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水稻抗潮霉素基因转化系统的获得 被引量:1
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作者 许明子 刘宪虎 +2 位作者 具红光 严一字 吴基日 《延边大学农学学报》 1999年第3期173-178,共6页
用基因枪法将具有抗潮霉素基因(hpt) 的质粒DNA( 质粒PSBG102) 导入到水稻品种延农黑1 号的愈伤组织中,获得了抗潮霉素的愈伤组织,对抗性愈伤组织进行再分化处理,获得了再分化水稻植株,经PCR 鉴定和瑟慎(s... 用基因枪法将具有抗潮霉素基因(hpt) 的质粒DNA( 质粒PSBG102) 导入到水稻品种延农黑1 号的愈伤组织中,获得了抗潮霉素的愈伤组织,对抗性愈伤组织进行再分化处理,获得了再分化水稻植株,经PCR 鉴定和瑟慎(southern) 杂交,确认再分化植株全部是转基因植株,这些转基因植株含有1 ~13 个拷贝的hpt 基因. 展开更多
关键词 水稻 抗潮霉素基因 基因 基因系统 瑟慎杂交
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抗潮霉素(hygromycin)基因(HPT)向水稻愈伤组织的导入研究 被引量:3
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作者 刘宪虎 许明子 《延边大学农学学报》 1998年第2期3-6,17,共5页
用基因枪(particlegun)将具有抗潮霉素(hygromycin)基因(HPT)的质粒DNA(质粒PSBG102)导入到水稻品种延农黑1号的胚性愈伤组织中,共处理了214个愈伤组织块,用含潮霉素的KSP培养基进... 用基因枪(particlegun)将具有抗潮霉素(hygromycin)基因(HPT)的质粒DNA(质粒PSBG102)导入到水稻品种延农黑1号的胚性愈伤组织中,共处理了214个愈伤组织块,用含潮霉素的KSP培养基进行选择培养,筛选出60个在含潮霉素的选择培养基上生长和增殖良好的愈伤组织块,经PCR鉴定。 展开更多
关键词 基因 基因导入 水稻 愈伤组织 抗潮霉素基因
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潮霉素和新霉素抗性基因转基因小鼠的建立及其表达研究 被引量:3
3
作者 党素英 麻孙恺 +2 位作者 孙霞 严兰珍 王铸钢 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期159-162,共4页
建立潮霉素 (hygromycin ,hyg)和新霉素 (neomycin ,neo)抗性基因转基因小鼠系 ,以获得两种抗性基因同时表达的小鼠胚胎成纤维细胞 (MEFs) ,为条件性基因剔除或小鼠胚胎干细胞克隆的筛选创造条件。将pTK hygR pA ,PGK neoR pA两个转录... 建立潮霉素 (hygromycin ,hyg)和新霉素 (neomycin ,neo)抗性基因转基因小鼠系 ,以获得两种抗性基因同时表达的小鼠胚胎成纤维细胞 (MEFs) ,为条件性基因剔除或小鼠胚胎干细胞克隆的筛选创造条件。将pTK hygR pA ,PGK neoR pA两个转录单元分别克隆至pBluescript载体中获得hygR neoR 双抗性基因表达质粒 ,以KpnⅠ和XbaⅠ双酶切 ,回收 4 2 4 5bp串联基因片段 ,经显微注射获得HygR neoR 转基因小鼠。PCR及Southernblot鉴定转基因小鼠基因型 ;RT PCR检测hygR、neoR 基因在转基因阳性小鼠组织及MEFs中的表达。经显微注射共获得 7只转基因阳性小鼠 (Founders,G0代 ) ,经交配繁育 ,建立了 6个转基因小鼠系。RT PCR检测其中 5个转基因阳性小鼠系F1代杂合子成年雌性小鼠肝脏、卵巢组织中hygR 、neoR 基因的表达 ,发现hn30 ,hn33,hn6 6和hn6 7系阳性小鼠的 1种或 2种组织中有hygR 、neoR 的表达 ;RT PCR检测发现hyg和neo抗性基因在从hn30和hn6 6系分离培养的MEFs中表达。通过显微注射 ,建立了表达hyg neo抗性基因的转基因小鼠系 ,转基因表达检测发现两个转基因小鼠系的胚胎成纤维细胞中表达双抗性基因。 展开更多
关键词 潮霉素基因 霉素基因 基因小鼠 小鼠胚胎成纤维细胞
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潮霉素B抗性基因在木醋杆菌中的整合表达 被引量:1
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作者 闵勇 吴顺清 +6 位作者 朱海云 方北松 万中义 王开梅 吴昊 陈华 杨自文 《湖北农业科学》 北大核心 2010年第12期3064-3066,共3页
以质粒pSET152为出发载体,构建潮霉素B抗性基因的表达载体pSET152-HYG,通过大肠杆菌-木醋杆菌的属间接合转移将pSET152-HYG导入木醋杆菌,在位点特异性重组酶作用下潮霉素抗性基因B整合到木醋杆菌的染色体上。与出发菌株相比,重组菌株传... 以质粒pSET152为出发载体,构建潮霉素B抗性基因的表达载体pSET152-HYG,通过大肠杆菌-木醋杆菌的属间接合转移将pSET152-HYG导入木醋杆菌,在位点特异性重组酶作用下潮霉素抗性基因B整合到木醋杆菌的染色体上。与出发菌株相比,重组菌株传代稳定,潮霉素抗性有了较大的提高,从100μg/mL提高到了400μg/mL以上,而产纤维素能力只略有下降。 展开更多
关键词 潮霉素B基因 接合转移 整合表达 木醋杆菌
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抗潮霉素B的水稻原生质体的再生 被引量:5
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作者 杨歧生 颜秋生 +1 位作者 金小平 张雪琴 《浙江大学学报(自然科学版)》 CSCD 1996年第5期582-588,共7页
本实验室构建的具有潮霉素B(HPT)抗性基因、卡那霉素抗性基因(KanR)和虫萤光素酶基因(LCC)的质粒pTHL27DNA,用聚乙二醇(PEG)法导入到水稻广亲和品种02428的原生质体细胞内.研究原生质体抗性筛选... 本实验室构建的具有潮霉素B(HPT)抗性基因、卡那霉素抗性基因(KanR)和虫萤光素酶基因(LCC)的质粒pTHL27DNA,用聚乙二醇(PEG)法导入到水稻广亲和品种02428的原生质体细胞内.研究原生质体抗性筛选和原生质体再生的条件.结果,在含有25μg/ml潮霉素B和100nμg/ml卡那霉素的培养基KPR和N6内连续处理4星期,可以很好地除去非转化的敏感的原生质体再生细胞,然后在无抗菌素选择压力的培养基中,转化细胞可再生成小植株. 展开更多
关键词 水稻 原生质体 再生 潮霉素B基因
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利用CRISPR/Cas9技术敲除转基因水稻中的潮霉素标记基因 被引量:1
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作者 彭梅芳 甘凤 +3 位作者 潘春梅 宋健兰 范晓丽 陈克贵 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2020年第5期901-906,共6页
【目的】在植物转基因研究中,使用选择标记基因(Selectable Marker Gene,SMG)使得转化子的筛选更准确便利,但存在SMG的转基因植株可能对人类健康及生态环境造成潜在危害,这也限制了转基因植物商业化的应用前景。因此去除转基因植物中的... 【目的】在植物转基因研究中,使用选择标记基因(Selectable Marker Gene,SMG)使得转化子的筛选更准确便利,但存在SMG的转基因植株可能对人类健康及生态环境造成潜在危害,这也限制了转基因植物商业化的应用前景。因此去除转基因植物中的SMG十分必要。【方法】本研究利用CRISPR/Cas9基因编辑技术,针对水稻转基因中常用的SMG潮霉素抗性基因(hygromycin phosphotransferase II,hptII)设计构建了编辑载体,利用农杆菌(LBA4404)介导的遗传转化方法转化水稻日本晴,得到转化植株,再将转化植株与带有hptII基因的植株进行杂交。【结果】通过遗传转化及分子鉴定,本研究得到了18株可用于编辑hptII基因的转化植株,进一步对转化植株与带有hptII基因的植株杂交的F1代进行检测,经PCR检测及测序验证表明,在杂交F1代植株中,hptII基因的DNA确有编辑发生,包括碱基缺失、替换以及插入等,使得hptII基因不能成功转录。【结论】利用CRISPR/Cas9技术,成功获得了删除hptII基因的转基因水稻。这为植物转基因研究实现无选择标记基因(marker-free)奠定了基础。 展开更多
关键词 水稻 遗传转化 潮霉素基因 无选择标记基因 CRISPR/Cas9
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粳稻抗虫转基因保持系的研究
7
作者 李艳萍 牛芝霞 +5 位作者 邹美智 孙海波 周维 牛景 朱祯 徐鸿林 《天津农业科学》 CAS 2004年第3期7-11,共5页
利用基因枪转化法,以优质粳稻保持系早花二B为受体,获得了含有GNA和Hyg基因的转基因植株。对T2产生的6个纯合株系进行多代潮霉素筛选、PCR分子检测及稻飞虱接种鉴定,表明标记基因在受体中稳定遗传,并高效表达,且一经纯合不再分离;而目... 利用基因枪转化法,以优质粳稻保持系早花二B为受体,获得了含有GNA和Hyg基因的转基因植株。对T2产生的6个纯合株系进行多代潮霉素筛选、PCR分子检测及稻飞虱接种鉴定,表明标记基因在受体中稳定遗传,并高效表达,且一经纯合不再分离;而目的基因表达效果不一样,只有T-10(克隆号A5-32)表达效果最好,其抗虫性达到中抗(MR)以上水平,比受体抗性(S)明显提高。将转基因保持系与不育系早花二A回交,获得的转基因不育系高抗潮霉素,且抗性也完全纯合,表明转基因保持系的抗性基因已转化到不育系中,并得到高效表达。 展开更多
关键词 粳稻 基因保持系 雪花莲外源凝集素基因 潮霉素基因 虫性
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转Wx-cDNA基因水稻无抗性选择标记植株的筛选
8
作者 于恒秀 徐丽 邵文奇 《江苏农业科学》 CSCD 北大核心 2008年第1期57-59,共3页
本试验以直链淀粉含量不同的粳稻品种武香9915和糯稻品种苏御糯、广陵香糯为受体材料,运用根癌农杆菌介导的双载体共转化技术分别将含有潮霉素抗性(HPT)选择标记基因和Wx-cDNA的2个T-DNA区序列导入上述受体中,获得了大量转基因水稻植株... 本试验以直链淀粉含量不同的粳稻品种武香9915和糯稻品种苏御糯、广陵香糯为受体材料,运用根癌农杆菌介导的双载体共转化技术分别将含有潮霉素抗性(HPT)选择标记基因和Wx-cDNA的2个T-DNA区序列导入上述受体中,获得了大量转基因水稻植株。对转基因水稻植株进行PCR检测,结果表明:目的基因和潮霉素抗性选择标记基因可以共整合到细胞中,并可以在后代中发生分离,从而可以筛选出仅含有目的基因而不含选择标记基因的转基因植株。 展开更多
关键词 水稻 基因植株 Wx-cDNA 潮霉素性标记基因 共转化 性选择标记筛选
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Bt/CpTI转基因稻及其非转基因亲本对照在间隔种植条件下的转基因漂移 被引量:30
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作者 戎俊 宋志平 +3 位作者 苏军 夏辉 王锋 卢宝荣 《生物多样性》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期309-314,共6页
随着转基因技术的迅速发展,越来越多的转基因作物被培育出来。转基因作物的外源转基因通过花粉传播向非转基因作物的漂移,会影响非转基因作物品种的种子纯度,从而可能导致一系列生物安全问题。为了研究转基因栽培水稻(Oryzasativa)中的... 随着转基因技术的迅速发展,越来越多的转基因作物被培育出来。转基因作物的外源转基因通过花粉传播向非转基因作物的漂移,会影响非转基因作物品种的种子纯度,从而可能导致一系列生物安全问题。为了研究转基因栽培水稻(Oryzasativa)中的外源转基因通过花粉介导向非转基因水稻品种逃逸的可能性及其频率,我们选用3个含双价抗虫基因(Bt/CpTI)的转基因水稻品系及其相对应的非转基因水稻亲本品种(近等基因系)进行了转基因漂移的实验。为了获取在近距离状况下转基因水稻与非转基因水稻品种之间的转基因漂移频率,采用了转基因与非转基因水稻品种间隔种植的栽培方式,分别在福建省福州市和海南省三亚市的转基因环境安全实验地进行实验,并利用潮霉素抗性筛选标记基因来鉴定转基因和非转基因稻的杂种。共检测了从非转基因水稻品种随机收获的70,056颗种子,以此计算转基因漂移频率。结果表明,在相邻种植的情况下,由这3个转基因水稻向对应的非转基因水稻品种的转基因漂移的频率比较低(0.275–0.832%)。如此近距离条件下获得的低转基因漂移频率表明,对于严格自花授粉的水稻而言,通过一定的隔离措施,能有效地降低由花粉介导的转基因漂移导致的非转基因种子混杂。 展开更多
关键词 基因漂移 基因水稻 潮霉素基因 基因逃逸
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雪花莲外源凝集素基因在水稻保持系上的转化 被引量:4
10
作者 牛芝霞 朱祯 +5 位作者 李艳萍 吴茜 邹美智 牛景 孙海波 周维 《天津农业科学》 CAS 2003年第2期1-4,共4页
通过把雪花莲外源凝集素基因(GNA)与潮霉素抗性基因(Hyg)构建到同一表达载体上,利用基因枪转化方法,把雪花莲外源凝集素基因导入粳稻保持系中,通过PCR方法和潮霉素抗性筛选,检测该基因的导入情况,发现部分克隆植株只具有单一潮霉素抗性... 通过把雪花莲外源凝集素基因(GNA)与潮霉素抗性基因(Hyg)构建到同一表达载体上,利用基因枪转化方法,把雪花莲外源凝集素基因导入粳稻保持系中,通过PCR方法和潮霉素抗性筛选,检测该基因的导入情况,发现部分克隆植株只具有单一潮霉素抗性,需要结合抗虫性测定来确定GNA基因的导入及表达。 展开更多
关键词 雪花莲外源凝集素基因 水稻 保持系 遗传转化 潮霉素基因 基因 PCR方法 基因表达
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家蝇介导的水稻基因逃逸风险评估
11
作者 蒲德强 刘家富 +6 位作者 任少鹏 高明清 杨帆 时敏 叶恭银 魏书军 陈学新 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期1038-1044,共7页
【目的】对转基因作物进行生态风险评估是大面积种植前的一个必要步骤,水稻Oryza sativa访花昆虫有上百种,包括家蝇Musca domestica。本研究旨在明确访花昆虫家蝇介导转基因水稻外源基因逃逸的风险。【方法】2010年,我们使用转基因水稻B... 【目的】对转基因作物进行生态风险评估是大面积种植前的一个必要步骤,水稻Oryza sativa访花昆虫有上百种,包括家蝇Musca domestica。本研究旨在明确访花昆虫家蝇介导转基因水稻外源基因逃逸的风险。【方法】2010年,我们使用转基因水稻B1,B6和G8-7作为父本(花粉供体),用同源非转基因水稻Jiazao 935和Wuyunjing 7作为母本(花粉受体),并用家蝇作为授粉昆虫,在浙江大学华家池和长兴试验基地开展了田间种植试验,对收割的后代水稻种子进行室内种植培养,对种苗用潮霉素B和草甘膦处理进行转基因杂交种检测,对存活植株进行潮霉素和草甘膦抗性基因PCR检测,测试家蝇介导的转基因水稻外源基因逃逸频率。【结果】对浙江两个测试基地3个转基因水稻品种共计超过216500粒后代水稻种子进行的检测及结果表明,在毗邻区域杂交种少,家蝇授粉区和无家蝇授粉区转基因水稻外源基因向非转基因水稻逃逸频率均较低(0~0.64%)。【结论】家蝇介导的转基因水稻外源基因逃逸频率较低,家蝇没有增加转基因水稻外源基因逃逸的风险。 展开更多
关键词 水稻 家蝇 基因逃逸 基因作物 潮霉素基因 草甘膦
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赤霉菌原生质体DNA转化 被引量:6
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作者 朱平 杨金玲 +1 位作者 朱慧新 程克棣 《菌物系统》 CSCD 北大核心 2000年第2期283-287,共5页
Methods for the protoplast preparation and DNA transformation of Gibberella fujikuroi were established. The protoplasts were transformed with plasmid pAN7-1, which carries hygromycin B resistant gene (hPh), and the tr... Methods for the protoplast preparation and DNA transformation of Gibberella fujikuroi were established. The protoplasts were transformed with plasmid pAN7-1, which carries hygromycin B resistant gene (hPh), and the transformation frequency was about 10. Some transformants grew vigorously on the selectivemedium containing 400μg / ml of hygromycin B, while the minimum inhibitory concentration (MIC) of the antibiotic to the recipient strain was oniy 20μg / ml. Southern hybridization showed that the hph gene has integrated into the genomic DNA of the recipient strain in different manners. 展开更多
关键词 赤霉菌 原生质体 DNA转化 潮霉素B基因
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一种农杆菌介导的赤霉菌CCRC3.572的转化方法 被引量:2
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作者 郝丽梅 龚伟 +2 位作者 梅兴国 刁志花 曾瑞红 《生物技术通讯》 CAS 2006年第6期888-890,共3页
目的:建立农杆菌Ti质粒介导的转化赤霉菌的新方法。方法:以农杆菌Ti质粒pCAMBIA0390为基础,构建带有潮霉素抗性基因表达盒的双元载体,并用农杆菌介导的方法转化赤霉菌。结果:构建了双元载体pCAMBIA0390-hph(PgpdA),并获得了具有潮霉素... 目的:建立农杆菌Ti质粒介导的转化赤霉菌的新方法。方法:以农杆菌Ti质粒pCAMBIA0390为基础,构建带有潮霉素抗性基因表达盒的双元载体,并用农杆菌介导的方法转化赤霉菌。结果:构建了双元载体pCAMBIA0390-hph(PgpdA),并获得了具有潮霉素抗性的赤霉菌转化子。结论:农杆菌介导的方法适于赤霉菌的转化,为赤霉菌的遗传研究提供了一种新的手段。 展开更多
关键词 赤霉菌 农杆菌 双元载体 转化 潮霉素B基因
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丝状真菌转化载体的改进 被引量:2
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作者 李继刚 陈永利 +1 位作者 杨忠祥 郑建坡 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2013年第5期110-113,共4页
为了改进农杆菌介导丝状真菌遗传转化用的Ti双元载体,将质粒pUCATPH上真菌trpC基因启动子驱动的潮霉素B抗性基因(hygB)表达盒转移到Ti质粒pPZP111上,构建成用于丝状真菌遗传转化的Ti载体pATZ。将植物表达载体pDL916上的草丁膦抗性bar基... 为了改进农杆菌介导丝状真菌遗传转化用的Ti双元载体,将质粒pUCATPH上真菌trpC基因启动子驱动的潮霉素B抗性基因(hygB)表达盒转移到Ti质粒pPZP111上,构建成用于丝状真菌遗传转化的Ti载体pATZ。将植物表达载体pDL916上的草丁膦抗性bar基因重组到载体pKS-trpC上,构建成含真菌启动子、终止子调控的bar基因表达盒的中间载体pTrpCBar;之后将该表达盒转移到pPZP111载体上,得到以bar基因为筛选标记的真菌转化Ti质粒pTBZ。上述质粒载体经酶切鉴定和DNA测序证实构建正确,为丝状真菌的农杆菌介导遗传转化提供了新的工具。 展开更多
关键词 农杆菌介导转化 丝状真菌 转化载体 草丁膦基因bar 潮霉素B基因hygB 真菌启动子
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根癌农杆菌介导的泡盛曲霉遗传转化系统的构建 被引量:3
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作者 陈凤 王坤 +3 位作者 银超 李德明 任楠 李俊星 《安徽农业科学》 CAS 2012年第16期8800-8805,共6页
[目的]建立根癌农杆菌介导的泡盛曲霉遗传转化系统,探讨利用泡盛曲霉表达异源蛋白的可行性。[方法]从国内主要菌种库中购买泡盛曲霉菌株,根据分泌蛋白图谱分析确定合适的宿主菌,在此基础上通过药物敏感性分析确定遗传转化的选择标记,并... [目的]建立根癌农杆菌介导的泡盛曲霉遗传转化系统,探讨利用泡盛曲霉表达异源蛋白的可行性。[方法]从国内主要菌种库中购买泡盛曲霉菌株,根据分泌蛋白图谱分析确定合适的宿主菌,在此基础上通过药物敏感性分析确定遗传转化的选择标记,并利用构建的泡盛曲霉遗传转化体系对米黑根毛霉脂肪酶基因RML进行转化、表达研究,通过转化子鉴定及性质分析考察泡盛曲霉作为异源蛋白表达系统的可行性。[结果]通过分泌蛋白图谱分析确定泡盛曲霉CBS115.52和CICC2257作为异源蛋白表达的宿主菌;药物敏感性试验确定潮霉素抗性基因(HygBr)作为有效的遗传选择标记;在此基础上,利用根癌农杆菌介导的转化方法(agrobacterium tumefaciensmediated transformation,ATMT),将带有HygBr的质粒pHGW-amdS成功导入泡盛曲霉宿主菌CBS115.52,建立以HygBr为选择标记的泡盛曲霉遗传转化体系。利用该体系,介导米黑根毛霉脂肪酶(Rhizomucor miehei lipase,RML)的表达载体转化泡盛曲霉,通过底物水解试验、SDS-PAGE及Western blot确定RML基因已在泡盛曲霉中表达。[结论]该研究证明了根癌农杆菌介导转化泡盛曲霉作为异源蛋白的表达体系具有潜在的可行性。 展开更多
关键词 泡盛曲霉 根癌农杆菌介导转化(ATMT) 潮霉素基因 米黑根毛霉脂肪酶(RML)
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根癌农杆菌介导的新暗色柱节孢菌遗传转化 被引量:1
16
作者 王猛 王周雯 +7 位作者 丁一 徐敏 郭攀阳 刘成立 李佳雪 李涛 韦双双 汤华 《热带生物学报》 2021年第4期412-418,共7页
火龙果是一种新兴的热带水果,随着种植面积的不断增大,病害问题日趋严重,其中危害最大的是火龙果溃疡病,导致火龙果溃疡病的病原菌为新暗色柱节孢菌(Neoscytalidium dimidiatum)。为了研究新暗色柱节孢菌的遗传变异与基因功能,必须建立... 火龙果是一种新兴的热带水果,随着种植面积的不断增大,病害问题日趋严重,其中危害最大的是火龙果溃疡病,导致火龙果溃疡病的病原菌为新暗色柱节孢菌(Neoscytalidium dimidiatum)。为了研究新暗色柱节孢菌的遗传变异与基因功能,必须建立有效的遗传转化体系,但目前国内外未见相关报道。本研究通过构建含有gpdA启动子、绿色荧光蛋白(green fluorescent protein)和潮霉素(Hygromycin)抗性基因为筛选标记的双元表达载体,对新暗色柱节孢菌的孢子进行根癌农杆菌介导的遗传转化,成功获得了阳性转化子。通过荧光显微镜观察表明,阳性转化子菌丝能够产生绿色荧光,野生型菌丝不能产生绿色荧光;PCR检测证明了转化子基因组中整合了潮霉素抗性基因。因此,本研究成功实现了根癌农杆菌介导下绿色荧光蛋白基因在新暗色柱节孢菌中的稳定遗传表达,为研究新暗色柱节孢菌对火龙果溃疡病的致病机制奠定了技术基础。 展开更多
关键词 火龙果溃疡病 新暗色柱节孢菌 潮霉素基因 绿色荧光蛋白 农杆菌介导的遗传转化
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禾谷类作物遗传转化的筛选方法
17
作者 李思经 《生物技术通报》 CAS CSCD 1990年第5期8-8,共1页
挑选转化的禾谷类作物后代最有效的方法之一是:筛选具有卡那霉素或潮霉素抗性基因的种子.通常,这一工作是在琼脂培养基上完成的.但该方法需用的抗生素量较大,且一些未转化的植株亦能生长.
关键词 遗传转化 禾谷类作物 潮霉素基因 琼脂培养基 网络支撑 固体培养基 泡沫聚苯乙烯 芽生长
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Inducible regulation of GDNF expression in human neural stem cells 被引量:5
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作者 WANG ShuYan REN Ping +3 位作者 GUAN YunQian ZOU ChunLin FU LinLin ZHANG Yu 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS 2013年第1期32-39,共8页
Glial cell derived neurotrophic factor (GDNF) holds promises for treating neurodegenerative diseases such as Parkinson's dis- ease. Human neural stem cells (hNSCs) have proved to be a suitable cell delivery vehic... Glial cell derived neurotrophic factor (GDNF) holds promises for treating neurodegenerative diseases such as Parkinson's dis- ease. Human neural stem cells (hNSCs) have proved to be a suitable cell delivery vehicle for the safe and efficient introduction of GDNF into the brain. In this study, we used hNSCs-infected with a lentivirus encoding GDNF and the hygromycin re- sistance gene as such vehicles. A modified tetracycline operator 7 (tetO7) was inserted into a region upstream of the EFI-α promoter to drive GDNF expression. After hygromycin selection, hNSCs were infected with a lentivirus encoding a KRAB-tetracycline repressor fusion protein (TTS). TTS bound to tetO7 and suppressed the expression of GDNF in hNSCs. Upon administration of doxycycline (Dox) the TTS-tetO7 complex separated and the expression of GDNF resumed. The hNSCs infected with GDNF expressed the neural stem cell specific markers, nestin and sox2, and exhibited no significant change in proliferation rate. However, the rate of apoptosis in hNSCs expressing GDNF was lower compared with normal NSCs in response to actinomycin treatment. Furthermore, a higher percentage of Tuj-I positive cells were obtained from GDNF-producing NSCs under conditions that induced differentiation compared to control NSCs. The inducible expression of GDNF in hNSCs may provide a system for the controllable delivery of GDNF in patients with neurodegenerative diseases. 展开更多
关键词 neural stem cells GDNF lentivirus vectors tetracycline operator
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2016年高考理科综合模拟试题(二)
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作者 薛文堂 郭艳芳 周蓉 《山西教育(招生考试)》 2016年第5期93-117,共25页
关键词 动能定理 化学方程式 红绿色盲基因 苯丙酮尿症 饱和溶液 水果电池 澄清石灰水 理科综合 电离平衡 离子方程式 潮霉素基因 色素带 模拟试题
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