抗蛋氨酸结构类似物突变株的筛选

以北京棒杆菌AS1.299经诱变后获得的高产蛋氨酸突变株N3-10作为出发菌株,依次采用蛋氨酸结构类似物亮氨酸、原亮氨酸和乙硫氨酸平板对诱变后的突变株进行筛选,得到蛋氨酸高产菌株依次为L3,LN7和E31.结果表明,亮氨酸对突变株N3-10的抑制质量浓度为8 g/L,原亮氨酸对突变株L3的抑制质量浓度为3 g/L,乙硫氨酸对LN7突变株的抑制质量浓度为3 g/L,经紫外诱变和3种蛋氨酸结构类似物的筛选,最终获得蛋氨酸产量最高突变株E31,产量为1.479 g/L,比出发菌株N3-10蛋氨酸产量高0.379 g/L.经5次传代,产量稳定.

筛选植物抗氨基酸突变体的研究进展

对筛选植物抗氨基酸及其类似物突变体的研究现状、筛选机制、实验程序、突变体的鉴定、存在问题及展望进行了综述。

枯草芽孢杆菌抗脯氨酸结构类似物突变株的筛选及突变株proBA基因的克隆和序列分析

利用亚硝基胍对枯草芽孢杆菌 9315 1进行诱变处理 ,获得了耐NaCl浓度达 14 %的突变株 ,同时发现该突变株也是一个抗脯氨酸反馈抑制突变菌株。其胞内自由脯氨酸的含量随着盐浓度的提高显著增加 ,说明其对渗透压的耐受能力与胞内自由脯氨酸的含量紧密相关。利用PCR方法克隆突变株的proBA基因 ,得到一个约 2 3kb的DNA片段 ,序列分析表明该片段含有一完整的proB基因和部分proA基因。与野生菌株的proB基因相比 ,突变株proB基因中有3个碱基发生了改变 ,其中一个碱基的变化 (从起始密码子开始第 781位由T→A)导致了一个氨基酸发生改变 (Ser→Thr) ,另外两个碱基变化为沉默位点突变。将该proB基因转入大肠杆菌脯氨酸营养缺陷型菌株 ,能够与其功能互补。同时对部分proA基因序列分析发现 ,其与proB基因头尾重叠 ,在proA基因起始密码子上游第 14个碱基处有一个类似于SD的序列 ,其所编码的氨基酸序列与枯草芽孢杆菌 16 8的同源性为 77%

氨基酸发酵的抗类似物(Analogue)

1α-氨基-β-氯丁酸:分子量137.6CH3CHCLCHNH2COOH,缬氨酸抗体2 AEC:S(2-氨乙基)一半胱氨酸:分子量164.2NH2CH2CH2·SCH2CHNH2COOH。

不规范使用核苷(酸)类似物抗病毒治疗的慢性乙肝患者的HBV耐药基因突变情况

目的分析不规范使用核苷(酸)类似物抗病毒治疗的慢性乙肝患者的HBV耐药基因突变情况,为临床疾病治疗提供条件。方法60例慢性乙肝患者均在2016年1月—2018年12月期间入该院接受治疗,对患者进行HBV耐药基因突变测试,分析HBV耐药基因突变特征,明确规范使用核苷(酸)类似物治疗的价值。结果突变率分析,总发生率为70.00%,比例较高,而不同突变形式分析,发现主要突变形式主要包括M2041、M204V、N236T+M204V、L180M+M204V,发生率分别为16.67%、18.33%、21.67%、13.33%,分析不同基因型突变率,发现B型占据比例最高,为59.52%,其次为C型,19.05%,BC混合型发生率最低,仅为7.14%。结论慢性乙肝患者在进行疾病治疗的过程中因为不规范使用核苷(酸)类似物引发耐药性,因此在疾病治疗早期可进行HBV耐药基因突变测试,更加全面了解患者自身特征,规范使用核苷(酸)类似物抗病毒治疗,提升疾病治疗质量。

哥纳香醇甲类似物对KB瘤株的抑制作用的构效关系研究

目的研究哥纳香醇甲的抗肿瘤活性构效关系。方法 经MTT法筛选了55个哥纳香醇甲类似物及中间体对KB瘤株的抑制作用。研究了以α-D-葡庚糖酸-δ-内酯为原料经9-10步合成的55个哥纳香醇甲类似物的抗KB瘤株活性与结构的关系。结果化合物9、11、21、25、34、38、44、49对KB瘤株的抑制作用强于哥纳香醇甲。结论哥纳香醇甲类似物8R构型、不饱和内酯及8位芳香酯为其活性的关键构型和基团。5,7-位的环状结构有利于增强活性。

六种豆类提取物的抗突变作用

Ames试验结果表明,六种豆类丙酮提取物对黄曲霉毒素B1（AFB1）,杂色曲霉和棕曲霉代谢提取物的致突变活性有不同程度的抑制作用。其中对AFB1诱导TA98,TA100突变株有抑制作用的分别有6种（占100％）和4种（占66.7％）;对杂色曲霉诱导TA98,

强效免疫抑制剂西罗莫司类似物FIM-Rap-02的分离与鉴定

从西罗莫司产生菌吸水链霉菌突变株FC904-30的发酵产物中,分离纯化获得西罗莫司类似物FIM-Rap-02的晶体。对FIM-Rap-02进行理化性质、光谱等分析,并通过单晶X-Ray衍射确定构型,结果证实它的结构与prolylrapamycin同质。

HBV细胞模型及其在抗病毒药物研究中的应用

由于乙型肝炎病毒(HBV)的宿主范围狭窄而缺少动物模型,因此细胞模型的建立和应用已成为HBV研究的必要条件。近年来在构建细胞模型的目的基因、转染方法和靶细胞方面有了许多进展。感染模型的建立不但为HBV感染肝细胞的早期机制的研究提供了条件,而且在耐药株的研究和新药的筛选、疗效评价和毒性研究中应用渐多。本文就HBV细胞模型的建立及其在抗病毒药物研究中的应用作了综述。

大肠杆菌CM/PDT抗反馈抑制突变体的构建及其性质

为了获得具有高催化活性且抗反馈抑制的大肠杆菌分支酸变位酶 预苯酸脱水酶 (chorismatemutase prephenatedehydrataseCM PDT) [EC5 .4 .99.5 EC4 .2 .1.5 1],通过相关菌种CM PDT氨基酸序列同源比较 ,寻找高度保守位点 .用定点突变及PCR法构建突变酶M1(缺失 30 4T、30 5G、Q30 6K)、M2 (缺失W 338)、M3(缺失 30 1～ 386位氨基酸 )、M32 9(E32 9A)和M374 (C374A) ,野生型及各突变型基因与pET2 8a(+ )载体连接后 ,表达融合蛋白 .在非变性条件下 ,由TALON金属螯合亲和层析柱纯化野生型和突变体的酶蛋白 .酶活性测定表明 ,突变体M3的PDT活性下降为野生型活性的 2 9% ,但保持了CM活性 .突变体M374保持了CM ,PDT两种酶的活性 ,突变体M1、M2、M32 9的CM ,PDT活性有一定程度的提高 .酶抗反馈抑制作用检测表明 ,突变体M3、M374解除了苯丙氨酸的反馈抑制作用 ,M1、M2、M32 9部分解除了苯丙氨酸的反馈抑制作用 .与含野生型pheA基因的E .coliBL2 1菌株相比 ,含突变基因的E .coliBL2 1菌株对 10mmol L的苯丙氨酸代谢类似物具有强的抗反馈抑制作用 ,其中M1,M2 ,M3对 2 0mmol

核苷类似物治疗慢性乙型肝炎的耐药性问题

目前抗HBV药物大多为核苷类似物,它们通过干扰或抑制HBV的复制而起抗病毒作用。更昔洛韦、阿昔洛韦与贲昔洛韦等是第一代用于抗HBV治疗的核苷类似物,但在体内的抗病毒效果并不令人满意。以拉咪呋啶为代表的第二代核苷类似物显示出其强大的抗HBV活性,但其作用机理是抑制而不是杀灭HBV,

植物细胞突变体及其应用前景

一、前言 突变是自然界中生物进化的基础,然而,自发突变的频率极低,而且不易选择有益的变异。1927年,Muller首先用X射线处理果蝇,发现X射线有提高突变频率的作用。此后,科学工作者开始探索采用各种物理化学因素来作为环境诱变剂以提高生物的突变率,以期从中选出具有稳定遗传性状的突变体后代。 70年代以前,大多以整体植物为材料,通过诱变。筛选突变体,直接或间接地用于作物育种或生物遗传规律的研究。由于科学技术的发展,人们建立并逐步完善了植物组织和细胞培养技术。应用细胞培养技术。

用乳酸发酵短杆菌2256的突变株生产L-苯丙氨酸

从L-谷氨酸生产杆菌—乳酸发酵短杆菌2256诱变的酪氨酸、蛋氨酸双重营养缺陷型和抗代谢物突变株中筛选出了优良的L-苯丙氨酸生产菌株。选出的菌株—乳酸发酵短杆菌No.123,当以13％的葡葡糖为碳源时,72小时产L-苯丙氨酸21.7mg/ml。No.123菌株积累L-苯丙氨酸比母本菌株No.808高5.17倍。在迄今为止的报导中,这个收率是最高的。在培养基中添加反丁烯二酸,促进了L-苯丙氨酸的生产。培养基中其它氨基酸的积累,与主要产物L-苯丙氨酸相比可以忽略不计。

恩替卡韦可导致HIV耐药突变株出现

据Medscape．com5月1日报道，第14届逆转录病毒和机会性感染国际会议（CROI）上发表的论文指出，强效抗HBV药物恩替卡韦已被证实也具有抑制HIV活性的作用，但是已在至少3例患者导致了对核苷酸类似物耐药的HIV突变株的出现。

{苯基-[(吡啶-4-羰基)-氨基]-甲基}-膦酸二烷基酯的合成与波谱表征

α-氨基膦酸及其衍生物作为天然氨基酸的含磷类似物,具有多种生物活性,它的合成与性质的研究引起人们的浓厚兴趣.合成了一系列含磷化合物,产物经元素分析、红外光谱、核磁共振、质谱鉴定,并初步研究这些化合物的抗菌与抗肿瘤生物活性.

慢性乙型肝炎抗病毒治疗的研究现状

我国为乙型肝炎高发区,总流行率达57.6％,其中2.5％发展为慢性肝炎。肝炎后肝硬变和原发性肝痛使慢性乙型肝炎的总死亡率比普通人群高4倍。慢性乙型肝炎经历免疫耐受、免疫清除和免疫抵抗三个阶段,在免疫清除和免疫抵抗阶段,病毒复制增加是诱导肝炎反复活动的直接原因。乙型肝炎的慢性化机理尚未完全阐明,寻求终止病毒复制的方法和策略,以控制肝炎活动、防止肝硬变和肝癌,是目前慢性乙型肝炎临床和基础研究的热点。

拉米夫定抗病毒作用和机体免疫功能的相互影响

拉米夫定(Lamivudine,3TC,商品名Heptodin贺普丁),是校苷类似物2’脱氧.3’硫代胸腺胞苷的左位镜像体。核苷类似物的左位镜像体对病毒的逆转录酶有选择性作用,而对人体DNA多聚酶作用较小。毒性极低。拉米夫定有很强的抗乙肝病毒(HBV)和HIV作用。拉米夫定抗乙肝病毒机理一般认为是选择性掺入病毒DNA链中,干扰病毒DNA多聚酶基因中与逆转录活性有关的保守序列复制,竞争性抑制病毒复制。

慢性乙型肝炎的抗病毒治疗进展

近年来,慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)的抗病毒治疗取得迅速进展:新的抗乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)药物不断出现;抗病毒药物的临床应用证据不断积累,如特殊人群患者的治疗、

紫外线和^(60)Coγ射线对钝顶节旋藻(Arthrospira platensis)的诱变效应

将对数期的钝顶节旋藻(Arthrospira platensis)(原名钝顶螺旋藻,Spirulina platensis)A9菌株用超声波40 s预处理破碎成2个~4个细胞大小的片断,分别用不同剂量的紫外线(UV)和60Coγ射线处理,诱变后经3小时避光预培养分别接种于液体和固体培养基进行培养。固体培养时UV照射70 s和60Coγ照射3 500 Gy后无菌体存活,而在液体培养中高剂量处理的样品可以部分恢复生长。将诱变后的菌液分别加入20μg.mL-1的ρ-氟苯丙氨酸(-ρfluorophenylalan ine,FPA)和20μg.mL-1的刀豆氨酸(L-canavan ine su lphate,CS),放入光照培养箱中预培养3 d^4 d后涂于含相同浓度的氨基酸类似物FPA和CS平板,培养30 d后计算抗氨基酸类似物突变株的突变率。UV对A9菌株的完全致死剂量LD和存活率37%时的剂量D37值分别为70 s和22 s,LD/D37=3.18。A9菌株经UV诱变25 s时存活率为28.7%,抗FPA和抗CS突变率分别为2.31×10-3和1.50×10-3,最大诱变效应比(MME)分别为48.53和52.63。60Coγ射线对A9菌株的LD和D37值分别为3 500 Gy、1 250 Gy,LD/D37=2.8。60Coγ射线显著提高A9菌株的突变率,当诱变剂量为2 000 Gy、存活率为10.49%时A9菌株突变率最高,抗FPA和抗CS突变率分别为5.07×10-3和0.964×10-3,最大诱变效应比(MME)分别为241.43和74.15。60Coγ射线对钝顶节旋藻A9菌株的损伤比UV造成的损伤强烈(低的LD/D37值),比UV具有较大的诱变效应(高MME值)。采用两种诱变剂获得的抗FPA突变率都要高于抗CS突变率。通过诱变获得了大量的抗氨基酸类似物突变株,为遗传重组研究提供携带重要遗传标记的材料。