视神经脊髓炎中抗水通道蛋白4抗体检测进展

视神经脊髓炎(NMO)是累及视神经和脊髓的脱髓鞘疾病。随着特异性抗体—抗水通道蛋白4(AQP4)抗体的发现,众多方法已被用于测定血清中抗AQP4抗体。抗AQP4抗体对NMO诊断具有高度敏感性和特异性。

视神经脊髓炎与其特异性抗体——抗水通道蛋白4抗体(综述)

视神经脊髓炎(NMO)是累及视神经和脊髓的脱髓鞘疾病。最近,它的特异性抗体———抗水通道蛋白4(AQP4)抗体被发现。AQP4主要分布于中枢神经系统(CNS),参与胶质细胞与脑脊液(CSF)以及血液之间水的调节和运输。NMO患者的AQP4蛋白显著减少甚至丧失,血液及CSF中存在抗-AQP4抗体。实验证实,抗-AQP4抗体对NMO的诊断具高度敏感性和特异性,其抗体滴度水平有助于判断疗效和预后。

血清水通道蛋白4-IgG抗体相关骨骼肌损害

视神经脊髓炎（Neuromyelitis optica,NMO）是一种体液免疫介导为主的中枢神经系统（Central nervous system,CNS）炎性脱髓鞘疾病,其特异性抗体标志物血清抗水通道蛋白4（Aquaporin-4,AQP4）-IgG抗体的发现[1],将NMO与多发性硬化Multiple sclerosis,MS）区别开。

血清水通道蛋白4抗体与视神经脊髓炎谱系疾病严重程度的关系研究

目的 探讨血清水通道蛋白4抗体(AQP4-IgG)与视神经脊髓炎谱系疾病严重程度的关系,为临床诊治提供参考。方法 选取2015年2月至2022年7月安徽医科大学第一附属医院收治的86例视神经脊髓炎谱系疾病患者作为观察组,另选取同期于安徽医科大学第一附属医院体检的50例健康者作为对照组进行回顾性分析。根据扩展功能障碍状态量表(EDSS)评分将观察组患者分为轻中度组(55例,EDSS≤3分)和重度组(31例,EDSS>3分)。比较观察组与对照组研究对象血清AQP4-IgG水平,比较不同严重程度患者血清AQP4-IgG水平及脊髓病变节段数,分析血清AQP4-IgG水平与病情严重程度和脊髓病变节段数的相关性。结果 观察组研究对象血清AQP4-IgG水平高于对照组(P<0.05)。重度组患者血清AQP4-IgG水平高于轻中度组(P<0.05)。两组患者脊髓病变节段数比较,差异无统计学意义(P>0.05)。Pearson相关性分析显示,血清AQP4-IgG水平与病情严重程度呈正相关(P<0.05);血清AQP4-IgG水平与脊髓病变节段数无明显相关性(P>0.05)。结论 视神经脊髓炎谱系疾病患者AQP4-IgG水平与病情严重程度呈正相关,可反映神经功能损害情况。

寡克隆区带及抗水通道蛋白4抗体在多发性硬化诊断中的意义

目的通过观察多发性硬化(multiple sclerosis,MS)患者寡克隆区带(oligoclonal bands,OCB)及抗水通道蛋白4(aquaporin-4,AQP4)抗体的阳性率,为临床MS的诊断及鉴别诊断提供一定的参考。方法入组30例MS、48例神经系统非炎性病变(neurological non-inflammatory disease,NND)及50例外科手术患者。分析3组患者OCB、脑脊液及血清抗AQP4抗体阳性率的差异。结果 NND组与外科手术组OCB、脑脊液及血清抗AQP4抗体阳性率的差异无统计学意义(P>0.05)。MS组与对照组(NND组+外科手术组)脑脊液抗AQP4抗体阳性率差异无统计学意义(P>0.05),MS组与对照组OCB、血清抗AQP4抗体阳性率差异有统计学意义(P<0.01)。结论 OCB阳性对MS具有诊断意义。MS部分患者可表现为血清或脑脊液抗AQP4抗体阳性,诊断时需结合病史、临床体征及影像学特点等综合分析。

水通道蛋白4抗体阴性视神经炎临床与磁共振影像研究

目的:通过水通道蛋白4(AQP4)抗体阴性视神经炎临床与磁共振影像研究,探讨影响视神经的独立危险因素。方法:回顾性分析我院50例AQP4抗体阴性视神经炎患者的临床资料。结果:在基线水平上及治疗后的随访终点发现50例患者中分别有85、26只眼睛的最佳矫正视力低于0.1;急性期视神经炎患者核磁共振成像(MRI)有36例出现多节段受累;多元逐步回归分析发现,基线视力水平、视神经受累节段数量是影响视神经的独立危险因素(P<0.05);分析随访资料发现,单相病程、疾病复发、转变为视神经脊髓炎谱系疾病分别为40例、9例、1例。结论:AQP4抗体阴性视神经炎病发率较高,预后视功能较差;易复发,但不易转变为视神经脊髓炎谱系疾病。

抗水通道蛋白4抗体与中枢神经脱髓鞘性神经免疫性疾病

2004年Lennon等[1]首次发现视神经脊髓炎（NMO）患者血清中存在一种能与小鼠血脑屏障及其附近组织结合的抗体——NMO-IgG,随后的研究证实NMO-IgG的靶抗原为水通道蛋白4（AQP4）[2]。由于NMO特异性抗体AQP4-IgG的发现,使NMO也由原来归类为MS的严重变异型重新定义为有别于MS的中枢神经系统脱髓鞘性疾病[3]。

抗水通道蛋白4抗体诊断视神经脊髓炎的临床价值

目的通过检查视神经系统脊髓炎疾病患者的空腹抗水通道蛋白4抗体(抗AQP4抗体)水平,探讨神经脊髓型多发性硬化疾病中抗AQP4抗体的敏感性,并进一步研究抗AQP4抗体在神经脊髓炎临床诊断中的应用价值。方法选取沧州市人民医院2012年1月至2014年1月100例神经视神经脊髓炎疾病患者,采用间接免疫荧光法检测患者抗AQP4抗体水平。结果按照研究界定标准,100例视神经脊髓炎患者中53例为阳性。在分别转染至pcDNA3.1及pcDNA3.1-hAQP4质粒的FRT细胞上视神经脊髓炎患者血清免疫染色结果提示,AQP4抗体与视神经脊髓炎血清识别靶抗原为同种蛋白。结论抗AQP4抗体是视神经脊髓炎患者血清中自身抗体NMO-IgG所识别的靶蛋白,在人体视神经脊髓炎的发病过程中起到了十分重要的作用。

8例抗水通道蛋白4抗体阳性视神经炎临床分析

回顾性分析2019年1月至2020年3月沈阳第四人民医院眼科确诊为抗水通道蛋白4(AQP4)抗体阳性视神经炎8例(12眼)患者的临床特点及预后。结果显示,8例患者中,女性7例(87.5%),男性1例(12.5%);年龄30~80岁,其中70岁以下6例(75%);2例患者既往有视神经炎发病史,4例患者双眼先后发病,最长间隔30 d,最短间隔5 d;7例患者(87.5%)出现眼球转动痛,并伴有头痛;8例(12眼)视野均出现垂直或者水平偏盲;8例7眼(58.3%)相对性传入性瞳孔障碍阳性;5眼(41.67%)视盘水肿;7例(87.5%)血清学检查发现自身免疫性抗体阳性,另外1例结核抗体弱阳性。脑部MRI检查3例(37.5%)出现多发腔隙脑梗死;治疗前7眼(58.3%)最佳矫正视力<0.1。4例甲强龙(1 g)激素冲击治疗,另外4例年龄偏大,采用丙种球蛋白静脉注射联合球后曲安奈德局部治疗。平均随访6个月,1例治疗1个月后出现中枢神经症状,脊髓影像学检查确诊视神经脊髓炎。激素冲击治疗后有1例1眼视力由FC/30 cm提高到0.6,其他患者视力均无改变。因此认为AQP4抗体阳性视神经炎患者视功能受损严重,且对激素治疗不敏感。患者同时合并其他自身免疫性抗体阳性,早期明确诊断和积极治疗可能保存部分有用视功能。

血清水通道蛋白4抗体测定对视神经脊髓炎的诊断及预后判断价值

目的:探讨血清水通道蛋白4(AQP4)抗体检测对视神经脊髓炎(NMO)诊断及预后判断的临床价值。方法:收集2010年1月至2013年12月在温州医科大学附属第一医院神经内科住院或门诊就诊的48例NMO、33例脊髓炎(TM)[包括26例长节段脊髓炎(LETM)和7例复发性脊髓炎(r LETM)]、30例视神经炎(ON)[包括25例双眼视神经炎(BON)和5例复发性视神经炎(RION)]、52例多发性硬化(MS)及16例其它神经系统疾病(OND)的患者血清及相关临床资料。采用细胞免疫荧光法检测血清AQP4抗体。分析各组患者血清AQP4抗体的阳性率及抗体滴度,比较AQP4抗体阳性NMO患者与AQP4抗体阴性患者的临床特征。通过绘制受试者工作特征曲线(ROC曲线),评价AQP4对NMO诊断的敏感性和特异性。应用Kaplan-Meier曲线分析血清AQP4抗体阳性患者进展为NMO的累计概率。结果:NMO组AQP4抗体阳性率最高(87.50%),其后依次为r LETM组(85.71%)、RION组(80.00%)、LETM组(30.70%)、BON组(8.00%)和MS组(3.85%),OND组抗体检测为阴性。NMO组中血清AQP4抗体阳性患者在性别构成比、确诊为NMO时间及伴有严重神经炎的比例等方面,与抗体阴性患者相比差异有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线提示血清AQP4抗体对诊断NMO的敏感性为87.5%,特异性为85.4%。KaplanMeier曲线提示AQP4抗体阳性患者进展为NMO的累积概率明显高于抗体阴性的患者(P<0.05)。结论:血清AQP4抗体检测对诊断NMO具有较高的敏感性及特异性,且有助于NMO预后和转归的判断。

视神经脊髓炎患者血清水通道蛋白4抗体水平与临床特征的相关性

目的探讨视神经脊髓炎(neuromyelitits optica,NMO)患者急性期血清水通道蛋白4(aquaporin-4,AQP-4)抗体水平与临床特征的相关性。方法利用荧光免疫沉淀法(fluorescence immunoprecipitation assay,FIPA)对作者医院确诊的78例NMO患者血清AQP-4抗体进行定量检测,研究抗体水平与临床特征的相关性。结果 (1)在78例NMO患者中,血清AQP-4抗体的阳性率为73.1%。(2)Spearman相关分析显示,EDSS评分、脊髓受累节段数、头MRI病灶数均与血清AQP-4抗体水平呈正相关(r=0.423,P=0.0001;r=0.355,P=0.002;r=0.286,P=0.022)。至下一次复发间隔时间与血清AQP-4抗体水平无明显相关性(r=-0.126,P=0.532)。结论 AQP-4抗体水平与NMO疾病严重程度有一定相关性,但急性期血清AQP-4抗体水平预测疾病复发的意义可能不大。

中枢神经脱髓鞘疾病血清水通道蛋白4抗体检测的临床意义

目的研究中枢神经脱髓鞘疾病患者血清水通道蛋白4抗体(AQP4-Ab)阳性率,并探讨其临床意义。方法采集2008年11月至2010年10月间就诊于我院神经内科门诊和病房的185例中枢神经系统脱髓鞘疾病患者血清,其中视神经脊髓炎(NMO)72例,多发性硬化(MS)68例,视神经炎(ON)4例,横贯性脊髓炎(TM)41例;后者包括非长节段横贯性脊髓炎(nLETM)19例,单次发作长节段横贯性脊髓炎(mLETM)14例,复发长节段横贯性脊髓炎(rLETM)8例。采用细胞间接免疫荧光技术检测患者血清AQP4-Ab,统计其阳性率并进行分析。结果 AQP4-Ab在NMO、MS、ON、TM组的阳性率分别为72.2%(52/72)、5.9%(4/68)、25.0%(1/4)、17.1%(7/41),NMO组显著高于MS组(P<0.01);nLETM、rLETM和mLETM组AQP4-Ab阳性率分别为5.3%(1/19)、62.5%(5/8)和7.1%(1/14),rLETM组显著高于nLETM组(P<0.01)和mLETM组(P<0.05)。rLETM和NMO组间AQP4-Ab阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。结论 AQP4-Ab在NMO和rLETM患者血清阳性率高,支持两者同属于视神经脊髓炎谱系疾病;AQP4-Ab可以作为诊断NMO并与MS相鉴别的重要指标,对于AQP4-Ab阳性患者应给予高度关注和更为积极的免疫抑制治疗。

首次检测水通道蛋白-4抗体阴性视神经脊髓炎谱系疾病的临床转归

目的分析水通道蛋白-4抗体(aquaporin-4 immunoglobulin G antibodies,AQP4-IgG)阴性的视神经脊髓炎谱系疾病(neuro myelitis optica spectrum disorder,NMOSD)患者临床特征、抗体演变以及转归。方法纳入中山大学附属第三医院神经科首次检测AQP4-IgG阴性的NMOSD患者15例,定期门诊随访,收集临床及实验室检查资料,分析其临床转归。结果15例AQP4-IgG阴性患者平均随诊67个月,以视神经炎(optic neuritis,ON)症状起病最多见(8例)。动态复查血清AQP4-IgG,其中4例(27%)由阴性转为阳性,2例血清不稀释处理时显示极低滴度(滴度为1:1)阳性,9例持续阴性。随访中,1例患者最终修正诊断为多发性硬化,4例诊断为AQP4-IgG阳性NMOSD。AQP4-IgG从阴性转变为阳性的时间节点临床可无复发(1例),但持续阴性患者也出现临床复发(3例)。结论AQP4-IgG阴性NMOSD患者最常累及视神经;临床随访中AQP4-IgG可能发生血清学转变,患者诊断及转归不同。

水通道蛋白4抗体阳性和阴性视神经脊髓炎谱系病患者临床表现的分析和比较

目的通过对水通道蛋白4抗体（AQP4-IgG）阳性和阴性视神经脊髓炎谱系病（NMOSD）患者临床表现差异的分析，探讨NMOSD基于临床及病理机制的异质性。方法根据2015版NMOSD诊断标准确诊NMOSD患者80例，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测其血清AQP4-IgG水平，将患者分为AQP4-IgG阳性组和阴性组，观察其与2006版NMO诊断标准的差异，同时对两组性别比例构成、年龄、起病首发症状、受累脊髓节段、扩展致残量表评分（EDSS）、脑脊液细胞数和蛋白水平、是否伴颅内病灶、是否伴抗核抗体（ANA）和抗可提取性核抗原抗体（ENA）异常及寡克隆区带阳性比例差异进行比较。结果采用2015版NMOSD诊断标准较2006版对疾病进行诊断的敏感性有了较大提升，尤其是对伴有AQP4-IgG阳性患者；脊髓受累节段长度同EDSS评分呈正相关（P〈0．01，r=0．952）；AQP4-IgG阳性患者抗体滴度水平同EDSS评分呈正相关（P〈0．01，r=0．286）；同AQP4-IgG阴性患者比较，阳性患者女性比例更高（P〈0．01），而两组患者年龄、起病首发症状、受累脊髓节段、EDSS评分、脑脊液细胞数和蛋白水平、是否伴颅内病灶和伴ANA和ENA抗体谱异常及寡克隆区带阳性所占比例差异则无统计学意义（P〉0．05）。结论2015版NMOSD诊断标准对临床诊疗有实用性指导意义，对AQP4-IgG阳性和阴性患者临床观察将加深对NMOSD临床及病理机制的异质性了解。

水通道蛋白4抗体对视神经脊髓炎的诊断价值

目的检测中枢神经系统(CNS)脱髓鞘疾病患者血清水通道蛋白4抗体(即NMO-IgG)的表达,并探讨其对视神经脊髓炎(neuromyelitis optica,NMO)的诊断价值。方法收集2011-01-2013-01就诊于中国医科大学附属第一医院神经内科的CNS脱髓鞘疾病患者50例〔其中NMO患者10例,长节段横惯性脊髓炎(longitudinally extensive transverse myelitis,LETM)患者10例,多发性硬化(multiple sclerosis,MS)患者30例〕及30名健康人的血清,采用ELISA试剂盒检测血清NMO-IgG水平。结果 NMO组、LETM组、MS组及健康对照组NMO-IgG的阳性率分别为60%(6/10)、50%(5/10)、10%(3/30)、0(0/30)。NMO组与LETM组NMO-IgG阳性率均高于MS组(P<0.05)。NMO-IgG诊断NMO的灵敏度为60%,特异度为95%(57/60)。结论 NMO和LETM患者血清NMO-IgG阳性率均较高,支持两者同属于视神经脊髓炎疾病谱(neuromyelitis optica spectrum disorders,NMOSD);NMO的诊断标准仍需建立在临床及MRI诊断的基础之上,NMO-IgG可作为一项重要的辅助诊断指标,有助于NMO的鉴别诊断。

水通道蛋白4抗体在视神经脊髓炎发病机制中的作用

视神经脊髓炎(NMO)是主要累及视神经和脊髓的中枢神经系统自身免疫性脱髓鞘疾病,既往在其与多发性硬化的关系上一直存有争议,水通道蛋白4(AQP4)抗体的发现,不但为NMO是独立于MS的疾病实体提供了新的证据支持,而且把NMO的研究推上了一个新的水平。该文就AQP4抗体在NMO发病机制中的作用,包括介导星形胶质细胞损伤、血-脑脊液屏障破坏、炎性反应细胞浸润、少突胶质细胞损伤和髓鞘破坏等方面进行综述。

细胞免疫荧光法在视神经脊髓炎患者血清及脑脊液中水通道蛋白4抗体检测中的运用价值

目的探讨细胞免疫荧光法(CBA)在视神经脊髓炎患者血清与脑脊液水通道蛋白4抗体(AQP4-Ab)检测中的运用价值。方法选择多发性硬化患者52例为硬化组,视神经脊髓炎患者54例为脊髓炎组,体检正常的自愿者50例为正常组。分别采用组织间接免疫荧光检测(IIF)、细胞免疫荧光法(CBA)和酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清和脑脊液标本(正常组未提取)的AQP4-Ab,比较各方法 AQP4-Ab的阳性检出率、特异性和灵敏度。结果 CBA、IIF和ELISA对脊髓炎组血清标本和脑脊液标本的AQP4-Ab阳性检出率显著高于硬化组和正常组(P<0.05)。CBA对脊髓炎组患者脑脊液标本和血清标本的AQP4-Ab阳性检出率分别为87.04%、70.37%,显著高于其他两种方法(P<0.05)。不同方法对脊髓炎组患者血清和脑脊液标本AQP4-Ab检测的敏感性为:CBA>IIF>ELISA,且有统计学差异(χ~2=7.394、14.687,P<0.05),但是不同方法的特异性无差异(P>0.05)。结论 AQP4-Ab阳性表达与视神经脊髓炎的发生有一定关系。在CBA、IIF和ELISA等检测方法中,CBA的阳性检出率和灵敏度最高,适宜视神经脊髓炎的早期诊断。

小鼠脑实质注射水通道蛋白4抗体所致的病理损伤

【目的】探讨小鼠脑实质注射视神经脊髓炎谱系疾病(NMOSD)患者来源水通道蛋白4(AQP4)抗体(AQP4-IgG)造成的病理损伤,以及全身免疫状态对局部病灶的影响。【方法】于C57BL/6小鼠诱导实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE),在发病高峰期脑实质局部注射AQP4-IgG阳性患者血清来源的IgG和健康人补体(hC)(EAE+AQP4-IgG+hC组,n=5),以单纯脑实质注射IgG和hC(AQP4-IgG+hC组,n=5)与EAE小鼠脑实质注射生理盐水(NS;EAE+NS组,n=5)为对照组。通过免疫荧光方法,比较3组病灶中AQP4、星形胶质细胞胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、少突胶质细胞髓鞘碱性蛋白(MBP),以及炎性细胞(T淋巴细胞、中性粒细胞和巨噬细胞)浸润等指标的异常。【结果】AQP4-IgG联合hC注射可以造成小鼠局灶性脑实质病理损伤,包括星形胶质细胞损伤,脱髓鞘以及炎性细胞浸润。与单纯AQP4-IgG+hC组相比,EAE+AQP4-IgG+hC组脑实质AQP4缺失面积(P=0.008)及GFAP缺失面积(P=0.016)显著增大,MBP缺失面积呈增大趋势;CD3+T细胞浸润的血管套数量、中性粒细胞浸润的血管套数量以及巨噬细胞浸润面积改变未达统计学差异。EAE+NS组亦可见注射周边星形胶质细胞增生,但无AQP4、GFAP与MBP缺失,炎性细胞主要分布在注射针道周围。【结论】小鼠脑实质注射AQP4-IgG联合hC可致显著局灶性病理损伤,而诱导EAE造成的全身免疫激活状态可加重该损伤;EAE联合AQP4-IgG局部注射能更好模拟NMOSD临床发病机制。

多种方法检测视神经脊髓炎患者血清及脑脊液中水通道蛋白4抗体的临床应用

目的讨论并分析采用不同方法检测视神经脊髓炎患者血清及脑脊液中水通道蛋白4抗体的临床应用价值。方法分别采用组织间接免疫荧光检测(IIF)、细胞免疫荧光法(CBA)及酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测我院2014年1月至2014年12月收治的视神经脊髓炎患者(NMO组)、多发性硬化患者(MS组)的血清及脑脊液中水通道蛋白4抗体的表达,同时测定健康受试者(对照组)的血清水通道蛋白4抗体的表达,分析3组间的差异。结果 3种方法检测对照组血清中AQP4-Ab的表达阳性率均为0.0%。3种方法在NMO组与MS组患者血清及脑脊液中AQP4-Ab的阳性结果显示NMO组检出率均显著高于MS组(P<0.05),其中,CBA在NMO组AQP4-Ab的阳性检出率最高,分别为血清中73.1%与脑脊液中85.1%。比较3种方法的敏感性:CBA>IIF>ELISA;比较3种方法的特异性:CBA>ELISA>IIF。其中,3种方法的敏感性有差异(χ2=7.115,P=0.029),3种方法的特异性无差异。结论细胞免疫荧光法检测神经脊髓炎患者的血清及脑脊液中水通道蛋白4抗体的阳性率、敏感性高,适于临床应用。

视神经炎临床分型与水通道蛋白4抗体

视神经炎(optic neuritis,ON)临床分型较为复杂。其中特发性脱髓鞘性ON与经典多发性硬化关系密切,而其他免疫介导性ON的发病机制和临床转归尚不明确。水通道蛋白4抗体作为对视神经脊髓炎(NMO)诊断敏感度和特异度较高的自身免疫抗体,在复发性ON和视功能恢复较差的ON患者中阳性率高,而且抗体阳性的ON更易发生脊髓损害或进展成为NMO。