂过氧化程度显著升高的重要原因之一.另外,两种嫩弱的愈伤组织中的POD酶抗氧化活性较弱,但OsZEP2沉默可以促进POD酶活性升高.因此,OsZEP2基因沉默导致植物体内的PCB18积累增多,抗氧化反应减弱,不利于植物对PCB18毒性的抵抗.

抗氧化反应元件调控的EGFP在HepG2细胞中的表达

目的:采用增强绿色荧光蛋白(EGFP)作为报告基因,用HepG2细胞构建可敏感、快速、方便地筛选出Ⅱ相酶诱导剂的评价体系。方法:通过分子生物学技术,将TK启动子克隆到pEGFP-N1上,再将人工合成的抗氧化反应元件(ARE)序列插入TK启动子上游,并转染入HepG2细胞株,经G418筛选,挑取单克隆扩大培养。结果:重组载体经酶切和PCR鉴定,发现有TK和ARE-TK基因特异条带。DNA测序发现ARE-TK-EGFP框架正确。转染细胞在荧光显微镜下可见大量的绿色荧光颗粒,该细胞经不同浓度已知Ⅱ相酶诱导剂tBHQ作用后,与EGFP表达量有剂量效应关系。结论:ARE调控的EGFP在HepG2细胞中成功表达。为进一步高通量筛选Ⅱ相酶诱导剂奠定了基础。

抗氧化反应元件信号通路调控胆囊癌细胞增殖、侵袭、迁移、凋亡的机制研究

目的 探讨血根碱调控胆囊癌细胞增殖、侵袭、迁移、凋亡的分子机制。方法 于2018年1月至2019年9月体外培养人胆囊癌细胞GBC-SD,用不同浓度(2、4、8μmol/L)的血根碱处理48 h。MTT法检测细胞增殖抑制率;Transwell实验检测细胞迁移、侵袭能力;流式细胞术检测细胞凋亡率;采用荧光探针DCFH-DA检测细胞内活性氧水平,应用多功能酶标仪检测丙二醛、还原型谷胱甘肽(GSH)含量与超氧化物歧化酶(SOD)活性;蛋白质印迹法检测增殖细胞核抗原(PCNA)、增殖标记蛋白细胞增殖核抗原-67(Ki-67)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、活化胱天蛋白酶-3(cleaved-caspase-3)与Kelch样ECH相关蛋白1(Keap1)/核因子E2相关因子2(Nrf2)/抗氧化反应元件(ARE)信号通路相关蛋白Keap1、Nrf2、血红素加氧酶1(HO-1)的表达量。结果 与空白组相比,血根碱不同浓度组细胞增殖抑制率[(2.07±0.68)%比(12.49±1.53)%、(23.08±2.64)%、(44.67±3.68)%]显著升高(P<0.05),迁移细胞数[(243.19±15.48)个比(146.34±12.56)个、(98.85±9.82)个、(75.79±7.37)个]与侵袭细胞数[(136.68±8.37)个比(97.43±7.15)个、(46.65±5.34)个、(38.15±4.53)个]显著减少(P<0.05),PCNA、Ki-67、MMP-2、MMP-9表达量显著降低(P<0.05),细胞凋亡率[(3.62±0.63)%比(8.59±1.02)%、(14.16±1.14)%、(18.84±1.65)%]显著升高(P<0.05),cleaved-caspase-3表达量显著升高(P<0.05);与空白组相比,血根碱低浓度组、血根碱中浓度组、血根碱高浓度组活性氧、丙二醛水平显著升高(P<0.05),SOD活性与GSH含量显著降低(P<0.05),Keap1、Nrf2、HO-1表达量显著降低(P<0.05)。结论 血根碱可能通过调控Keap1/Nrf2/ARE信号通路从而抑制胆囊癌细胞增殖、侵袭、迁移,促进细胞凋亡。

激活核因子E2相关因子2-抗氧化反应元件通路对尿毒症患者角膜内皮细胞功能的影响

目的探讨激活核因子E2相关因子2(Nrf2)-抗氧化反应元件(ARE)通路对尿毒症患者角膜内皮细胞功能的影响。方法 2011年1月至2012年6月该院收治的尿毒症患者60例为尿毒症组,选取同期健康体检人员60名为对照组,对比两组角膜内皮细胞形态学指标,分析激活N r f 2-A R E通路前后患者角膜内皮细胞形态学指标变化。结果激活前尿毒症组患者角膜内皮细胞密度(CD)、六角形细胞的百分数(6A%)及中央角膜厚度(CCF)均明显高于对照组,平均细胞面积(AVE)及细胞面积变异系数(CV)明显低于对照组;激活Nrf2-ARE通路后患者的CD、6A%及CCF明显低于激活前,AVE及CV明显高于激活前,均缩小了与对照组的差距。结论尿毒症患者角膜内皮细胞形态学存在显著变化,激活Nrf2-ARE通路可改善患者角膜内皮细胞功能。

基于Nrf2/ARE抗氧化应激途径探究乌梅丸对溃疡性结肠炎小鼠的作用机制

目的探究乌梅丸基于核因子E2相关因子2(Nrf2)/抗氧化反应元件(ARE)抗氧化应激途径对溃疡性结肠炎(UC)小鼠的作用机制。方法将70只SPF级雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组、UC组、美沙拉嗪组(MES组,0.82 g/kg MES)、乌梅丸低剂量组(WMW-L组,按生药5 g/kg)、乌梅丸中剂量组(WMW-M组,按生药10 g/kg)、乌梅丸高剂量组(WMW-H组,按生药20 g/kg)和乌梅丸高剂量+Nrf2抑制剂ML-385组(WMW-H+ML-385组,乌梅丸按生药20 g/kg+20 mg/kg ML-385),每组10只。末次给药后,对小鼠进行疾病活动指数(DAI)评分及结肠黏膜损伤评分。HE染色观察小鼠结肠黏膜组织的病理学变化。酶联免疫吸附试验(ELISA)测定小鼠血清和结肠组织白细胞介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子(TNF)-α、IL-6水平。硫代巴比妥酸比色法(TBA)测定小鼠血清和结肠组织丙二醛(MDA)含量。黄嘌呤氧化酶法测定小鼠血清和结肠组织超氧化物歧化酶(SOD)活性。二硫代二硝基苯甲酸(DTNB)直接法测定小鼠血清和结肠组织谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)活力。免疫组织化学染色法观察小鼠结肠组织中Nrf2的阳性表达。Western blot检测小鼠结肠组织血红素加氧酶1(HO-1)和NAD(P)H:醌氧化还原酶1(NQO1)蛋白的表达情况。结果与对照组相比,UC组小鼠DAI评分、结肠黏膜损伤评分、结肠组织病理学评分升高,血清和结肠组织中IL-1β、TNF-α、IL-6、MDA水平升高,结肠组织Nrf2、HO-1、NQO1蛋白表达升高,血清和结肠组织中SOD、GSH-px水平降低(P<0.05),结肠黏膜损伤严重。与UC组相比,MES组、WMW-M组、WMW-H组小鼠相应指标变化与上述相反,而结肠组织Nrf2、HO-1、NQO1蛋白表达升高(P<0.05),结肠黏膜损伤减轻。WMW-L组、WMW-M组、WMW-H组各指标变化呈剂量依赖性。WMW-H组与MES组差异无统计学意义;ML-385减弱了高剂量乌梅丸对UC小鼠结肠黏膜损伤的改善作用。结论乌梅丸可能通过激活Nrf2/ARE抗氧化应激途径减轻UC小鼠的结肠黏膜损伤。

木犀草素和铬离子配合物抗氧化性能及与过氧化氢自由基反应的机理（英文）

用密度泛函理论计算研究了木犀草素与Cr(Ⅲ)-木犀草素配合物的结构及它们的羟基键解离能。计算讨论了木犀草素与过氧化氢自由基反应的详细机理,并且用自然键轨道理论分析了氢原子转移机制。为了进一步验证理论研究所得出的结论,本工作还从实验角度进行了研究,结果表明,铬离子配合物清除过氧化氢自由基能力高于木犀草素,其实验结果与计算结果符合良好。

基于抗氧化反应元件的转基因细胞模型的建立

建立基于抗氧化反应元件(ARE)调控的GFP报告基因细胞模型。首先用PCR法扩增TK基本启动子克隆到pEGFP-N1上,构建pTK-GFP/Neo报告载体,再将人工合成的4个ARE重复序列依次插入到pTK-GFP/Neo载体的TK启动子上游,构建成ARE调控的真核报告载体p4ARE-TK-GFP/Neo,将该载体用脂质体转染法转染人HepG2肝癌细胞,经G418筛选,获得阳性克隆。扩增后经Ⅱ相代谢酶诱导物PDTC和tBHQ实验验证。结果表明:细胞发光度与诱导物有明显剂量效应关系,成功建立了基于抗氧化反应元件的转基因细胞模型。

转录因子NF-E2相关因子2-抗氧化反应元件信号路径及其肝脏保护作用进展

背景随着肝脏外科手术尤其是肝脏移植手术的发展，以转录因子NF-E2相关因子2（nuclearfactorerythroid2-relatedfactor2，Nrf2）与抗氧化反应元件（antioxidantresponseelement，ARE）抗氧化应激系统在肝脏损伤中的作用倍受关注。目的分析并总结Nrf2-ARE抗氧化系统在肝脏保护各方面的文献资料。内容简要介绍Nrf2，ARE的结构及其信号路径；综述了Nrf2基因缺失、Nrf2药物激活、Nrf2基因激活3类模型小鼠与野生小鼠肝脏对氧化应激的耐受性比较的结果。趋向Nrf2-ARE信号路径在肝脏中有一定的保护作用，为临床提供了新的思路。

核因子相关因子2-抗氧化反应元件信号传导通路对心血管疾病保护作用的研究进展

目前，因心血管疾病引起的死亡在人类的死因中仍居首地位。众所周知，氧化应激是高血压、动脉粥样硬化、缺血再灌注损伤及心脏衰竭等心血管疾病发病机制的重组成部分，而核因子相关因子2（Nrf2）处于氧化应激、炎症反应的核心地位，Nrf2通过与抗氧化反应元件（ARE）相互作用，介导编码抗氧化蛋白和二项解毒酶基因的基础表达和诱导表达，在心血管系统抗氧化中发挥重作用。以下就有关Nrf2-ARE信号传导通路对心血管疾病保护作用的研究进展进行综述。