治疗性人源抗狂犬病毒抗体研究进展

狂犬病是由狂犬病毒（rabies virus,RV）引起的人兽共患疾病,发病后死亡率几乎达百分之百。狂犬病毒属弹状病毒科（Rhabdoviridae）狂犬病毒属（Lyssavirus）,基因组编码五种结构蛋白,其中由G基因编码的糖蛋白,是病毒与宿主细胞结合的配体,能诱导机体产生中和抗体,与病毒的毒力、致病性密切相关。

接种狂犬疫苗后抗狂犬病毒抗体水平检测结果分析

目的:为全面了解人接种狂犬疫苗后抗狂犬病毒抗体的水平,保护患者的生命安全,为今后的狂犬疫苗预防接种工作提供第一手资料。方法:对全程接种狂犬疫苗的患者,30天后抽取静脉血,按间接免疫荧光染色法检测抗狂犬病毒抗体。结果:2004年接种狂犬疫苗后抗狂犬病毒抗体水平检测合格率97.6%。其中男性96.9%,女性98.3%。2005年抗狂犬病毒抗体水平检测合格率97.2%,其中男性97.0%,女性97.4%。结论:通过0、3、7、14、28天全程接种狂犬疫苗后,97%以上的患者抗狂犬病毒抗体水平合格,还有3%左右的患者抗体水平低于保护阈值,需进一步加强接种。

290例注射狂犬疫苗前后抗狂犬病毒抗体检测

用吸收差值火箭电泳法对290例注射狂犬疫苗前后进行抗狂犬病毒抗体检测,显示抗狂犬病毒抗体阳性率为84.1%,其中狂犬疫苗第三针免疫后抗狂犬病毒抗体阳性率为6%,第四针为25%,第五针为80%以上。同时对联合使用狂犬疫苗与抗狂犬病毒血清的42例患者进行抗狂犬病毒检测,结果全部阳性。对注射狂犬疫苗后抗狂犬病毒抗体仍阴性的46例,经补种3～5支狂犬疫苗后,重新测定抗狂犬病毒抗体全部转为阳性。此外,对135例狂犬疫苗免前抗狂犬病毒抗体测定,全部显示阴性反应。

人源抗狂犬病毒二硫键稳定抗体在大肠杆菌中的融合表达

目的在大肠杆菌pMAL-P2x系统中表达anti-rabiesMBP-ScdsFv融合蛋白,酶切获得目的蛋白ScdsFv,进行纯化、鉴定及简单活性分析。方法利用DNA重组技术,将全长的ScdsFv蛋白基因克隆至原核表达载体pMAL-p2x中,重组质粒转化大肠杆菌E.coliER2566,IPTG诱导表达。表达产物经Xa酶切后,经Ni柱、AmyloseResin亲和层析进行纯化,SDS-PAGE和Western blot对其进行鉴定,ELISA检测其结合活性。结果成功地构建了重组质粒pMAL-ScdsFv,经诱导表达、蛋白酶切、亲和纯化后获得目的蛋白。ELISA检测其具有抗原特异结合活性,其热稳定性有显著提高。结论抗狂犬病毒ScdsFv蛋白具有良好的结合活性和生物学活性稳定性,可作为候选分子用于狂犬病的防治研究。

N-糖链切除对重组抗狂犬病毒单克隆抗体中和活性的影响

重组抗狂犬病毒单克隆抗体是一种全人源的抗病毒感染单抗,主要用于狂犬病毒暴露后预防。采用糖苷酶处理2种重组抗狂犬病毒单克隆抗体Mab1、Mab2水解切除N-糖链,通过糖染色和毛细管电泳检测确定N-糖链酶解程度,利用快速荧光灶抑制试验检测其中和活性,分析N-糖链切除对该单抗中和活性的影响。结果显示,N-糖链切除后抗体中和活性无明显变化。说明N-糖链对这两株抗狂犬病毒单抗的体外中和活性不是必须的结构成分。

定量检测猕猴血清中重组人源化抗狂犬病毒单克隆抗体间接ELISA法的建立

目的:建立定量检测血清中重组人源化抗狂犬病毒单克隆抗体(HuMabs)NM57的间接ELISA法,为药代动力学研究提供一种简单快速的方法。方法:采用狂犬病毒糖蛋白包被酶标板、HRP标记的IgG-Fc段为标记抗体,建立定量检测HuMabs NM57的间接ELISA法,并对其特异性、灵敏度、精密度及准确度进行检测。结果:间接ELISA法检测HuMabs NM57的灵敏度为5ng/mL,组内及组间精密度分别为2.6%～6.0%、8.5%～11.3%。结论:建立了灵敏度高、特异性强的检测HuMabs NM57的间接ELISA法,精密度及准确度均符合药代动力学要求,可用于猕猴及人血清中HuMabs NM57的检测。

抗狂犬病毒单克隆抗体中残留宿主细胞蛋白ELISA定量检测方法的验证

目的验证抗狂犬病毒单克隆抗体(单抗)中残留宿主细胞蛋白(host cell protein,HCP)ELISA定量检测方法。方法使用商用中国仓鼠卵巢细胞HCP残留ELISA检测试剂盒,测定2种针对不同表位的抗狂犬病毒单抗原液中的残留HCP,并验证该方法的专属性、准确度、精密度、线性、耐用性、检测限及定量限。结果2种抗狂犬病毒单抗发酵液稀释10000倍后检出的HCP含量分别为31.42和19.36 ng/ml。制剂溶液、HEK293F和E.coli培养上清液中未检出HCP。3种浓度的HCP加标供试品的加标回收率均在80%~120%之间。3种浓度的HCP加标供试品重复性检测结果及中间精密度检测结果相对标准偏差均<20%。分别对3次残余HCP检测绘制四参数标准曲线,决定系数均>0.990。在一定范围内改变孵育时间和显色时间,HCP测定结果在合理的偏差范围内。检测限和定量限分别为2和3 ng/ml。结论抗狂犬病毒单抗中HCP残留量的ELISA定量检测方法专属性、准确度、精密度、线性及耐用性良好。

42例狂犬疫苗免疫后抗体水平监测

尽管人类对狂犬病的认识已有两千多年的历史,但至今尚无特效的治疗方法,因此,应用狂犬疫苗免疫接种预防仍是有效的措施之一,为探求狂犬病疫苗免疫后的抗体水平,减少疾病的发生,本文报告了42例血清中抗狂犬病毒抗体水平的监测。

人源抗狂犬病毒单克隆抗体载体的构建及烟草转基因研究

为了构建高效表达人源抗狂犬病毒单克隆抗体载体,首先对人源抗狂犬病毒抗体(SO57)重链和轻链编码基因的密码子进行偏好性改造,添加增强外源基因表达的控制元件,然后分别与花椰菜花叶病毒35s启动子和木薯叶脉花叶病毒启动子融合,连接至植物表达载体pBI121上,然后将构建好的载体转入农杆菌LB4404,采用叶盘法转化烟草叶片。用分子生物学技术,对6株转基因烟草进行检测,电泳检测结果均为阳性。用酶联接免疫吸附剂法,检测6株烟草叶片中人源抗狂犬病毒单克隆抗体的表达。结果表明,6株烟草均成功表达人源抗狂犬病毒抗体。

某县2818例为抗狂犬病毒IgG抗体结果分析

目的 了解正阳县在2016年内被犬咬伤人数接种狂犬疫苗后抗体产生的情况。方法 对正阳县2016年狂犬病抗体IgG检测结果进行分析。结果 2818份血清标本,阳性2753份,总阳性率97.12%。其中男性1493例,阳性1450份,阳性率97.12%;女性1325例,阳性1303份,阳性率98.34%;男女之间无差异(x 2=4.63,P>0.05)。各年龄之间阳性率有统计学意义(x 2=14.33,P<0.05)。抗体阳性率各季度的检出率差异有统计学意义(x 2=38.49,P<0.05)。结论 狂犬疫苗常规免疫后进行抗体检测十分重要,特别是对暂时产生抗体滴度较弱时,应及时加强免疫接种,确保免疫效果。

狂犬病疫苗免疫后血清抗体检测结果分析

目的分析狂犬疫苗接种后抗狂犬病毒中和抗体的产生情况。方法暴露者在全程接种狂犬疫苗后10～30d,采集手指尖末梢血0.3 ml,用狂犬抗体酶联免疫吸附间接法作抗体测定。结果1 515例接种狂犬疫苗的暴露者抗体阳性1 458例,阳转率为96.24%,不同年龄人群之间抗体阳性率差异有统计学意义。结论接种狂犬疫苗的暴露者抗体阳转率较高,但未达到100%阳转。

惠州市1186例狂犬病疫苗接种者免疫效果分析

目的分析惠州市人狂犬病疫苗暴露后免疫的抗体水平,及时了解和观察本市犬咬伤人群接种狂犬病疫苗后(IgG)抗体产生的免疫效果,评价目前本市使用的狂犬病疫苗质量,为今后的狂犬病疫苗预防接种工作及制订科学完善的防患措施提供科学依据。方法惠州市人狂犬病疫苗暴露后(咬伤后),抽取全程接种五针疫苗1个月后自愿进行狂犬病毒抗体检测人员静脉血,按酶联免疫法检测抗狂犬病毒抗体。结果惠州市1186例接种狂犬疫苗后抗狂犬病毒抗体水平检测阳性率为96.1%。其中男性97.2%,女性94.5%。不同年龄组抗狂犬病毒抗体阳性率有随着年龄的增长而呈下降的趋势。不同厂家狂犬疫苗免疫效果相当,差异无统计学意义。结论通过0、3、7、14和28d全程接种狂犬疫苗后,96.1%以上的患者抗狂犬病毒抗体水平合格,还有3.9%的患者抗体水平低于保护阈值,需进一步加强接种。

甘肃省近年部分医学科研进展

1.治疗阑尾炎新药-竹叶椒片兰州医学院第一附属医院历经八年研制成功治疗阑尾炎新药-竹叶椒片,卫生部于1989年审查批准列为国家级新药,颁发了新药证书。1990年7月由兰州中药厂开始批量生产。目前,阑尾炎的治疗仍以手术为主。我国用中医药治疗阑尾炎虽取得了一定成绩,但多停留在复方汤剂阶段。本药依照科学原理。

2006，狗年回搜

2006,狗年回搜跨进金狗年时,不光爱狗的我们群情高涨,很多人都以不可遏制的热情去揣度即将到来的一年——包括引领潮流的商家和受奉香火的算命大师。可走过了一年之后,暮然回首,才发现美好与曲折永远都交错着,2006这个狗年,也是一样。