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酶标记抗独特型抗体NP30的Dot-ELISA检测血吸虫抗体 被引量:9
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作者 仇镇宁 陶如华 +4 位作者 吴宜琴 马磊 陈文航 焦国庆 李旭 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 1991年第4期209-210,共2页
本文报道用辣根过氧化物酶标记抗独特型抗体NP_(30)进行Dot-ELISA直接法,检测人血清中的日本血吸虫抗体。急性血吸虫病人粪检阳性符合率88.9%:慢性病人74.1%;正常人的假阳性率为3%。与常规ELISA方法相比,均无显著的差别。提示用酶标... 本文报道用辣根过氧化物酶标记抗独特型抗体NP_(30)进行Dot-ELISA直接法,检测人血清中的日本血吸虫抗体。急性血吸虫病人粪检阳性符合率88.9%:慢性病人74.1%;正常人的假阳性率为3%。与常规ELISA方法相比,均无显著的差别。提示用酶标记NP30的Dot-ELISA同样可以用于检测日本血吸虫抗体,且方法简便易行,便于现场应用。 展开更多
关键词 血吸虫抗体 DOT-ELISA np30 酶标记 独特型抗体 阳性符合率 急性血吸虫病 假阳性 慢性病人 日本血吸虫
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日本血吸虫单克隆抗独特型抗体NP30单链抗体基因的构建和表达 被引量:3
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作者 宋晓彤 冯振卿 +4 位作者 王祝鸣 仇镇宁 李芸茜 管晓虹 黄华梁 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期152-154,共3页
目的 构建日本血吸虫单克隆抗独特型抗体NP30单链抗体 (scFv)基因。 方法 通过PCR方法体外扩增并经测序验证的重链、轻链可变区 (VH、VL)基因先后重组入原核表达质粒 pTHA90相应的位点上 ,中间通过一连接肽 (Gly4 Ser) 3基因连接构... 目的 构建日本血吸虫单克隆抗独特型抗体NP30单链抗体 (scFv)基因。 方法 通过PCR方法体外扩增并经测序验证的重链、轻链可变区 (VH、VL)基因先后重组入原核表达质粒 pTHA90相应的位点上 ,中间通过一连接肽 (Gly4 Ser) 3基因连接构建成单链抗体基因 (scFv) ,连接产物转化相应受体菌Top1 0 ,提取质粒 ,酶切鉴定重组克隆。表达产物经ELISA方法测定活性。 结果 重组克隆经酶切鉴定可见预期大小的片段 ,表明重组成功。表达产物经ELISA检测 ,OD4 92 值为 1 .0 6 ,高于阴性对照 3倍以上 ,证实具有与相应抗原结合的能力。 结论 成功地构建了scFv基因 。 展开更多
关键词 日本血吸虫 独特型抗体 np30单链抗体 基因克隆 基因表达
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日本血吸虫单克隆抗独特型抗体NP30诱导抗卵免疫的研究 被引量:6
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作者 冯振卿 李玉华 +3 位作者 仇镇宁 李芸茜 薛婉芬 管晓虹 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1999年第1期17-20,共4页
目的观察日本血吸虫单克隆抗独特型抗体NP30对日本血吸虫雌虫生殖产卵及卵胚发育的影响。方法腹腔注射NP30主动免疫C57BL/6小鼠,连续3次,对照组腹腔注射SP2/0腹水。结果尾蚴攻击感染后第27天,NP30免疫组... 目的观察日本血吸虫单克隆抗独特型抗体NP30对日本血吸虫雌虫生殖产卵及卵胚发育的影响。方法腹腔注射NP30主动免疫C57BL/6小鼠,连续3次,对照组腹腔注射SP2/0腹水。结果尾蚴攻击感染后第27天,NP30免疫组肝组织内虫卵数下降了30.91%,雌虫子宫内虫卵数减少了38.55%。尾蚴攻击感染后第39天,NP30免疫组肝组织内的成熟虫卵下降了66.63%,死亡虫卵增加了60.66%。结论NP30主动免疫小鼠具有抗雌虫生殖产卵和抗卵胚发育的双重功效。 展开更多
关键词 日本血吸虫 卵免疫 单克隆抗体 np30
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日本血吸虫单克隆抗独特型抗体NP30重链可变区基因的体外扩增克隆及序列分析 被引量:2
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作者 宋晓彤 冯振卿 +5 位作者 仇镇宁 李芸茜 林敏 柏慧 沙家豪 管晓虹 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 2002年第1期11-13,共3页
目的 分离日本血吸虫单克隆抗独特型抗体 NP30重链可变区 (VH)基因并测定其序列。方法 根据鼠免疫球蛋白重链可变区基因 FR1和 FR4序列的保守性 ,化学合成体外扩增 Ig重链可变区基因的数对引物。以日本血吸虫单克隆抗独特型抗体 NP30... 目的 分离日本血吸虫单克隆抗独特型抗体 NP30重链可变区 (VH)基因并测定其序列。方法 根据鼠免疫球蛋白重链可变区基因 FR1和 FR4序列的保守性 ,化学合成体外扩增 Ig重链可变区基因的数对引物。以日本血吸虫单克隆抗独特型抗体 NP30的杂交瘤细胞株基因组 DNA为模板 ,扩增 VH 基因 ,将其克隆入 p U C19载体 ,重组子用 Sanger's双脱氧链终止法测定序列 ,将序列与Gene Bank中已发表的抗体序列比较。结果  VH 基因全长 35 7bp,属鼠免疫球蛋白重链第 亚类 ,由种系基因 V、Dsp2 .8与 JH4重排而来。该 VH 基因序列已被 Gene Bank收录 (accession NoAF2 82 6 2 2 )。结论 该 VH 基因为日本血吸虫单克隆抗独特型抗体 展开更多
关键词 日本血吸虫 独特型抗体 单克隆抗体 基因扩增 序列分析 np30 重链可变区
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日本血吸虫NP30抗体检测方法的优化 被引量:3
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作者 许宁 吴玉龙 +6 位作者 仇镇宁 陈凤 李远林 方文 杨杰 冯振卿 管晓虹 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 2006年第2期88-92,共5页
目的为了提高单克隆抗独特型抗体NP30抗体检测系统在大山区日本血吸虫病疫区的诊断效能,在原有的双抗体夹心ELISA方法的基础上对其进行优化、改良,建立间接ELISA血清学诊断方法。方法通过正交设计,选用L27(313)正交表,对NP30腹水包被酶... 目的为了提高单克隆抗独特型抗体NP30抗体检测系统在大山区日本血吸虫病疫区的诊断效能,在原有的双抗体夹心ELISA方法的基础上对其进行优化、改良,建立间接ELISA血清学诊断方法。方法通过正交设计,选用L27(313)正交表,对NP30腹水包被酶标板的浓度、血清浓度、血清孵育时间和辣根过氧化物酶标记抗人IgG的二抗孵育时间共4个因素的3个水平进行不同组合的实验,确定该间接法的最佳实验条件。并用建立的方法对50份云南大山区日本血吸虫粪孵阳性病人血清样本和50份非疫区正常人血清样本进行检测,评价其敏感性和特异性。结果确定的该间接法最佳检测条件为:NP30腹水4μg/ml包被酶标板,血清浓度为1∶100,37℃孵育60min,二抗为37℃孵育30min。该方法的敏感性和特异性分别为88%和96%。结论该方法具有较高的诊断价值,可用于大山区日本血吸虫病疫区的诊断检测。 展开更多
关键词 日本血吸虫病 正交试验 抗独特型抗体np30 酶联免疫吸附试验
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抗独特型单抗NP30抗山羊血吸虫病的免疫研究 被引量:1
6
作者 冯振卿 李玉华 +3 位作者 仇镇宁 李祥瑞 许立新 管晓虹 《上海免疫学杂志》 CSCD 北大核心 2001年第2期74-76,共3页
观察日本血吸虫单克隆抗独特型抗体NP30主动免疫对山羊血吸虫病的抗病免疫作用。山羊随机分为 2组。实验组 12只 ,NP30免疫剂量为 10 0 0 μg/只 /次 ,后腿肌肉注射 ,连续免疫 3次 ,最后一次免疫后 8周进行尾蚴攻击。对照组 10只 ,肌肉... 观察日本血吸虫单克隆抗独特型抗体NP30主动免疫对山羊血吸虫病的抗病免疫作用。山羊随机分为 2组。实验组 12只 ,NP30免疫剂量为 10 0 0 μg/只 /次 ,后腿肌肉注射 ,连续免疫 3次 ,最后一次免疫后 8周进行尾蚴攻击。对照组 10只 ,肌肉注射SP2 / 0腹水。 2组山羊于尾蚴攻击感染后第 12周处死。应用NYD 10 0 0型图像分析系统测量肝脏虫卵肉芽肿大小和纤维化程度。实验结果表明 ,实验组山羊肝脏虫卵肉芽肿的面积、体积减小 ,数量明显减少 ,肝纤维化程度减轻 ,山羊体重增加。本文提示NP30主动免疫对山羊血吸虫病可产生较好的抗病免疫作用 ,NP30可作为血吸虫病疫苗候选分子。 展开更多
关键词 日本血吸虫病 独特型抗体 单克隆抗体 np30 免疫作用
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