溶解肠杆菌YH16抗汞操纵子的克隆与分析

目的通过对从污染地区分离出的抗汞菌株——溶解肠杆菌YH16的研究,获得新的抗汞操纵子基因,为汞污染环境的微生物修复打下基础。方法通过质粒消除实验确定抗汞基因的位置,通过构建基因文库的方式筛选获得新的抗汞操纵子基因(mer)。结果YH16的抗汞操纵子位于质粒上,该操纵子长达6048bp,由7个ORF组成,依次为merT、merP、merC、merA、merD、tnpA、tnpA,与典型的Tn501mer操纵子和Tn21mer操纵子相比,缺少merR。结论获得了缺少merR基因的mer操纵子,具有理论研究意义,并为抗汞工程菌的构建打下基础。

抗汞菌株的分离鉴定及特性

从污染物中分离到一株细菌 ＫＨ４，经鉴定为假单胞菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｐ．）。该菌可在４０ μｇ／ｍＬ的ＨｇＣｌ２中生长，当ＨｇＣｌ２浓度为３０ μｇ／ｍＬ时，２４ ｈ去汞率为９１．７％。该菌的最适生长温度为３０℃，ｐＨ为７。该菌经质粒检测和转化实验结果表明具有一抗汞质粒，且可通过转化转移。